酵母菌復合微生態制劑對杜寒雜交肉羊免疫機能及抗氧化能力指標的影響

王改芳

(呂梁學院生命科學系 ， 山西呂梁033000)

復合微生態制劑是由多種有益的單體活性微生物經過培養、增菌、發酵等多種特殊工藝制成的一種應用于動物生產的活菌制劑，復合微生態制劑具有調節腸道菌群平衡、提高消化機能和免疫力、促進動物生長發育等多種優點，廣泛應用于畜禽養殖中[1]。酵母菌是一種兼性厭氧微生物，該菌主要存在于牛、羊、鹿等反芻動物的瘤胃中，豬 、雞、兔等單胃動物的盲腸及結腸中，具有易培養、易繁殖特點，該菌中含有蛋白質、維生素等多種營養物質及生物活性物質，尤其是酵母菌細胞壁所含的甘聚寡糖，可以提高機體免疫機能和抗氧化能力[2-3]。國內關于酵母菌復合微生態制劑在肉羊養殖過程中的應用較少。本試驗以杜寒雜交肉羊為研究對象，添加不同比例的酵母菌復合微生態制劑，分析其對杜寒雜交肉羊免疫機能及抗氧化能力的影響，為進一步的酵母菌復合微生態制劑的臨床應用提供數據。

1 材料與方法

1.1 主要試劑 酵母菌復合微生態制劑由酵母菌(9.0×109CFU/g)、枯草芽孢桿菌(4.5×108CFU/g)、乳酸桿菌(2.0×109CFU /g)、乳雙歧桿菌(2.0×109CFU/g) 組成，為發酵的淡黃色的固體粉末，由呂梁學院生命科學系微生物實驗室制備；細胞因子(IL-2、IL-6)ELISA試劑盒、免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)ELISA試劑盒，均購自 Elabscience 公司；超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總抗氧化能力(T-AOC)試劑盒，均購自北京中控生物科技有限公司。

1.2 試驗動物 體重為(20±2.2)kg健康杜寒雜交肉羊120只，由山西呂梁杜寒雜交肉規模化養殖場提供。

1.3 方法

1.3.1 試驗設計與管理 采用單因素設計試驗，選擇120只健康杜寒雜交肉羊，隨機分成4個組，每組3個重復，每個重復10只。分別為空白對照組(1組)和5.0%(2組)、10.0%(3組)、15.0%(4組)酵母菌復合微生態制劑添加組，試驗期為56 d。按照山西呂梁市杜寒雜交肉羊規模化養殖場飼養與管理方式進行飼養試驗和管理，定期疫苗防疫和驅蟲，飼養試驗以每個重復為單位，單獨采食、自由采食。基礎日糧配制參照美國國家研究委員會NRC(2004年)推薦的中國肉羊飼養標準，精料制成顆粒飼料(直徑為6mm，長度為10 mm)，按照常規的精粗比混合飼喂。飼糧組成及營養水平見表1。

表1 飼糧組成及營養水平(干物質基礎)Table 1 Composition and nutrition level (dry matter basis)

1.3.2 免疫及抗氧化能力指標測定 在試驗第1、28、56天，每個組隨機抽取10只杜寒雜交肉羊采血分離血清。按照說明書測定免疫指標(IL-2、IL-6、IgG、IgM、IgA)和抗氧化能力指標(T-SOD、GSH-Px、T-AOC)。

1.4 試驗數據分析 試驗結果用統計學軟件SPSS 18.0進行統計，以每個重復為單位進行單因素多重因素比較，分析其各個試驗組的差異顯著性，以P<0.05表示差異顯著。

2 結果

2.1 酵母菌復合微生態制劑對杜寒雜交肉羊免疫機能的影響 由表2可知，在試驗第1天時，試驗2、3、4組杜寒雜交肉羊血清中IgG、IgA、IgM含量均高于1組，但差異不顯著(P>0.05)；在試驗期第28、56天時，試驗2組杜寒雜交肉羊的血清中IgG、IgA含量均高于1組，但差異不顯著(P>0.05)，試驗3、4組杜寒雜交肉羊的血清中IgG、IgA含量均顯著高于1組(P<0.05)。試驗2、3、4組血清中IgM含量均高于1組，但差異不顯著(P>0.05)。

表2 酵母菌復合微生態制劑對杜寒雜交肉羊血清中免疫球蛋白含量檢測結果Table 2 Detection results of immunoglobulin content in serum of Duhan crossbred sheep by yeast compound microecological preparation

