抗核抗體和抗核抗體譜聯(lián)合檢測診斷自身免疫性疾病的臨床價值

陳利瓊，劉玉平，李陳林

克拉瑪依市中心醫(yī)院檢驗科，新疆克拉瑪依 834000

自身免疫性疾病（AID）是指因人體自身存在的具 有免疫效應(yīng)的物質(zhì)或細胞對人體自身產(chǎn)生的過度免疫應(yīng)答，從而發(fā)生一系列的組織損傷與機體功能障礙[1]。AID可累及皮膚、關(guān)節(jié)、神經(jīng)、腎臟等多種器官、組織與系統(tǒng)，癥狀復(fù)雜多變，對患者的身心健康具有嚴(yán)重不良影響。抗核抗體檢測與抗核抗體譜檢測是目前對疑似AID患者進行進一步診斷的常用檢驗方法，對于AID患者的病情監(jiān)測、預(yù)后評估等內(nèi)容具有重要價值[2]。越來越多的研究證實[3]，采用酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測ANA，對輔助診斷AID具有重要的意義，而ANAs檢測對AID的診斷同樣具有重要價值。但何種檢測方法對于AID的診斷效果更佳，目前研究數(shù)據(jù)尚不足，故該文以該院在2017年1月—2019年12月期間收診的97例自身免疫性疾病患者作為研究對象，探討和分析ANA檢測和ANAs檢測對于AID的診斷價值。報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院收診的97例自身免疫性疾病患者作為研究對象，其中男性患者35例，女性患者62例；年齡6～81歲不等，平均年齡為（47.78±15.36）歲；其中32例患者為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，31例患者為系統(tǒng)性紅斑狼瘡，12例患者為干燥綜合征，11例患者為混合性結(jié)締組織病，6例患者為硬皮病，5例患者為過敏性紫癜。實驗組所有入選患者均符合美國風(fēng)濕病學(xué)會的診斷標(biāo)準(zhǔn)。該實驗經(jīng)該醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)同意施行。患者及其家屬知情并同意。以上患者在一般資料數(shù)據(jù)對比上差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。具有可比性。

1.2 方法

ANA檢測儀器：瑞士HAMILTON全自動酶免分析儀。方法：研究對象清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取肘靜脈血3～5 mL，安靜放置30 min后，置于離心機內(nèi)以3 500 r/min的速度離心5 min，離心后取上層清液，如不能及時檢測需保存在-20℃冰箱中，檢測時選用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA法）進行檢測[4]。嚴(yán)格按照操作說明書進行檢測：取待測血清，使用稀釋液按1∶80的比例稀釋后加入至ELISA板孔內(nèi)，試驗中設(shè)空白對照孔、陰性對照孔、陽性對照孔、臨介對照孔等，溫育60 min，溫育后使用專用洗液洗滌6次，再加入酶結(jié)合物進行第二次溫育，時間30 min，溫育后洗滌6次，加底物和底物緩沖液進行第三次溫育顯色，時間15 min，最后加終止液終止反應(yīng)后使用酶標(biāo)儀450 nm和630 nm雙波長比色，測反應(yīng)板的吸光度(OD)值。判斷結(jié)果的陰陽性，若滴度≥1:80，則為陽性。陽性者檢測抗體分成4個滴度：1∶5 120、1∶2 560、1∶1 280、1∶320。

ANAs檢測：德國胡曼生化診斷有限公司生產(chǎn)的抗核抗體譜測定試劑盒。標(biāo)本采集與ANA一致，選用線性免疫印跡法進行檢測[4]，記錄抗SmD1、抗dsDNA、UISnRNP、抗核糖體P蛋白、抗組蛋白、抗SS-B、抗SS-A、抗核小體、抗Jo-1、抗Scl-70、抗-CNEP-B等IgG類抗體，根據(jù)AID確診結(jié)果，統(tǒng)計ANA準(zhǔn)確率與ANAs準(zhǔn)確率[5]。

1.3 統(tǒng)計方法

實驗所涉及的資料及數(shù)據(jù)均運用SPSS 21.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行分析，用（%）表示百分?jǐn)?shù)，百分?jǐn)?shù)和例數(shù)用χ2檢驗，P＜0.05差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ANA和ANAs陽性率的比較

