組蛋白去乙酰化酶9表達(dá)與惡性腫瘤預(yù)后相關(guān)性的Meta分析

付洋 孔垂?jié)?/p>

組蛋白去乙酰化酶9(histone deacetylase 9，HDAC9)屬于組蛋白去乙酰化酶家族Ⅱa亞型，穿梭于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)之間，是重要的表觀遺傳調(diào)節(jié)因子。在體內(nèi)，HDAC9通過去除組蛋白或非組蛋白結(jié)構(gòu)中的乙酰基，使其轉(zhuǎn)錄活性降低，同時(shí)HDAC9的N末端可結(jié)合多種轉(zhuǎn)錄因子，形成大分子蛋白質(zhì)復(fù)合物調(diào)節(jié)細(xì)胞功能[1-3]。有研究證實(shí)，HDAC9異常與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系，但在不同的腫瘤中HDAC9的表達(dá)和功能可能相反，從而造成不同的預(yù)后結(jié)局。本研究利用Meta分析對(duì)國內(nèi)外的研究成果進(jìn)行匯總，評(píng)估HDAC9的表達(dá)與惡性腫瘤預(yù)后之間的相關(guān)性。

材料與方法

一、文獻(xiàn)來源與檢索策略

計(jì)算機(jī)檢索PubMed、Embase、The Cochrane Library、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫和萬方數(shù)據(jù)庫，搜集HDAC9與惡性腫瘤以及預(yù)后相關(guān)所有公開發(fā)表的病例對(duì)照研究，并以文獻(xiàn)回溯法為輔助，檢索年限均為建庫至2019年3月。英文檢索詞為：histone deacetylase 9、HDAC9、neoplasm、tumor、cancer和carcinoma；中文檢索詞包括組蛋白去乙酰化酶9、腫瘤和癌癥。

二、納入標(biāo)準(zhǔn)

公開發(fā)表的HDAC9與惡性腫瘤之間相關(guān)性的病例對(duì)照研究；通過聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction，PCR)或免疫組織化學(xué)(immunohistochemistry，IHC)檢測(cè)HDAC9的表達(dá)量，并將研究對(duì)象分為高表達(dá)組與低表達(dá)組；具有HDAC9表達(dá)和預(yù)后生存結(jié)果之間的分析。

三、排除標(biāo)準(zhǔn)

文章為綜述、病例報(bào)告或會(huì)議摘要；與惡性腫瘤無關(guān)的HDAC9研究；動(dòng)物模型或細(xì)胞的研究；全文無法獲取。

四、數(shù)據(jù)提取

兩位研究人員獨(dú)立提取符合納入標(biāo)準(zhǔn)文獻(xiàn)中的數(shù)據(jù)，包括以下信息：第一作者姓名，出版年份，臨界值，國家，樣本量，結(jié)局，隨訪時(shí)間，腫瘤類別和檢測(cè)方法。如果沒有提供HDAC9表達(dá)的分組臨界值，樣本中HDAC9表達(dá)的平均值被認(rèn)為是分組臨界值。此外，如果文中無法直接提取結(jié)局指標(biāo)的風(fēng)險(xiǎn)比(hazard ratio，HR)，可通過Kaplan-Meier曲線利用Engauge Digitizer 4.1提取數(shù)據(jù)[4]。

五、文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)

利用NOS(Newcastle-Ottawa Scale)量表進(jìn)行文獻(xiàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)(http：//www.ohri.ca/programs/clinical_epidemiology/oxford.asp)

表1 納入文獻(xiàn)主要特征及結(jié)果

注： BCP-ALL=急性B前體淋巴細(xì)胞白血病；ALL=急性淋巴細(xì)胞白血病；RT-PCR=反轉(zhuǎn)錄 PCR；qRT-PCR=實(shí)時(shí)熒光定量PCR ；OS=總生存期；PFS=無進(jìn)展生存期；EFS=無事件生存期；mOS=中位總生存期

