阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾的毒性試驗(yàn)

阿苯達(dá)唑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中主要用于防治淡水魚類體表寄生的指環(huán)蟲、三代蟲、黏孢子蟲及海水魚類寄生的雙鱗盤吸蟲、貝尼登蟲等。甲苯咪唑主要用于治療魚類指環(huán)蟲、三代蟲等單殖類吸蟲。從防治對象不難看出它們均屬于抗蠕蟲藥物，但甲苯咪唑在說明書中明確規(guī)定了斑點(diǎn)叉尾、大口鲇禁用，而阿苯達(dá)唑卻未標(biāo)注對斑點(diǎn)叉尾、大口鲇禁用的相關(guān)內(nèi)容。本文就阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾是否敏感進(jìn)行深入的研究與試驗(yàn)，試驗(yàn)過程分為實(shí)驗(yàn)室小試與池塘網(wǎng)箱試驗(yàn)。

一、實(shí)驗(yàn)室材料與方法

1.試驗(yàn)材料

(1)試驗(yàn)器材：玻璃水族缸共3個，大小相同，規(guī)格1.2米×0.6米×0.5米，編號分別為BHL-001、BHL-002、BHL-003，分別用于阿苯達(dá)唑溶液的藥敏試驗(yàn)；溫度計、電子天平、增氧機(jī)、pH試紙、測氧瓶、滴定管、移液管、錐形瓶、吸耳球、燒杯、玻璃棒等。

(2)試驗(yàn)魚種：由山西黃河魚病研究所生態(tài)養(yǎng)殖場提供，經(jīng)本所技術(shù)員鑒定無病無傷、規(guī)格整齊的健康斑點(diǎn)叉尾魚種，體長20～23厘米，平均體長21.5厘米，平均體重220克/尾，共30尾。

(3)藥品來源：阿苯達(dá)唑(98%原粉)由山西乾泰動物藥業(yè)有限公司提供，冰醋酸購置于運(yùn)城市新興化工試劑商店。

(4)阿苯達(dá)唑溶液配制：用電子天平稱取10.2克阿苯達(dá)唑，溶解于89.8克的冰醋酸中，并用玻璃棒不斷攪拌，待粉末狀藥劑完全溶解后制成規(guī)格100∶10的阿苯達(dá)唑溶液。

2.藥敏試驗(yàn)前準(zhǔn)備工作

(1)水族缸注水：分別在BHL-001、BHL-002、BHL-003水族缸內(nèi)注入經(jīng)曝氣后的自來水240升，打開增氧泵。

(2)投放魚種前的水質(zhì)監(jiān)測：水溫28～32℃、溶氧5.0毫克/升、pH≥7.5，3個水族缸內(nèi)水的理化指標(biāo)基本相同，符合養(yǎng)魚標(biāo)準(zhǔn)。

(3)投放魚種：5小時后分別在水族缸中放入備好的斑點(diǎn)叉尾魚種各10尾，暫養(yǎng)3日，暫養(yǎng)期間進(jìn)行日常管理但不投喂，并以充分曝氣的自來水為水源。

3.藥敏預(yù)備試驗(yàn)

(1)試驗(yàn)場所：于2019年7月在山西黃河魚病研究所實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，目檢3個水族缸內(nèi)魚種基本正常，未見異常現(xiàn)象。

(2)試驗(yàn)藥物濃度：阿苯達(dá)唑溶液按0.05、0.1、0.15毫克/升進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。藥物稀釋前按240升水計算出每個水族缸內(nèi)的準(zhǔn)確劑量。

(3)藥物稀釋與備用：用吸管吸取阿苯達(dá)唑溶液12、24、36毫克分別放入3個大小同等的燒杯內(nèi)，加入200倍的水充分將藥物稀釋，準(zhǔn)備使用。

4.藥敏正式試驗(yàn)

(1)藥物施用：用備好的藥液均勻?yàn)⑷?個水族缸內(nèi)，其中阿苯達(dá)唑溶液施入BHL-001、BHL-002、BHL-003，藥液劑量分別為12、24、36毫克。