女性患者各項檢出的陽性率ANA（75.81%）、Ul-SnRNP（8.06%）、抗SSA（37.10%）、抗SSB（20.97%）、抗核小體（30.65%）和抗組蛋白（37.10%），明顯高于男性患者，均差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。抗ds-DNA、抗SmDl、抗Jo-1、抗Scl-70、抗CNEP-B、抗PM-Scl、抗核糖體P蛋白在不同性別間比較，均差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

表1 不同性別組ANA和ANAs陽性率的比較[n(%)]

2.2 不同檢測方法檢測準(zhǔn)確率情況的比較

經(jīng)酶聯(lián)免疫吸附法得到的ANA陽性結(jié)果和經(jīng)線性免疫印跡法得到的ANAs陽性結(jié)果與AID確診情況對比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ANA檢測的準(zhǔn)確率為67.01%，ANAs檢測的準(zhǔn)確率為92.78%，ANAs檢測與ANA檢測結(jié)果對比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=20.058，P＜0.05）。見表2。

表2 不同檢測方法檢測準(zhǔn)確率情況比較（n）

3 討論

機體在發(fā)生AID時會產(chǎn)生一個重要的標(biāo)志，即出現(xiàn)抗體，并且任何一種AID都具有其相對的抗體譜[6]。由于AID患者體內(nèi)存在著與AID相關(guān)的高效價抗體，故臨床可利用這一特征對AID進行診斷，目前檢驗科所應(yīng)用的診斷AID的檢驗方法就是基于此理論進行的。與自身免疫性疾病關(guān)系較為密切的抗體包括抗核抗體，以及由抗ds-DNA、抗SmDl等抗體組成的抗核抗體譜。目前在臨床中對AID進行診斷很大程度上也是從這兩個方面展開檢測，通常會使用抗核抗體檢測和抗核抗體譜檢測，其在檢測中應(yīng)用最廣泛，并且具有較高的敏感性[7]。ELASA法檢測ANA目前在檢驗科較為常用，近年來隨著對免疫學(xué)研究的深入，自身特異性靶抗原受到重視，ELASA法能夠檢測的自身特異性抗體種類不斷增加，靈敏度和特異性也得到顯著提高，對于ANA檢測采用ELASA試劑盒，操作簡單，基本不受操作技師的個體影響，對于檢測標(biāo)準(zhǔn)與檢測質(zhì)量具有良好的控制性[8]。ANA在多數(shù)AID患者中都能檢出，但仍有很多AID患者ANA呈現(xiàn)陰性，而ANAs則很好的彌補了這一不足，ANAs由ANA、抗ds-DNA等多種抗體組成，相比于單純的ANA來說，對AID的檢測更加全面，在該研究中，女性患者各項陽性率：ANA（75.81%）、Ul-SnRNP（8.06%）、抗SSA（37.10%）、抗SSB（20.97%）、抗核小體（30.65%）和抗組蛋白（37.10%）明顯高于男性患者（P＜0.05）。抗ds-DNA、抗SmDl、抗Jo-1、抗Scl-70、抗CNEP-B、抗PM-Scl、抗核糖體P蛋白在性別間對比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。該文的研究與其他學(xué)者研究結(jié)果相似，例如在周蓮等人[9]的研究中，通過檢測證明了AID患者中，在ANA、Ul-SnRNP、抗SSA、抗SSB、抗核小體和抗組蛋白等指標(biāo)方面，女性陽性率分別為74.32%、7.73%、38.22%、19.32%、31.56%、36.84%，均高于男性（P＜0.05）。而在其他指標(biāo)方面，性別差異不明顯。另外，經(jīng)不同檢測方法與AID確診情況對比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)ANA檢測的準(zhǔn)確率67.01%低于ANAs檢測的準(zhǔn)確率92.78%（χ2=20.058，P＜0.05）。這與李春江等[10]研究結(jié)果類似，說明了AMAs聯(lián)合檢測的優(yōu)越性。

綜上所述，采用抗核抗體譜聯(lián)合檢測對自身免疫性疾病進行診斷，相比于單純應(yīng)用抗核抗體檢測能夠有效提高該病的診斷率，降低失誤，對于AID的診斷和治療具有重要價值。