六、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用Review Manager 5.3軟件進(jìn)行Meta分析。匯集HR、OR與相應(yīng)的95%可信區(qū)間用來評(píng)估HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤預(yù)后的相關(guān)性。納入研究結(jié)果間的異質(zhì)性采用χ2檢驗(yàn)(檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.1)，同時(shí)結(jié)合I2定量判斷異質(zhì)性的大小。研究之間異質(zhì)性顯著采用隨機(jī)效應(yīng)模型，否則采用固定效應(yīng)模型。如納入文獻(xiàn)數(shù)目≥10篇，采用漏斗圖、Egger檢驗(yàn)等進(jìn)行發(fā)表偏倚檢測(cè)，如納入文獻(xiàn)數(shù)目<10篇，不進(jìn)行發(fā)表偏倚檢測(cè)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1.文獻(xiàn)基本情況：檢索PubMed、Embase、The Cochrane Library、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫和萬方數(shù)據(jù)庫共獲得2824篇文獻(xiàn)，剔除重復(fù)文獻(xiàn)19篇，通過對(duì)文獻(xiàn)題目及摘要進(jìn)行篩選，排除2780篇文獻(xiàn)。在剩余25篇文獻(xiàn)中，其中16篇因滿足排除標(biāo)準(zhǔn)被排除，1篇因最終的效應(yīng)量無法合并被排除，8篇文獻(xiàn)被納入Meta分析[5-12]。納入文獻(xiàn)信息見表1。

2.HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人性別相關(guān)性的Meta分析：對(duì)HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人性別相關(guān)性進(jìn)行分析，異質(zhì)性檢驗(yàn)I2=55%，應(yīng)用隨機(jī)效應(yīng)模型，結(jié)果表明男病人中HDAC9表達(dá)與女病人中HDAC9表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR 0.87，95%CI 0.22～3.40，P=0.84)。

3.HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)性的Meta分析：對(duì)HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)性進(jìn)行分析，異質(zhì)性檢驗(yàn)I2=0%，應(yīng)用固定效應(yīng)模型，結(jié)果表明，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移病人中HDAC9表達(dá)高于未轉(zhuǎn)移病人(OR 2.25，95%CI 1.18～4.29，P=0.01)。

4.HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人TNM分期相關(guān)性的Meta分析：對(duì)HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人TNM分期相關(guān)性進(jìn)行分析，異質(zhì)性檢驗(yàn)I2=66%，應(yīng)用隨機(jī)效應(yīng)模型，結(jié)果表明，TNM分期Ⅰ+Ⅱ期病人中HDAC9表達(dá)與Ⅲ+Ⅳ期病人中HDAC9表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR 0.55，95%CI 0.20～1.52，P=0.25)。

5.HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人總生存期(overall survival，OS)相關(guān)性的Meta分析：HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人總生存期相關(guān)性進(jìn)行分析見圖1，異質(zhì)性檢驗(yàn)I2=78%，應(yīng)用隨機(jī)效應(yīng)模型，結(jié)果表明，具有低HDAC9表達(dá)的惡性腫瘤病人比高HDAC9表達(dá)的病人具有更好的總生存期(HR 2.51，95%CI 1.11～5.66，P=0.03)。

6、HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人無進(jìn)展生存期(progression-free survival，PFS)相關(guān)性的Meta分析：對(duì)HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人PFS相關(guān)性進(jìn)行分析見圖2。異質(zhì)性檢驗(yàn)I2=0%，應(yīng)用固定效應(yīng)模型，結(jié)果表明，HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人PFS之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(HR 1.10，95%CI 0.97～1.26，P=0.14)。

圖1 HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人總生存期比較的Meta分析

圖2 HDAC9與惡性腫瘤病人無進(jìn)展生存期比較的Meta分析

7.HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人無事件生存期(event-free survival，EFS)相關(guān)性的Meta分析：對(duì)HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人EFS相關(guān)性進(jìn)行分析，異質(zhì)性檢驗(yàn)I2=63%，應(yīng)用隨機(jī)效應(yīng)模型，結(jié)果表明，具有低HDAC9表達(dá)的惡性腫瘤病人比高HDAC9表達(dá)的病人具有更好的EFS(HR 10.61，95%CI 1.26～86.90，P=0.03)。

