黃建華,余成蛟,辛鵬程
(甘肅省天水市麥積區畜牧獸醫事務服務中心,甘肅 天水 741020)
多殺性巴氏桿菌是一種革蘭氏陰性短桿菌,瑞氏染色常能見兩極濃染。多殺性巴氏桿菌病是可引起多種動物和人發病的重要共患傳染病,易感染雞、豬、牛等家養畜禽,常導致動物因發生出血性敗血癥和傳染性肺炎死亡[1]。本菌常存在于多種健康動物的口腔和咽部黏膜,可引起多種畜禽巴氏桿菌病,在臨床上表現為出血性敗血癥、傳染性肺炎或局部慢性感染等。多殺性巴氏桿菌在鮮血培養基和血清平板上生長良好,無溶血活性,普通培養基上生長不良[2],對小鼠和家兔有高度致病性。
豬巴氏桿菌病又稱“豬肺疫”、“鎖喉風”或“腫脖子病”等,是由多殺性巴氏桿菌(Pasteurella multocida)引起豬的一種急性、熱性傳染病。急性病例為出血性敗血病、咽喉炎和肺炎的病狀,慢性病例主要為慢性肺炎癥狀,散發性發生[3]。
2019年10月,甘肅天水市甘谷縣某養豬場發生了以腹瀉、咳嗽、呼吸困難為主要癥狀的疾病,并有一定數量的肥育豬死亡。經臨床觀察、剖檢變化及實驗室微生物學檢測確診為多殺性巴氏桿菌感染所致。通過藥敏試驗,選擇敏感藥物對發病豬進行治療,同時采取綜合性防制措施,在最短的時間內有效控制了病情?,F將該病的診治情況介紹如下。
2019年10月,甘肅天水市甘谷縣某養豬場發生一定數量的肥育豬死亡,主要表現為精神萎靡不振、腹瀉,食欲減退或廢絕,呼吸困難、咳嗽,寒戰,可視黏膜發紺,耳根、頸、腹等部皮膚出現紫紅色斑,淋巴結腫大。
該豬場有肥育豬1 000頭,其中45~60 kg肥育豬表現臨床癥狀的有近180頭,發病率為18%;死亡54頭,病死率為30%。
發病豬主要表現呈犬坐、犬臥姿勢,弓背,被毛粗亂無光,精神萎靡不振,眼窩下陷,腹瀉,食欲減退或廢絕,呼吸困難、咳嗽,鼻流少量黏膿性分泌物,可視黏膜發紺,耳根、頸、腹等部皮膚出現紫紅色斑;體溫40~42℃,頜下淋巴結腫大;聽診胸部有摩擦音,觸診胸部敏感。病程3~5 d,病死率較高。
依據發病豬臨床癥狀[3],初步懷疑多殺傷性巴氏桿菌所引起的“豬肺疫”?,F場對病死豬和瀕死豬進行剖檢診斷;采集被剖檢的病死豬和瀕死豬的心、肺、肝、脾、腎臟和瀕死豬耳靜脈血液5 mL送實驗室進行細菌培養、分離鑒定和藥敏試驗。
剖檢的病死豬和瀕死豬各5頭,均有不同程度的脫水,胸腔及心包積液明顯,心外膜有出血斑點,胸腔及心包積液,纖維素滲出;肺臟充血、水腫,肺門淋巴結出血,肺內有白色膿性分泌物;肝臟明顯腫大;脾臟出血點;腸臌氣明顯,胃腸黏膜有卡他性或出血性炎癥,胃底部出血;腎臟腫大,皮質、髓質腎乳頭出血;咽喉部及周圍組織腫脹明顯,切開皮下有大量淡黃色漿液,咽喉部黏膜因炎性充血、出血、水腫而增厚,喉頭有出血點,黏膜高度腫脹,咽喉部淋巴結呈漿液性出血炎癥。
3.2.1 涂片鏡檢 將采集被剖檢的病死豬和瀕死豬的心、肺、肝、脾、腎臟樣品進行革蘭氏染色,肝臟和肺臟涂片呈陰性小桿菌、瑞氏染色可見卵圓形、兩極濃染的短桿菌,即可初步診斷為巴氏桿菌[2]。
3.2.2 細菌分離培養 無菌操作將病料心、肺、肝、脾、腎臟樣品接種至伊紅美藍瓊脂培養基、麥康凱及鮮血瓊脂培養基,37℃培養18~24 h后觀察。結果在鮮血瓊脂平板上,肝臟和肺臟中可長出圓形、光滑、濕潤的露珠樣小菌落,但不溶血。在伊紅美藍瓊脂上產生黑色帶金屬閃光的菌落;麥康凱培養基上不生長。
