合歡皮-白蒺藜藥對對AngⅡ-ROS誘導下HSC-LX2細胞增殖及PKC/Nrf2/HO-1通路的影響

浙江中醫(yī)藥大學 杭州 310053

肝纖維化（hepatic fibrosis）是肝組織對慢性損傷的修復反應，是一系列復雜因素（如生長因子和氧化應激）共同作用的結(jié)果[1-2]。有研究報道肝星狀細胞（hepatic stellate cell，HSC）活化是肝纖維化發(fā)生的中心環(huán)節(jié)，該過程受氧化應激、血管緊張素Ⅱ（angiotensinⅡ，AngⅡ）等諸多因素的影響，而誘導HSC凋亡或抑制其活化增殖被認為能夠有效降低甚至逆轉(zhuǎn)肝纖維化[3-4]。前期研究顯示，AngⅡ能早期刺激 HSC產(chǎn)生活性氧簇 （reactive oxygen species，ROS），激活諸多因子參與的信號網(wǎng)絡，刺激HSC增殖，誘導肝纖維化形成，提示AngⅡ誘導ROS的生成是肝纖維化發(fā)生的潛在機制[5-6]。

合歡皮-白蒺藜是浙江省名中醫(yī)姚真敏教授在臨床治療慢性肝病時常用的藥對，緩解肝脾腫大療效顯著。合歡皮性平味甘,歸心、肝經(jīng)，有安神解郁、活血消腫之功效[7-8]。白蒺藜性平，味苦、辛，入肝經(jīng)，有平肝解郁、祛風明目之功效。已有報道證實白蒺藜具有抑癌和抗纖維化作用，也可增強抗氧自由基酶類的活性，拮抗脂質(zhì)過氧化[9-10]。目前關(guān)于合歡皮-白蒺藜對肝纖維化影響的研究較少，故本研究采用血清藥理學、MTT、Western blot及 Real-time PCR 等研究方法，觀察合歡皮-白蒺藜藥對含藥血清對AngⅡ誘導的氧化應激環(huán)境下HSC的增殖情況以及對相關(guān)基因和蛋白表達的影響，以初步探討合歡皮-白蒺藜藥對含藥血清的細胞干預機制。

1 材料和方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物和細胞 SPF級雄性SD大鼠 60只，體質(zhì)量180～200g，購于上海西普爾-必凱實驗動物有限公司 [實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK （滬）2013-2016]，飼養(yǎng)于浙江中醫(yī)藥大學動物實驗研究中心[實驗動物使用許可證號：SYXK（浙）2013-0184]，每籠5只，以普通飼料喂養(yǎng)，溫度25℃、每日光照黑暗時間各半。……