含銀抗菌膜對內鏡中心墻面抑菌效果的研究

顧 青，陸 燁，岑 莉，沈 哲，方 英，吳忱姣，盛婷婷

1.浙江大學醫學院附屬第一醫院，浙江杭州 310003；2.浙江省疾病預防控制中心，浙江杭州 310003

消化內鏡是一種伸入人體腔內進行診斷和治療的儀器，在診療過程中可形成大小不等的創面。如果內鏡中心環境消毒工作不徹底，病原體極易通過內鏡等醫療器械進入體內，導致醫源性感染[1]。目前各醫院普遍采用含氯消毒液對物體表面進行擦拭消毒，但在實際工作中發現，有些區域無法用擦拭方法處理，只能用含氯消毒液噴灑，但噴灑后墻面潮濕，為細菌滋生提供條件，增加了環境污染的概率。此外消毒液本身存在腐蝕性強、刺激性大、消毒不徹底、護理工作量大等缺點。含銀抗菌膜是Ag+型無機抗菌生物材料，是利用膠片成熟的銀微粒子和精密涂布的技術開發出的高性能的醫療級別的抗菌薄膜，對常見致病菌如肺炎克雷伯菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌等都具有很好的殺滅和抑制效果[2]。為尋求一種快速、安全、簡便、有效的墻面抑菌方法，2016年11月至2017年7月，浙江大學醫學院附屬第一醫院內鏡中心診療場所進行了含銀抗菌膜對物體表面抑菌效果的研究，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1實驗貼膜

實驗組采用含銀抗菌膜，是在普通醫用聚對苯二甲酸乙二醇酯(PET)膜添加銀系抗菌劑后制成。對照組采用普通PET膜，其具有穩定、良好的理化性能。兩組貼膜在使用前均未拆封，膜表面無菌狀態。拆封后撕開背膜膠，粘在指定地點。

1.1.2采樣棒和采樣液

一次性無菌采樣管內含無菌棉簽為采樣棒，管內含0.03 mol/L磷酸鹽緩沖液為采樣液。

1.1.3培養基及培養設備

普通營養瓊脂培養基和電熱可調試恒溫培養箱2020-2型。

1.2 實驗方法

1.2.1貼膜方法

選取醫院內鏡中心診療場所腸鏡室接診處、腸鏡洗消間、內鏡診療區域、內鏡打印報告處等共4個區域的墻面。參考《醫院消毒衛生標準》[3]，將含銀抗菌膜和普通PET膜分別用無菌剪刀剪成100 cm2面積規格各48片，分別貼到內鏡室的4個診療區域墻面，每處區域貼含銀抗菌膜和普通PET膜各12片。在任意一面墻上，各張貼12張含銀抗菌貼膜和12張普通PET膜，呈對稱分布。貼含銀抗菌膜和普通PET膜處，膜表面不再進行消毒液噴灑處理。

1.2.2采樣方法

貼膜后標注好12個日期(第2天、第4天、第7天、第11天、第17天、第22天、第35天、第49天、第80天、第139天、第170天、第195天)，分別在每個日期用采樣棒進行采樣。每次采樣分別在含銀抗菌膜和普通PET膜表面橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉動棉拭子，將棉拭子放回采樣管。

1.2.3檢測方法

將采樣管送至浙江省疾病預防控制中心消毒實驗室進行菌落數檢測。全部采樣管充分振蕩后，取不同稀釋倍數的洗脫液1.0 ml接種于平皿，使用保存于52℃水浴鍋中的營養瓊脂培養基，每皿傾注20 ml，37℃恒溫箱培養48 h，計數菌落數。

1.3 評價指標

內鏡診療場所屬于IV類環境，物體表面的細菌總數規定≤10.0 cfu/cm2，即物體表面的細菌總數≤10.0 cfu/cm2為合格，>10.0 cfu/cm2則視為不合格[3]。每個區域12張含銀抗菌貼膜和12張普通PET膜分別采樣可以各得到12個數據，取平均值作為該區域含銀抗菌貼膜和普通PET膜表面菌落數值，根據時間點共取12次，得到12個時間段貼膜表面菌落數。含銀抗菌膜及普通PET膜表面菌落總數(cfu/cm2)=(平均每皿菌落數×采樣液稀釋倍數)/采樣面積(cm2)。

