HPV DNA分型檢測及HPV E6/E7 mRNA定量檢測在宮頸癌篩查中應用的研究

王鈞

北京市豐臺中西醫結合醫院，北京 100074

盡早篩查、診斷是降低宮頸癌發病率和死亡率的重要方式，本文探討了宮頸癌篩查的新方法，現將結果做出如下報告。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2018年2月至2019年3月婦科門診進行宮頸病變篩查的患者203例進行研究。年齡20-65歲，均值(35.46±6.79)歲。其中145例患者有白帶異常、陰道分泌物增多、接觸性出血的臨床癥狀。其中165例患者有不同程度的宮頸糜爛。本次入選研究的患者均排除合并其他系統腫瘤、宮頸上皮內病變病史、子宮切除術、宮頸手術、陰道用藥或者沖洗、妊娠患者，對本次研究知情且簽署同意書。

1.2 研究方法 (1)樣本收集：收集203例受檢者的樣本，置入宮頸刷至宮頸內鱗狀皮交界的位置，沿順時針旋轉5圈，將宮頸刷取出后放置在專用細胞保存液中的容器內，反復洗脫細胞后進行封管，放置在-20℃的冰箱中保存。(2)TCT檢測：使用膜式液基超薄細胞學離心沉淀檢測，脫落的細胞進行固定和染色后再使用Bethesda系統進行判斷。將所有受檢者分成：水平值中正常值范圍內、高度鱗狀上皮內病變、低度鱗狀上皮內病變以及意義不明確的不典型鱗狀上皮細胞。(3)HPV DNA分型檢測：使用點雜交采樣工具收集宮頸組織的樣本，檢測21種HPV亞型，包括HPV DNA16、18、31、33、35、51、52、56、58、59、68、6、11、41、42、44、53、66、CP8304。(4)HPV E6/E7 mRNA定量檢測：收取樣本與TCT檢測相同，使用新鄉試劑盒將信號放大并加入熒光底物，使用冷光熒光度檢測。將檢測的結果使用計算機自動判別結果。(5)組織病理學檢查結果：對于意義不明的不典型腺體上皮細胞及更高級的異常結果，需要在陰道鏡下獲取受檢者的宮頸活體組織，根據病理診斷結果判斷。

1.3 統計學方法 使用軟件SPSS23.0對數據進行分析，計量資料用（Mean±SD）表示；計數資料用(n，%)表示；當P＜0.05時，提示比較存在意義。

2 結果

見表1、2。

表1 HPV DNA分型檢測與組織病理學對照[n(%)]

表2 HPV E6/E7 mRNA定量檢測[n(%)]

3 討論

根據過往臨床研究報道[1]，HR-HPV不間斷感染是造成宮頸及癌前病變的基礎，所以檢測HR-HPV對于宮頸癌和癌前病變的篩選有重要意義。但是大部分HPV患者的感染呈一過性，而發生HPV持續感染至惡化需要經歷5-10年的時間，所以檢測價值不明確。HPV DNA整合在宿主染色體的脆弱區，可以通過抑制癌細胞基因功能造成細胞周期失控。HPV E6/E7 mRNA表達的癌基因活性，提示細胞惡化風險高。

綜上所述，HPV DNA及HPV E6/E7 mRNA檢測在宮頸癌和癌前病變的篩查中有重要應用價值。