實時熒光定量聚合酶鏈式反應用于兒童肺炎支原體檢驗中的臨床效果分析

曾凡燕，徐婭

（重慶市黔江中心醫院檢驗科，重慶 409000）

肺炎支原體是兒童呼吸道感染的常見病原體之一，主要通過呼吸道進行傳染，臨床表現多樣，以呼吸道感染最為常見，如肺炎支原體感染患兒未得到早期、有效的診治，可能引起全身各臟器損害[1]。目前臨床檢測肺炎支原體的方法較多，但受病程制約，早期診斷難以實現。實時熒光定量聚合酶鏈式反應、快速培養法均具有不受病程影響、檢測速度快、敏感性高等特點。基于此，本研究探討實時熒光定量聚合酶鏈式反應在兒童肺炎支原體檢驗中的應用效果，內容如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2017年9月-2019年12月我院收治的疑似肺炎支原體感染患兒120例，其中男68例，女52例，年齡0.5-15歲，平均年齡（7.73±1.14）歲；病程4-28 d，平均病程（16.63±2.49）d。

1.2 診斷標準 患兒均存在劇烈咳嗽等癥狀；全身癥狀比胸部體征明顯；經X線檢查后，胸片可見兩肺均勻一致的片狀陰影；白細胞計數正常或稍高，血沉多增快；使用大環內酯類藥物治療有效，其余抗生素如青霉素、頭孢等治療表現為無效。

1.3 方法 患兒就診當天，由兒科護士在無菌條件下采集其咽試子標本，采用肺炎支原體快檢試劑盒（武漢菁華時間科技有限公司）與實時熒光定量PCR試劑盒（上海晅科生物科技有限公司）進行肺炎支原體檢測，以上兩種操作方法均嚴格按照說明書進行。

1.4 觀察指標 對比兩種檢測方法的敏感度、特異度及診斷符合率。

1.5 統計學方法 采用SPSS 20.0軟件分析數據，計數資料用百分比表示，采用χ2檢驗，計量資料以（Mean±SD）表示，采用t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 敏感度、特異度 臨床診斷結果顯示，120例患兒中，肺炎支原體肺炎患兒71例，非肺炎支原體肺炎患兒49例。實時熒光定量聚合酶鏈式反應診斷陽性58例，陰性62例；其中真陽性61例，真陰性45例；快速培養法診斷陽性69例，陰性51例，其中真陽性54例，真陰性38例。實時熒光定量聚合酶鏈式反應對兒童肺炎支原體肺炎診斷的敏感度、特異度分別為85.92%（61/71）、91.84%（45/49）；快速培養法對兒童肺炎支原體肺炎診斷的敏感度、特異度分別為76.06%（54/71），77.56%（38/49），實時熒光定量聚合酶鏈式反應的敏感度稍高于快速培養法，差異無統計學意義（χ2=2.241，P=0.134）；實時熒光定量聚合酶鏈式反應的特異度高于快速培養法，差異有統計學意義（χ2=4.037，P=0.045）。

2.2 診斷符合率 實時熒光定量聚合酶鏈式反應對兒童肺炎支原體肺炎診斷的符合率為91.84%（106/120），快速培養法符合率為76.66%（92/120），實時熒光定量聚合酶鏈式反應診斷符合率高于快速培養法，差異有統計學意義（χ2=5.657，P=0.017）。

3 討論

肺炎支原體感染導致的呼吸道疾病是兒童較為常見疾病，臨床表現多種多樣，病情輕重不等，且具有病程長、易反復等特點[2]。由于支原體感染患兒對抗生素不敏感，經驗用藥則會延誤病情，增加患兒痛苦。

本研究中，實時熒光定量聚合酶鏈式反應診斷兒童肺炎支原體肺炎的特異度、符合率高于快速培養法，提示實時熒光定量聚合酶鏈式反應用于兒童肺炎支原體檢驗中具有較好的檢測效果。快速培養法是一種對支原體進行直接檢測的方法，具有快速、結果準確等優點，由于培養液中含有快速生長因子與高營養成分，僅需極少量的病原體即可快速增殖，從而可在支原體肺炎的發病初期檢測到肺炎支原體，便于臨床早期開展治療。實時熒光定量聚合酶鏈式反應則是一種通過肺炎支原體體外特異性DNA擴增，在短時間內使微量核酸片段實現大量擴增至百萬個拷貝，進而大大提高診斷的準確性與特異度[3]。本研究實時熒光定量聚合酶鏈式反應的診斷敏感度略高于對照組，可能是由于快速培養法僅能在肺炎支原體存活的情況下檢出，或與培養液中存在真菌有關，而實時熒光定量聚合酶鏈式反應則并不存在此類缺點。因而在對兒童進行肺炎支原體檢測時，可優先選取實時熒光定量聚合酶鏈式反應進行檢測。

綜上所述，實時熒光定量聚合酶鏈式反應在兒童肺炎支原體檢驗中具有較好的診斷效果，利于早期診斷患兒肺炎支原體感染情況，為臨床治療提供可靠依據。