8.敏感性分析及發(fā)表偏倚：將各個(gè)研究逐步剔除進(jìn)行敏感性分析，在HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人性別相關(guān)性的Meta分析中，剔除Rastogi等[12]的研究后，異質(zhì)性明顯降低(P=0.61，I2=0%)，采用固定效應(yīng)模型合并后差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR 0.49，95%CI 0.19～1.28，P = 0.15)；在HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人OS相關(guān)性的Meta分析中，剔除Zhou等[5]的研究后，異質(zhì)性明顯降低(P=0.40，I2=0%)，采用固定效應(yīng)模型合并后結(jié)果仍有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(HR 3.23，95%CI 1.92～5.42，P<0.01)；在HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人TNM分期相關(guān)性的Meta分析中，剔除Rastogi等[12]的研究后，異質(zhì)性明顯降低(P=0.61，I2=0%)，采用固定效應(yīng)模型合并后差異由無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義變?yōu)橛薪y(tǒng)計(jì)學(xué)意義(OR 0.33，95%CI 0.17～0.64，P<0.01)，說明該研究結(jié)果不穩(wěn)定，需要未來更多的研究結(jié)果進(jìn)行合并。其余研究Meta分析結(jié)果未發(fā)生改變。

因本研究納入文獻(xiàn)數(shù)目<10篇，不進(jìn)行發(fā)表偏倚檢測(cè)。

討 論

HDAC9位于染色體7p21，包括26個(gè)外顯子，在體內(nèi)參與調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡和血管生成等功能[13]。Zhao等[14]研究發(fā)現(xiàn)，骨肉瘤中高表達(dá)的HDAC9通過抑制p53活性促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲能力。Rastogi等[12]研究證實(shí)，過度表達(dá)的HDAC9通過作用于肌肉增強(qiáng)因子2D(myocyteenhancer factor，MEF2D)產(chǎn)生抑制凋亡作用導(dǎo)致口腔鱗癌的發(fā)生。然而，Okudela等[15]研究提示，HDAC9的表達(dá)在肺腺癌中顯著下降并抑制細(xì)胞增殖，具體機(jī)制尚不清楚。基于上述研究結(jié)果，推測(cè)HDAC9在惡性腫瘤病人中可能存在潛在的預(yù)后價(jià)值。HDAC9作為腫瘤標(biāo)志物的作用尚需進(jìn)一步研究。

本研究利用Meta分析研究了HDAC9在惡性腫瘤病人預(yù)后評(píng)估中的價(jià)值，發(fā)現(xiàn)HDAC9高表達(dá)與病人性別和TNM分期均無關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)。 HDAC9低表達(dá)病人比高HDAC9表達(dá)病人具有更好的OS與EFS，但是HDAC9表達(dá)與惡性腫瘤病人PFS之間不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。因此，臨床醫(yī)生應(yīng)該對(duì)HDAC9高表達(dá)的惡性腫瘤病人提高重視。

本研究存在以下局限性：(1)納入研究較少，且未納入灰色文獻(xiàn)，存在一定發(fā)表偏倚；(2)惡性腫瘤的種類和數(shù)量較少；(3)HDAC9高表達(dá)與低表達(dá)臨界標(biāo)準(zhǔn)各不相同；(5)部分文獻(xiàn)數(shù)據(jù)由軟件提取，精確性降低；(6)納入研究間異質(zhì)性較大，異質(zhì)性來源可能包括國家、種族不同；腫瘤類型不同以及HDAC9表達(dá)臨界值標(biāo)準(zhǔn)不同。

綜上所述，HDAC9的高表達(dá)是惡性腫瘤病人不良預(yù)后的危險(xiǎn)因素，可作惡性腫瘤預(yù)后不良的預(yù)測(cè)因子。