3.2.3 生化試驗 從鮮血瓊脂培養基上挑取單個可疑菌落重新用革蘭氏和瑞氏染色,顯微鏡檢查??梢娐褕A形、兩極濃染的短桿菌,革蘭氏染色陰性小桿菌。
從鮮血瓊脂培養基上挑取單個可疑菌落轉培養進一步分離純化后,接種于各種生化發酵管中,37℃,培養18~24 h觀察。結果見表1。

表1 生化試驗結果
離心分離出的血清經多殺性巴氏桿菌(PMT)ELISA檢測試劑盒(上海仁捷生物科技有限公司)檢測呈陽性。
結合發病豬和病死豬臨床癥狀、現場剖檢[4-5]和實驗室檢測,確診為多殺性巴氏桿菌[3-6]感染所致。
藥敏紙片購自杭州微生物試劑有限公司。采用常規紙片法[7],用青霉素G鉀、硫酸鏈霉素、硫酸卡那霉素、硫酸丁胺卡那霉素、磺胺甲基異惡唑紙片將分離純化菌株作為目標菌進行藥敏試驗,結果見表2。篩選到2種比較敏感的抗生素,即丁胺卡那霉素和磺胺甲基異惡唑。

表2 藥物敏感試驗結果
通過發病豬和病死豬臨床癥狀、剖檢病變和實驗室檢測,確診為多殺性巴氏桿菌[3-6]感染所致。
發病豬,肌肉注射復方硫酸丁胺卡那霉素注射液0.5 g/次,2次/d,連用3 d。所有豬,獸用硫酸丁胺卡那霉素可溶性粉拌料,100 g/t;磺胺甲基異惡唑拌料,2 kg/t;連用 5 d。
為了預防和快速控制疫情的蔓延與流行,對豬群進行緊急接種豬巴氏桿菌病滅活疫苗5 mL/頭,1周后疫情得到控制。
1)發病豬及時隔離,用具沖洗后用2%燒堿水溶液徹底消毒,場地、欄舍、地面、墻壁用3%燒堿水噴灑徹底消毒,避免交叉感染[3,8-9];30%草木灰水噴灑消毒,豬糞堆積發酵[3];2)對病死豬高溫處理,對病豬和假定健康豬隔離飼養,豬舍內外用3%燒堿水溶液噴灑徹底消毒徹底消毒;3)患慢性豬肺疫的小僵豬淘汰處理為好。
豬多殺性巴氏桿菌病的確診要在臨床診斷基礎上,開展實驗室診斷和生化診斷,有條件的實驗室可對病原菌進行PCR進行確診。鑒別診斷時,要注意與豬瘟、豬丹毒相區別,可借助豬瘟快速檢測卡[10]確診或排除豬瘟,借助豬丹毒桿菌抗原快速檢測試紙條[11]確診或排除豬丹毒。豬多殺性巴氏桿菌病急性病例,咽喉部有腫脹和炎癥,剖檢時的膠凍樣浸潤都與敗血型的炭疽相似。但從流行病學方面分析,豬急性炭疽[12]很少發生,且不形成流行;剖檢時炭疽脾臟的腫大程度與豬肺疫明顯不同,若取局部病料細菌學檢查,如涂片鏡檢,兩者病原形態等有明顯的不同,呈竹節狀[12]的炭疽桿菌與卵圓形、兩極濃染的短桿菌區別明顯。
飼養豬群密度大、擁擠,圈舍潮濕、通風不良,地面、墻壁、料槽等衛生條件差,天氣驟變等不良因素,均可降低豬體的抵抗力,或發生某一種或幾種傳染病時,病菌乘機侵入機體內繁殖,引起發病。流行性豬多殺性巴氏桿菌病以外源性感染為主,病豬為主要傳染來源,細菌隨病豬的分泌物、排泄物以及尸體的內臟和血液等污染周圍環境,通過被污染的飼料、飲水和其他器物經消化道感染發病。
根據豬多殺性巴氏桿菌病的傳播特點,以增強豬體的免疫力防治為主。通過加強飼養管理,保持合適的飼養密度,豬舍通風、溫差小,豬舍干燥、干凈,消除可能降低抗病力因素和致病誘因,豬舍內及其周邊定期消毒。
新引進的豬要隔離觀察45 d以上。前30 d,要認真觀察新引進的豬的休息狀態、采食狀態,30 d以后進行豬瘟疫苗和原有豬群免疫接種的其他疫苗接種。免疫接種15 d后進方可合群飼養。