探討不同免疫檢驗方法檢測乙肝病毒感染血清標志物的效果差異性

萬 獎

（湖北六七二中西醫(yī)結(jié)合骨科醫(yī)院，湖北 武漢 430070）

乙肝全稱為乙型病毒性肝炎，是由于乙肝病毒在感染形成的病癥，在治療不及時或治療效果欠佳的情況下，會逐漸惡化和發(fā)展成肝硬化和肝癌，并誘發(fā)肝腎綜合征、肝性腦病、原發(fā)性細菌性腹膜炎等幾種高危險性并發(fā)癥，導致患者的肝臟健康和生命安全受到嚴重的威脅。根據(jù)相關(guān)報道顯示，酶聯(lián)免疫吸附法的檢測效果較電化學發(fā)光法明顯較差[1-2]。本文因此展開研究，對我院100例患者進行檢測對比實驗，旨在探討分析兩種檢測方式對乙肝病毒感染血清標志物的檢測差異性，具體內(nèi)容報道如下。

表1 兩組患者的乙肝病毒血清標志物陽性檢出率比較（%）

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取我院2018年7月至2019年7月收治的乙肝病毒感染患者100例為研究對象，其中有男性患者59例，女性患者41例，患者年齡自30～79歲，中位年齡為（55.14±12.74）歲。本次實驗患者納入標準：①經(jīng)臨床/病毒檢測確診為乙型病毒性肝炎患者；②不存在任何溝通障礙患者；排除標準：①肝臟具有其他癥狀患者；②周圍組織器官出現(xiàn)嚴重病癥的患者；③惡性腫瘤病癥患者；④排除具有血液疾病或免疫疾病的患者。

1.2 檢測方法：在患者清晨空腹狀態(tài)下，采集其肘部靜脈血液5mL，采用離心機進行離心分離，離心機轉(zhuǎn)速設(shè)定為3000 r/min，持續(xù)時間10～15 min，并放置在低溫環(huán)境中進行冷藏。

進行檢測時嚴格按照儀器和試劑的說明書和實驗室操作規(guī)程進行,若出現(xiàn)溶血現(xiàn)象需要盡快通知患者重新抽血或第二天再行抽血。電化學發(fā)光法采用羅氏全自動電化學免疫發(fā)光分析儀及原裝配套試劑，酶聯(lián)免疫吸附法采用乙型肝炎病毒診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)（上海科華生物工程股份有限公司制造），上海科華全自動酶標分析儀,上海科華洗板機。

1.3 檢測標準：檢測為陽性的標準：①電化學發(fā)光法：HBsAg檢測值超過0.064 IU/mL，HBsAb檢測值超過10 mIU/mL，HBeAg相對光強度/臨界相對光強度水平不低于1，HBeAb、HBcAb相對光強度/臨界相對光強度水平不高于1均可判定為陽性；②酶聯(lián)免疫吸附法：HBeAb、HBcAb相對光強度/臨界相對光強度水平不高于1，HBsAg、HBsAb、HBeAg不低于1均可判定為陽性；并根據(jù)判斷結(jié)果對每一項乙肝病毒血清標志物的陽性檢測率進行比較，以陽性結(jié)果準確率來探討分析兩種方法的檢測效果差異性。

1.4 統(tǒng)計學方法：采用SPSS19.0軟件分析數(shù)據(jù)，以χ2檢驗計數(shù)資料，以率（%）表示，P＜0.05為差異顯著，有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

檢測結(jié)果顯示，電化學發(fā)光法檢測結(jié)果中在HBsAg、HBeAg、HBeAb三項陽性檢測率明顯高于酶聯(lián)免疫吸附法檢測率，均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），但兩種檢測方法在HBsAb、HBcAb兩項上則無明顯差異，均不具有統(tǒng)計學意義（P＞0.05），可見電化學發(fā)光法在乙肝病毒血清標志物上的檢測準確率要明顯高于酶聯(lián)免疫吸附法，詳細比較結(jié)果見表1。