由表3可知，在試驗第1天時，試驗2、3、4組杜寒雜交肉羊血清中IL-2、IL-6含量均高于1組，但差異不顯著(P>0.05)；在試驗第28、56天時，試驗2組杜寒雜交肉羊血清中IL-2含量高于1組，但差異不顯著(P>0.05)；試驗3、4組杜寒雜交肉羊血清中IL-2含量均顯著高于1組(P<0.05),試驗2、3、4組杜寒雜交肉羊血清中IL-6含量均高于1組，但差異不顯著(P>0.05)。

表3 酵母菌復合微生態制劑對杜寒雜交肉羊血清中細胞因子含量的檢測結果Table 3 Detection of cytokines in serum of Duhan crossbred mutton sheep by yeast compound microecological preparation

2.2 酵母菌復合微生態制劑對杜寒雜交肉羊抗氧化能力的影響 由表4可知，在試驗第1天時，試驗2、3、4組杜寒雜交肉羊的血清中T-SOD、T-AOC、 GSH-Px活性均高于1組，但差異不顯著(P>0.05)；在試驗第28、56天時，試驗2組杜寒雜交肉羊的血清中T-SOD、T-AOC活性均高于1組，但差異不顯著(P>0.05)，試驗3、4組杜寒雜交肉羊的血清中T-SOD、T-AOC活性均顯著高于1組(P<0.05)，試驗2、3、4組杜寒雜交肉羊血清中GSH-Px含量均高于1組，但差異不顯著(P>0.05)。

表4 酵母菌復合微生態制劑對杜寒雜交肉羊血清中抗氧化能力指標的檢測結果Table 4 The test results of compound microecological preparation of Saccharomyces cerevisiae on the indexes of antioxidant capacity in the serum of Duhan crossbred sheep

3 討論

3.1 酵母菌復合微生態制劑對杜寒雜交肉羊免疫機能的影響 動物機體內免疫系統主要包括體液免疫和細胞免疫，其中體液免疫主要由球蛋白介導，組成體液免疫的球蛋白主要由IgG、IgA、IgM組成， 免疫球蛋白IgG主要作用于抗感染免疫；IgA在黏膜免疫中起著重要的作用；IgM具有很強的殺菌功能，是體液免疫中出現的最早的抗體[4]。因此，

血清中免疫球蛋白含量是評價免疫機能的重要指標之一。細胞免疫中主要以IL-2、IL-6細胞因子為主，IL-2主要作用于T淋巴細胞，具有增殖、調節及抗體產生等作用，在細胞免疫過程中具有重要作用[5]。IL-6主要作用于 B細胞分化、增殖及再次產生免疫應答，為調節性細胞免疫因子[6]。因此，動物血清中免疫球蛋白的含量及細胞因子的含量高低直接反映機體的免疫功能。本試驗結果表明，添加10.0%、15.0%的酵母菌復合微生態制劑可以顯著提高杜寒雜交肉羊血清中IgG、IgA和IL-2含量(P<0.05)，在試驗期間，試驗組的血清中IgM和IL-6含量均高于1組，但差異不明顯(P>0.05)。因而證實酵母菌復合微生態制劑可以提高杜寒雜交肉羊體液免疫和細胞免疫水平，從而提高免疫機能。劉明生等[7]報道了復合微生物制劑可以提高蛋雞的免疫球蛋白含量。胡興義等[8]報道了復合益生菌制劑可以提高哺乳仔豬免疫水平。酵母菌復合微生態制劑中所含的生物活性物質可以調節杜寒雜交肉羊的免疫系統，促進體內的免疫球蛋白及細胞因子的合成與分泌，增強機體免疫機能。

3.2 酵母菌復合微生態制劑對杜寒雜交肉羊抗氧化能力的影響 相關研究表明，動物機體在新陳代謝過程中可以產生多種的氧化自由基，自由基誘發動物機體中的脂質過氧化反應，導致組織細胞損傷，清除機體多余自由基對于維持動物健康具有重要意義[9-10]。動物體內具有完整的抗氧化體系，如T-AOC、T-SOD、CAT和GSH-Px等，這些系統可以通過多種方式清除體內的自由基，維持機體內代謝平衡，促進動物正常生長[11]。因此，血清中T-AOC、T-SOD和GSH-Px活性的高低是評價抗氧化能力的重要的指標之一。本試驗結果表明，10.0%、15.0%的酵母菌復合微生態制劑添加，可以提高杜寒雜交肉羊的抗氧化能力。與王傳龍等[12]報道的酵母菌培養物可以提高蛋雞抗氧化性能一致。可能由于酵母菌復合微生態制劑中所含有的有效成分激活了體內的酶系統，促進自由基在體內的代謝，清除多余的自由基，提高了抗氧化能力，其作用機理有待進一步研究。本試驗為下一步的酵母菌復合微生態制劑在羊生產中的應用提供理論基礎。