核桃仁乙醇提取物對(duì)AD大鼠的改善作用及機(jī)制研究

潘建萍，何春明，龔小嬌，吳琪珍

贛南衛(wèi)生健康職業(yè)學(xué)院，江西 贛州 341000

目前AD發(fā)病機(jī)制尚未明確，臨床尚未形成統(tǒng)一的治療標(biāo)準(zhǔn)。采用安全性高、臨床效果良好的傳統(tǒng)中藥治療的案例越來(lái)越多，已成為治療AD的有效方法之一。在《本草綱目》中記載核桃可令人肥健、添腦髓。本研究從分子生物學(xué)方面觀察核桃仁對(duì)AD模型大鼠學(xué)習(xí)記憶的改善作用及機(jī)制。

1 資料和方法

1.1 比色法測(cè)定海馬組織活性物質(zhì) 大鼠Morris水迷宮檢測(cè)完成后，腹腔麻醉并分離海馬組織，嚴(yán)格按照試劑盒（南京建成生物研究所）說(shuō)明書操作步驟測(cè)定。

1.2 Western Blot法檢測(cè) 將取出海馬稱重，組織勻漿后蛋白提取、定量，并依次進(jìn)行凝膠電泳、半干膜轉(zhuǎn)移，加入特異性一抗和熒光標(biāo)記的二抗，用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。

2 結(jié)果

2.1 各組大鼠海馬組織中p-tauSer404蛋白含量比較Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果：空白組、AD模型組和A、B、C各組大鼠腦內(nèi)p-tauSer404表達(dá)水平標(biāo)準(zhǔn)化后，數(shù)值依次為1.06±0.09，3.83±6.49，2.68±0.35，2.36±0.32，1.78±0.25。與模型組相比，A、B、C各組p-tauSer404表達(dá)水平降低(P＜0.05)。

2.2 各組大鼠海馬組織中Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表達(dá)水平比較 見表1。

表1 核桃仁對(duì)AD大鼠海馬組織中Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表達(dá)的影響（Mean±SD）

2.3 各組大鼠海馬組織中Ach、ChAT和AchE含量比較 見表2。

表2 核桃仁對(duì) AD 大鼠海馬組織中AchE、ChAT 和Ach影響（Mean±SD）

3 討論

中藥多靶點(diǎn)治療對(duì)多病因疾病AD具有廣闊應(yīng)用前景。核桃是一種益智類的傳統(tǒng)中藥，素有健腦養(yǎng)腦的功效[1]。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，AD大鼠經(jīng)核桃仁干預(yù)后腦內(nèi)tau蛋白磷酸化水平降低。AD腦內(nèi)有神經(jīng)細(xì)胞凋亡發(fā)生，Caspase-3在各種因素啟動(dòng)的凋亡程序中起最后樞紐作用。研究發(fā)現(xiàn)，核桃仁通過(guò)下調(diào)Bax、Caspase-3表達(dá)，上調(diào)Bcl-2表達(dá)抑制神經(jīng)細(xì)胞凋亡。膽堿系統(tǒng)的損傷是與AD最為密切的中樞神經(jīng)遞質(zhì)系統(tǒng)改變，本研究發(fā)現(xiàn)核桃仁具有雙向正性調(diào)節(jié)AD大鼠腦內(nèi)膽堿能系統(tǒng)的作用，這可能是核桃仁改善AD的神經(jīng)遞質(zhì)基礎(chǔ)。

綜上所述，核桃仁可改善AD大鼠腦內(nèi)tau蛋白磷酸化，平衡膽堿系統(tǒng)和抗凋亡作用。