乙肝病毒是乙型病毒性肝炎的主要誘因，其屬于DNA病毒，在進入肝臟后會迅速地發(fā)育繁殖和自我復制，破壞正常的肝臟細胞，降低肝臟功能，并且治療難度相對較大，治療時間也相對較長，需要患者長時間的服用藥物。當病癥遷延或久治不愈后，乙肝病毒除了會繼續(xù)破壞肝臟細胞導致患者出現(xiàn)肝硬化和肝癌等病癥外，其還會擴散至胃部（損傷胃黏膜）、胰臟（損傷胰腺）和腎臟（損傷腎小管細胞），對三處器官造成一定程度的損傷，造成其出現(xiàn)相關(guān)的并發(fā)癥[3]。

根據(jù)相關(guān)實驗顯示，HBsAg（表面抗原）是乙肝病毒的外殼蛋白，隨著患者乙肝癥狀的加重，體內(nèi)乙肝病毒迅速增加，病毒外殼蛋白也會隨之增加，一般在半年左右會達到峰值，通常在患者感染7-15 d內(nèi)便能被檢出，因此一般將其看作是乙肝病毒感染和乙肝期型的主要標志物；HBsAb（表面抗體）則是對應(yīng)的抗體，能夠表示乙肝病毒感染恢復或患者曾經(jīng)注射過乙肝疫苗；HBcAb（核心抗體）又被稱為乙肝病毒總抗體，此抗體又被分為IgM抗體和IgG抗體，檢測中單獨出現(xiàn)IgM抗體不可判斷乙肝病型，檢測中IgM抗體和IgG抗體同時出現(xiàn)則表示患者為慢性乙肝急性發(fā)作；HBeAg（e抗原）、HBeAb（e抗體）分別表示乙肝急性感染的早期標志（此時病毒具有高度傳染性和活性，極易導致他人感染）和以往病發(fā)乙肝（或表示乙肝病毒復制停止，病情被控制或有所好轉(zhuǎn)）。檢測方法中最為常見的是酶聯(lián)免疫吸附法，在簡單的離心分離后通過試劑盒便可進行陰性、陽性判斷，檢測原理是將被檢樣本制作為酶標抗原或抗體，再通過特定的試劑盒進行染色吸附和檢測，該方法的操作流程簡單，檢出速度較快，檢測成本也相對較低，因此廣泛的運用在多種細菌、病毒、微生物檢測中，此方法的劣勢在于受試劑等外部影響因素較大，即使在實驗室中也會因為試劑劑量、保存溫度、吸附處理操作手法等影響，出現(xiàn)誤診的概率高于電化學發(fā)光法。

電化學發(fā)光法通過被檢物與對應(yīng)的檢測試劑之間的化學反應(yīng)造成發(fā)光強度來判斷被檢物濃度，由于檢測發(fā)光強度與被檢物存在線性定量關(guān)系，因此敏感性極高，在相關(guān)的實驗中，該方法的檢測敏感性最高，與酶聯(lián)法、膠體金法都呈現(xiàn)較大的差異性，對于各被檢物標志物的含量檢測準確率較高，因此出現(xiàn)誤診的概率較低，但相對而言，電化學發(fā)光法檢測所需花費高于酶聯(lián)免疫吸附法。

兩種方法各有一定的優(yōu)劣勢，但從陽性檢測出率和病癥確診率來看，電化學發(fā)光法占據(jù)一定的優(yōu)勢。在本此實驗中，電化學發(fā)光法在HBsAg、HBeAg、HBeAb三項陽性檢測率中明顯占據(jù)優(yōu)勢，均具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），分析認為這是由于電化學發(fā)光法的檢測原理較酶聯(lián)免疫吸附法更為合理，檢測的敏感度也更高，檢測效果自然更好。

綜上所述，從本次實驗的檢測差異可看出，電化學發(fā)光法與酶聯(lián)免疫吸附法的差異主要在于對HBsAg、HBeAg、HBeAb即表面抗原、e抗原、e抗體三項上，由于此三項的變化會明顯的影響乙肝類型和期型，因此電化學發(fā)光法在確診率上會占據(jù)優(yōu)勢。在對體檢患者或疑似乙肝患者進行檢測時，應(yīng)當以電化學發(fā)光法檢測結(jié)果為主，可參考酶聯(lián)免疫吸附法檢測結(jié)果。