血漿B-catenin 作為甲狀腺乳頭狀癌診斷標志物的價值分析

趙瑞鵬

（南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院 江蘇 淮安 223300）

甲狀腺癌的發(fā)病率越來越高且有年輕化的趨勢，其中最常見的是乳頭狀癌（PTC），目前甲狀腺癌常用的診斷方法主要有超聲、CT 等影像學(xué)診斷方法，另外也細針穿刺取細胞學(xué)診斷等方法，而細針穿刺是診斷準確性最高的[1]。B-cat 蛋白（B-catenin）主要在細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)Wnt 通路中起作用，有起到促進惡性腫瘤增殖的作用，通過刺激癌細胞黏附，在惡性腫瘤轉(zhuǎn)移中起重要作用[2]。有文獻報道，B-catenin 在甲狀腺乳頭狀癌患者癌組織中有過表達[3]。而也有文獻報道血漿中可以測出B-catenin 蛋白的濃度[4]。鑒于此，本研究通過搜集并測定甲狀腺乳頭狀癌患者血漿中B-catenin 蛋白的濃度，探討其作為無創(chuàng)診斷標志物的價值，旨在為臨床診斷甲狀腺乳頭狀癌提供新的方法。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2016 年1 月—2018 年12 月診斷為甲狀腺乳頭狀癌的55 例作為實驗組，選取同期50 名體檢的健康志愿者為對照組，無肝腎功能異常，所有患者均依據(jù)《NCCN 甲狀腺癌診療指南》行手術(shù)治療，術(shù)后均有明確石蠟病理診斷，所有甲狀腺乳頭狀癌的病理診斷均由我院病理科一名副主任醫(yī)師做出。術(shù)后按照指南推薦行左甲狀腺素替代及抑制治療或碘131 同位素治療。

1.2 ELISA 測血漿B-catenin 蛋白

所有受試者血漿樣本均在接受治療前采集，并放置在－80℃冰箱備用，B-catenin 蛋白濃度使用上海宇淳生物科技有限公司的Elisa 試劑盒測試，方法安裝試劑盒說明書進行。具體步驟如下：

（1）加樣本：設(shè)置標準孔、空白孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl。覆膜，37℃孵育90 分鐘。（2）吸盡液體，加工作液 100μl，酶標板覆膜，37℃ 孵育 1 小時。（3）吸盡液體，PBS 洗4-6 次。（4）、每孔加辣根過氧化物酶工作液100μl，加上覆膜，37℃孵育30min。（5）吸盡液體，洗板4 ～6 次。（6）每孔加底物90μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育15min。（7）加終止液50μl。（8）立即用酶標儀在450nm 波長測量各孔的光密度（OD 值）。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS25.0 統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。不同組間的計量參數(shù)比較使用t 檢驗，使用ROC 曲線及曲線下面積（AUC）檢驗B-catenin 蛋白是否可以作為甲狀腺乳頭狀癌診斷標志物，曲線下面積小于0.7 沒有診斷價值，0.7 ～0.79 有中等診斷價值，0.8～0.89 有較好的診斷價值，0.9 ～1 診斷價值最好，使用ROC曲線計算Cut-off 值，以P ＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 對照組與實驗組血漿B-catenin 蛋白濃度水平比較

對照組血漿B-catenin 蛋白濃度為83.12±9.88pg/mL，實驗組血漿B-catenin 蛋白濃度為215.14±21.9 pg/mL，實驗組血漿B-catenin 蛋白濃度高于對照組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P ＜0.05），見表1。

表1 兩組血漿B-catenin 蛋白濃度水平比較（±s）

表1 兩組血漿B-catenin 蛋白濃度水平比較（±s）

例數(shù) B-catenin（pg/mL） P t對照組 50 83.12±9.88 ＜0.05 5.98實驗組 55 215.14±21.9

2.2 血漿B-catenin 指標對甲狀腺乳頭狀癌的診斷價值分析

以本資料為樣本，實驗組55 例為陽性樣本，對照組50例為陰性樣本。ROC 曲線分析結(jié)果如圖1 所示，曲線下面積AUC=0.837（P=0.001），表明血漿B-catenin 蛋白作為甲狀腺乳頭狀癌特異性診斷指標價值較好。當Cut-off 值為71.6pg/mL 時，敏感性為81.2%，特異性為73.1%，提示B-catenin 有較好的診斷應(yīng)用價值。

圖1 血漿B-catenin 蛋白診斷甲狀腺乳頭狀癌的ROC 曲線

3.討論

甲狀腺結(jié)節(jié)是頭頸外科最常見的疾病之一[5]，良惡性結(jié)節(jié)的治療方案是完全不同的，因而對結(jié)節(jié)進行良惡性鑒別診斷是一個重要的臨床問題，通常對于直徑較小的良性結(jié)節(jié)不需要激進的手術(shù)治療。而對于惡性結(jié)節(jié)，需要行根治性手術(shù)，通常至少需要切除一葉及峽部腺體及中央?yún)^(qū)淋巴結(jié)清掃，對于側(cè)區(qū)有轉(zhuǎn)移的需要行根治性清掃[6]。本結(jié)果顯示，在甲狀腺乳頭狀癌患者中，血漿B-catenin 水平顯著高于健康志愿者，提示了B-catenin 可能在甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生發(fā)展中起作用。本文通過計算繪制ROC曲線，提示血漿B-catenin 測定，對于甲狀腺乳頭狀癌的診斷有良好的應(yīng)用價值。尤其對于一些結(jié)節(jié)較小或合并鈣化等細針穿刺存在假陰性可能的結(jié)節(jié)，具有較好的臨床應(yīng)用價值。