趙玉琳 陳陸琴 張謹華
摘要:以磯根‘葡萄蘇打帶有腋芽的莖段為外植體,研究了不同處理條件下的植株再生,試驗結果表明,不定芽誘導的最佳培養基為MS+6-BA 0.4mg/L+NAA0.05mg/L,最佳生根培養基為1/2MS+NAA 0.3mg/L,生根率達98%。生根苗經過適應性鍛煉移栽,可在太原市園林綠化中推廣應用。
關鍵詞:磯根;‘葡萄蘇打;組織培養;快繁
礬根(Heuchera micrantha)為虎耳草科磯根屬植物,原產美洲中部,為多年生耐寒性草本,葉基生,品種繁多,各品種葉色不同,喜溫涼,厭炎熱,是少有的彩葉陰生地被植物[1]。在冬季溫暖地區,葉子四季不凋,覆蓋力強,花葉兼美,適合做花鏡、花壇、地被材料或庭院綠化材料[2]。彩葉植物因其色彩富于變化,彩葉期長,觀賞價值較高,能夠豐富景觀色彩,烘托園林氣氛,彌補園林綠化中淡花期色彩單調的問題,所以彩葉植物在城市綠化建設中發揮著越來越重要的作用,并日益受到園林工作者的喜愛[3]。礬根因品種不同,有種子繁殖的,但種子發芽慢且不整齊;有分株繁殖的,但無法獲得大量礬根苗滿足市場需求[4]。通過植物組織培養技術對礬根‘葡萄蘇打進行了快速繁殖,為規模化生產提供依據。
1 材料與方法
1.1 試驗材料
試驗于2017~1018年在太原植物園進行,供試材料為礬根‘葡萄蘇打。4月初取帶腋芽的幼嫩莖段作為外植體。
1.2 試驗方法
1.2.1 無菌外植體的獲得。在盆栽的礬根‘葡萄蘇打上剪取帶腋芽的莖段,用洗衣粉浸泡10min,并在流水下沖洗1h,在超凈工作臺上用濾紙吸干莖段上的水分,75%酒精消毒20s,0.1%的氯化汞溶液洗滌1-3min,無菌水沖洗5-6次,無菌濾紙吸干莖段表面水分,接種到初代培養基上進行培養。
1.2.2 培養基和培養條件。基本培養基:MS培養基,均加蔗糖30g/L,瓊脂6g/L,pH值5.8~6.2。培養條件:溫度控制在25±2℃,光照時間為12h/d,光照強度為2000Lx。
1.2.3 誘導培養基的篩選。以MS為基本培養基,添加不同濃度的6-BA 0.1~1mq/L和NAA 0.01~0.05mq/L的芽誘導培養基上,觀察生長和誘導情況,確定最適合礬根‘葡萄蘇打的初始培養基。
1.2.4 增殖培養基的篩選。在誘導芽的初代培養基上,通過調節植物激素6-BA與NAA的濃度,篩選最佳增殖培養基,25d為1個繼代周期。
1.2.5 生根培養基的篩選。基本培養基為1/2MS,瓊脂6g/L,蔗糖15g/L,添加不同濃度的NAA,觀察磯根‘葡萄蘇打試管苗生根的情況,30d后統計生根率。
1.2.6 煉苗移栽。生根的試管苗具有5條以上的正常根即可進行移栽。先在煉苗室放置3d,然后在溫室打開瓶蓋煉苗2d,以培養基不染菌為宜。用鑷子取出組培苗,將其基部的培養基洗干凈,移入珍珠巖:泥炭土=1:1的穴盤中,放入小拱棚,移栽7d內進行50%~70%遮蔭,保證溫度在25℃左右,濕度在85%左右。
2 結果與分析
2.1 無菌苗的獲得
礬根作為一種多年生草本植物莖段比較嫩,不同消毒時間對磯根試管苗培養有一定的影響。在試驗過程中發現氯化汞消毒時間為1min時,外植體不會受到損傷,但污染嚴重,污染率達90%。當消毒時間為3min時,外植體的污染率較低,但外植體受損嚴重,在培養過程中出現褐化等現象,大多數外植體死亡,導致試管苗的獲得率降低。試驗表明礬根‘葡萄蘇打用75%9精20s,0.1%的氯化汞消毒2min效果最佳,污染率達30%。
2.2 外源激素對礬根‘葡萄蘇打初期誘導的影響
礬根‘葡萄蘇打腋芽在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA0.1mg/L培養基上20d左右均可產生愈傷組織,30d誘導出大量不定芽,芽嫩,芽高整齊,叢狀,誘導率可達100%。
2.3 增殖培養基的篩選
選取粗壯且長勢相同的磯根‘葡萄蘇打誘導苗接種到增殖培養基中繼代培養。隨著繼代次數的增加,叢生芽會出現玻璃化現象,降低激素使用濃度,減少玻璃化程度,在MS+6-BA 0.4mg/L+NAA 0.05mg/L培養基中,芽玻璃化現象較低,芽增殖率最高,可達82%,有效芽較多,且生長周期短。
2.4 生根及試管苗移栽成活情況
選取高度2cm的壯苗接種于1/2MS+NAA0.3mg/L的生根培養基上,30d后苗生根率為98%,根長2~3cm,生根5~8條,苗高4~6cm。經煉苗移栽,成活率可達100%,經過大田栽植能夠安全越冬。
3 小結
該研究發現礬根‘葡萄蘇打在MS+6-BA0.4mg/L+NAA 0.05mg/L培養基中增殖率能夠達到最高,分化出的苗可直接轉人1/2MS+NAA 0.3mg/L生根培養基中進行生根,且生根效果較好,每個外植體能夠生根5條以上,這樣可以縮短培養周期,降低生產成本,滿足工廠化生產的需求。生根苗經鍛煉5d后移栽到珍珠巖:泥炭土=1:1的基質中,成活率可達98%以上。(收稿:2019-07-30)
參考文獻:
[1]高燕,宋垚,等.礬根歐布西迪昂組培快繁技術[J].浙江農業科學,2015,56(06):895-898.
[2]張德祥,張君艷.新優觀葉花卉礬根的栽培管理技術[J].林業實用技術,2014(04):62-63.
[3]袁麗麗,王瑞.新優彩葉植物引種栽培及其園林應用[J].黑龍江農業科學,2016(10):95-97.
[4]陳宏,唐瑩,等.礬根的組織培養與快速繁殖[J].上海農業學報,2011,27(04):80-82.
作者簡介:趙玉琳(1989-),女,山西靈石人,助理工程師,主要從事園林綠化研究。