1.4 統計學方法

2 結果

內鏡中心診療場所腸鏡室接診處、腸鏡洗消間、內鏡診療區域、內鏡打印報告處含銀抗菌膜與普通PET膜表面細菌生長情況見圖1、圖2、圖3、圖4，隨著時間的推移，含銀抗菌膜對物體表面的抑菌效果下降不明顯，表明其具有長效的抑菌性能。含銀抗菌膜表面菌落生長狀況明顯低于普通PET膜，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

圖1 腸鏡室接診處含銀抗菌膜和普通PET膜表面細菌生長情況

圖2 腸鏡洗消間含銀抗菌膜和普通PET膜表面細菌生長情況

圖3 內鏡診療區域含銀抗菌膜和普通PET膜表面細菌生長情況

圖4 內鏡打印報告處含銀抗菌膜和普通PET膜表面細菌生長情況

表1 含銀抗菌膜與普通PET膜對物體表面自然抑菌效果的比較

3 討論

3.1 尋求醫院內物體和儀器設備表面有效消毒方法或消毒材料的重要意義

據文獻報道，醫院內污染的物體和儀器設備表面是許多醫源性致病菌潛在的傳染源。醫院高頻接觸物體表面的污染率甚至達到97.5%[4-5]。現今各內鏡中心普遍采用含氯消毒液對污染的物體表面進行擦拭消毒[6]，但含氯消毒液消毒法存在腐蝕性強、工作量大等缺點，反復擦拭后能使人感到明顯刺激性氣味[7]。普通PET膜因其優良的生物相容性及理化性質，現已廣泛應用于醫療導管器械行業。但相關研究表明高分子材料表面菌膜的形成是材料相關性感染的主要因素[8]。因此，尋求一種更有效的消毒方法或能夠抑制醫用高分子器械表面菌膜的消毒材料具有重要意義。

3.2 含銀抗菌膜抑菌效果明顯且抗菌性能持久

為了抑制醫用高分子器械表面的菌膜形成，目前可采用在醫用高分子加工過程中加入銀系抗菌劑使高分子材料具有抑菌和殺菌作用。Ag+的主要抗菌機制：吸附在細菌表面，與細菌體內的一些基團(如巰基等)結合，抑制細菌表面及體內的生物大分子活性，及影響代謝關鍵酶的活性，導致細菌死亡；可能與細胞膜、細胞壁DNA相結合，影響細菌的核酸以及蛋白的合成，使其失活；可能影響細菌的凋亡[9]。本研究使用的抗菌薄膜是金屬離子型無機抗菌生物材料，其利用膠片成熟的銀微粒子和精密涂布的技術開發出的高性能的醫療級別的抗菌薄膜，并與普通PET膜進行對比研究，研究結果顯示，含銀抗菌膜和普通PET膜物體表面的微生物生長均受到了抑制，并且含銀抗菌膜菌落生長抑制更明顯。說明含銀抗菌膜對物體表面的抑菌效果優于普通PET膜。此外本研究共持續了195 d，結果顯示，含銀抗菌膜的抑菌效果并沒有因為時間的延長而出現抑菌性能下降，說明含銀抗菌膜具有長效的抑菌性能。在內鏡診療場所清潔度的比較中，腸鏡洗消間處表面的清潔度最差，并且消毒合格率最低，其次為內鏡診療區域、腸鏡室接診處、內鏡打印報告處。腸鏡洗消間是清洗消毒使用后內鏡的場所，人員來往繁忙，且使用后的內鏡自身帶有病原體，內鏡消毒機表面易受病原體污染，因而清潔度較差，臨床上應加強消毒殺菌。此外，在應用含銀抗菌膜后，腸鏡洗消間處物體表面微生物的生長明顯受到了抑制。進一步說明了含銀抗菌膜是一種具有重要應用前景的抑菌方法，在診療操作頻繁的內鏡中心診治場所中可作為物體表面抑菌的理想選擇。