黃連解毒湯含藥血清對泡沫細胞ABCA1表達與膽固醇含量的影響

許麗婷 徐彬人 盛 蒙 吳 瓊 王文佳 田維毅 俞 琦

貴州中醫藥大學，貴州 貴陽 550025

黃連解毒湯由黃連、黃芩、黃柏、梔子四味藥物組成，是清熱解毒最具代表的方藥之一，具有瀉火解毒功效，主治熱毒充斥三焦之證。其臨床應用非常廣泛，對Ⅱ型糖尿病、動脈粥樣硬化、老年性癡呆等病癥有明顯療效[1-3]。現代研究證實，黃連解毒湯可通過抗炎、降血脂、抑制血管平滑肌細胞增殖等方面發揮抗動脈粥樣硬化作用[4]。但其對細胞內膽固醇含量的影響及作用機制尚不明確。三磷酸腺苷結合盒轉運體A1(ABCA1)是調控細胞膽固醇流出的有效途徑，其表達不足將導致巨噬細胞內沉積大量的膽固醇，加重動脈粥樣硬化病變。本研究擬采用黃連解毒湯含藥血清干預泡沫細胞，觀察黃連解毒湯含藥血清對泡沫細胞ABCA1蛋白及膽固醇含量的影響，探討黃連解毒湯是否通過調節ABCA1蛋白表達及泡沫細胞膽固醇流出而發揮抗動脈粥樣硬化作用。為其臨床應用提供實驗基礎和科學依據。

1 材料

1.1 細胞株 小鼠巨噬細胞系RAW264.7細胞，購自上海中僑新舟。

1.2 藥物與試劑 黃連、黃芩、黃柏、梔子購自同仁堂貴陽藥店，經貴州中醫藥大學生藥教研室鑒定為正品。胎牛血清(美國Hyclone公司)，DMEM和青鏈霉素混合液(美國Gibco公司)，氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，ox-LDL，廣州奕源生物)，總膽固醇及游離膽固醇檢測試劑盒(北京普利萊基因技術有限公司)，逆轉錄試劑盒(美國Invitrogen公司)。ABCA1和β-actin引物(上海生工生物工程)。

1.3 動物 健康SD大鼠24只，SPF級，雌雄各半，體質量(200±20)g，購自重慶騰鑫比爾實驗動物銷售有限公司，許可證號: SCXK-( 軍) 2012-0011。……