鎮巴縣不同品種野生資源淫羊藿質量研究

袁洪超，高顯超，徐 進，成世強，賀菁菁

(1.陜西金慧方中藥科技有限公司，陜西 鎮巴 723600；2.鎮巴縣科技進步促進中心，陜西 鎮巴 723600)

淫羊藿為小檗科植物淫羊藿(Epimedium brevicomu Maxim.)、箭葉淫羊藿(Epimedium sagittatum (Sieb.et Zucc.) Maxim.)、巫山淫羊藿(Epimedium wushanense T.S.Ying)柔毛淫羊藿(Epimedium pubescens Maxim.)或朝鮮淫羊藿(Epimedium koreanum Nakai)的干燥葉。夏、秋季莖葉茂盛時采收，曬干或陰干[1]。是中國藥典規定基源最多的藥材之一。主要用于陽萎早泄，腰酸腿痛，四肢麻木，半身不遂，神經衰弱，健忘，耳鳴，目眩等癥。淫羊藿喜陰濕環境，適生于林下、溝邊等濕度和遮陰度較高的生境。野生資源主要分布陜西、甘肅、山西、河南、青海、湖北、四川、廣西、吉林、遼寧、浙江、安徽等地。栽培主要分布在陜西、重慶、湖北等地[2-4]。淫羊藿對土壤有極為嚴格的要求，以中性酸或稍偏堿、疏松、含腐殖質、有機質豐富的土壤油沙壤土為好[5-7]。藥典規定淫羊藿有效成份主要是總黃酮和淫羊藿苷[1]，已有研究表明：現有分布的淫羊藿有效成份含量絕大多數都不符合藥典標準[3]。本研究針對鎮巴縣分布的不同品種淫羊藿有效成分進行測定，從而了解鎮巴縣不同品種淫羊藿質量情況，為今后鎮巴縣淫羊藿產業發展、品種選育和種植提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 主要試劑

淫羊藿苷(成都普思生物科技股份有限公司，批號：16081202)，乙腈(色譜純，美國賽默飛公司)，甲醇(色譜純，美國賽默飛公司)。

1.2 主要儀器

美國Agilent 1260 高效液相色譜儀(安捷倫科技有限公司)；細胞型18108 摩爾超純水機(重慶摩爾水處理設備有限公司)；JA26038 電子天平(上海精科天美科學儀器有限公司)；KQ-500E型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；LK-2000A 小型粉碎機(常州德杜精密儀器有限公司)。

1.3 實驗材料

實驗材料來自于陜西金慧方中藥科技有限公司對鎮巴縣淫羊藿資源考察采樣，淫羊藿(Epimedium brevicomu Maxim.)來源于鎮巴縣長嶺鎮中壩村；箭葉淫羊藿(Epimedium sagittatum (Sieb.et Zucc.)來源于鎮巴縣小洋鎮白河村；巫山淫羊藿(Epimedium wushanense T.S.Ying)來源于鎮巴縣鹽場鎮柳家河村。取干燥葉，低溫烘干，粉碎過3號篩，備用。

1.4 實驗方法

1.4.1 色譜條件

以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱(5um，250mm×4.6mm)；流速：1.0mL/min；柱溫箱：30℃；檢測波長：270；流動相為乙腈-水(30：70)等度洗脫。

1.4.2 標準樣品溶液的制備

精密稱取淫羊藿苷對照品1.0007mg，置于10mL的棕色容量瓶中，加入一定量的甲醇后置于超聲溶解，在用甲醇稀釋至刻度。

1.4.3 樣品溶液的制備

精密稱取粉碎過篩備用的巫山淫羊藿、箭葉淫羊藿、淫羊藿樣品0.2g，精密稱定，置于帶塞的錐形瓶中，精密加入稀乙醇20mL，稱定重量，超聲處理1小時，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，過濾，取過濾液，備用。

1.4.4 精密度實驗

取對照溶液，按照1.4.1的色譜條件，連續進樣5次，每次進樣相同的體積，記錄標準品的峰面積。

1.4.5 重復性實驗

稱取同一批號的藥材，按照1.4.2方法，依法制備5份。在按照1.4.1的色譜條件測定淫羊藿苷的含量。

1.4.6 加樣回收率

精密稱取5份淫羊藿樣品各0.1g，加入1mL淫羊藿苷對照品溶液，按照1.4.3的方法制備，測定含量，計算加樣回收率(%)。

1.4.7 含量的測定

稱取不同品種淫羊藿樣品各0.2g，按照1.4.3方法制備，制備樣品溶液，在1.4.1色譜條件下，測定含量，采用外標法計算淫羊藿苷的成分含量(%)。

2 結果與分析

2.1 淫羊藿苷標準品圖譜

如圖1所示，淫羊藿苷標準品色譜圖。

圖1 淫羊藿苷標準品色譜圖

2.2 精密度考察

淫羊藿苷的峰面積平均分別為2292.67，RSD值為0.27%；結果表明儀器精密度良好。

2.3 重復性考察

淫羊藿苷的含量為0.63%，RSD值為1.8%；結果表明該方法測定結果重復性良好。

2.4 加樣回收率

淫羊藿苷加樣回收率為100.4%，RSD值為0.38%；淫羊藿苷的加樣回收率在95%～110%之間，RSD值小于3%，符合要求。

表1 淫羊藿苷加樣回收率實驗

2.5 含量測定

中國藥典質量標準規定，按照干品計算，本品含淫羊藿苷不低于0.5%，本實驗結果表明，淫羊藿苷含量在淫羊藿和巫山淫羊藿中符合藥典規定，箭葉淫羊藿中淫羊藿苷的含量未達藥典規定。綜合以上分析顯示，鎮巴縣淫羊藿和巫山淫羊藿的品質符合藥典要求。

表2 鎮巴縣不同品種淫羊藿樣品中淫羊藿含量的測定

3 結論與討論

淫羊藿苷含量是藥典規定評價淫羊藿質量的重要指標，秦為瀚[3]等通過對不同產地15個品種淫羊藿的質量評價研究表明：僅有黔北、天平山、柔毛3個品種達標，其中天平山僅有30%的樣品達標，柔毛僅有46%樣品達標；本研究針對鎮巴縣域內3個不同品種的淫羊藿品質研究表明，通過對3個品種淫羊藿的淫羊藿苷的含量測定并對數據進行處理分析；結果表明：鎮巴縣域內分布的3種淫羊藿，其中淫羊藿和巫山淫羊藿的有效成份淫羊藿苷含量均達到藥典標準。