《金匱要略》“當先實脾”對肝損傷大鼠肝細胞凋亡的干預作用

鄭智禮 史興華 于瀚 張億 高藝寧 魏偉莉 鄧秀蘭

“見肝之病，知肝傳脾，當先實脾”為仲景“治未病”的代表性原文。研究表明，實脾治肝常取得事半功倍的療效，但現(xiàn)有研究多集中在肝脾同病、同調(diào)狀態(tài)下的機制研究，而遵循《金匱要略》原旨，著眼于“當先實脾”之“先”，探討其客觀性的相關(guān)報道乏陳。基于此，本課題采用肝郁疊加慢性肝損傷大鼠模型，通過不同的分組及給藥方式，復制“當先實脾”的治療方案。從肝功能生化指標、肝組織病理學的觀察結(jié)果評價模型及藥效；從5h-尿木糖排泄率的檢測結(jié)果探討“知肝傳脾”的客觀性；通過對比正常組、模型組及各干預組上述指標的變化，尋求 “當先實脾”的生物學依據(jù)，通過檢測肝凋亡指數(shù)(apoptotic index，AI)、肝組織B細胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2，Bcl-2)及Bcl-2相關(guān)X蛋白(Bcl-2-associated X protein，Bax)的表達，觀察“當先實脾”對肝細胞凋亡的影響，為豐富和發(fā)展中醫(yī)藥防治肝病做出有益的科學探索。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

健康SD大鼠48只，雄性，體重(180±20)g，合格證號：SCXK(京)2016-0002，由斯貝福(北京)生物技術(shù)有限公司提供。飼于室溫(25±0.5)℃，相對濕度(55±5)%，采用 12小時明暗交替光照，自由攝食飲水。

1.2 實驗藥物及配置

陽性藥：雙環(huán)醇200 mg/kg[2-3]；柴芍六君子湯方：柴胡12 g、白芍15 g、黨參15 g、茯苓10 g、炙甘草5 g、白術(shù)10 g、法半夏10 g、陳皮10 g、枳殼10 g、焦三仙各10 g；四逆散方：柴胡12 g、白芍15 g、枳殼10 g、炙甘草5 g；六君子湯方：黨參15 g、茯苓10 g、炙甘草5 g、白術(shù)10 g、法半夏10 g、陳皮10 g、焦三仙各10 g。

實驗用藥均購自北京同仁堂醫(yī)藥藥材有限公司，經(jīng)北京中醫(yī)藥大學藥用植物教研室鑒定，生藥劑量比例按原著換算。各組藥物常規(guī)煎煮3次，將3次濾液混合，將所得藥液紗布過濾，水浴加熱蒸發(fā)濃縮后貯于冰箱中備用?！?br>