(2)藥敏試期管理：試驗(yàn)開始后，前12小時每2小時觀察1次，記錄試驗(yàn)魚的表現(xiàn)和中毒癥狀及水溫、溶氧、pH等指標(biāo)，并于12、24、48、72、96小時分別記錄試驗(yàn)魚的死亡數(shù)，試驗(yàn)期間不投餌，及時清除排泄物和死亡個體。在藥敏試驗(yàn)期間嚴(yán)格保證試驗(yàn)水的溶解氧，防止試驗(yàn)魚缺氧死亡。每隔6小時測定溶氧1次，需保證水族缸內(nèi)溶氧≥5毫克/升，避免缺氧死亡。

(3)試驗(yàn)魚死亡的判斷：試驗(yàn)魚在中毒后鰓蓋停止活動，用玻璃棒或小鑷子輕輕刺激試驗(yàn)魚尾柄部位，5分鐘內(nèi)仍無反應(yīng)即可確定為個體死亡。

5.毒性試驗(yàn)結(jié)果分析

表1 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾的毒性試驗(yàn)

表1 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾的毒性試驗(yàn)

注：試驗(yàn)魚數(shù)均為10尾。

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6.實(shí)驗(yàn)室小試小結(jié)

二、池塘現(xiàn)場試驗(yàn)

1.試驗(yàn)前準(zhǔn)備

(1)試驗(yàn)場所：陜西省合陽縣黃河灘涂兩個粗養(yǎng)四大家魚池塘，塘內(nèi)有鰱魚、鯉魚、草魚及鳙魚，池塘分別為5畝水面，水深1米，池塘代號為HG-001、HG-002。

(2)池塘水源：水源為地下井水，池水pH≥7.5、溶氧≥5.0毫克/升、水溫32℃，鏡檢以綠藻為主，少量隱藻，未檢到有害物質(zhì)，兩個池塘的水質(zhì)指標(biāo)基本相同。

(3)網(wǎng)箱設(shè)置：分別在兩個池塘中央各放置1個5米×5米×1米的網(wǎng)箱。

2.正式試驗(yàn)

(1)藥物濃度與試驗(yàn)劑量：試用藥物為10%阿苯達(dá)唑溶液，兩個池塘的用藥劑量分別為0.1、0.15毫克/升，即HG-001用333.5克，HG-002用500.25克。

(2)藥物施用：將備好的藥液加入適量的池水充分溶解，均勻全池潑灑，打開增氧機(jī)兩小時，以確保藥物的均勻度。

(3)死亡鑒定：魚兒停止活動、身體僵硬、漂浮水面為死亡依據(jù)，并將死魚及時撈出。

3.池塘網(wǎng)箱試驗(yàn)結(jié)果

試驗(yàn)塘HG-001、HG-002分別從12時開始施入不同劑量的阿苯達(dá)唑溶液，18時觀察兩個試驗(yàn)塘吃食均正常，未發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象。第2天6時兩個試驗(yàn)塘吃食良好，也未發(fā)現(xiàn)其他不良癥狀，12時觀察HG-001吃食正常，HG-002吃食緩慢，吃食數(shù)量減少，未有不正常現(xiàn)象；18時HG-001吃食良好，HG-002完全停食，有個別魚出現(xiàn)上下竄動和側(cè)游不良癥狀。第3天6時HG-001吃食良好，HG-002死亡18尾，飄出水面，還有部分魚上下竄動和側(cè)游等不良癥狀；12時HG-001吃食緩慢，吃食數(shù)量減少，無其他異常行為，HG-002死亡7尾；18時，HG-001完全停食，有部分魚狂游，但未見死亡，HG-002撈出死魚15尾。第4天6時HG-001撈出死魚13尾，HG-002撈出死魚17尾；12時HG-001撈出死魚9尾，HG-002撈出死魚9尾；18時，HG-001撈出死魚8尾，HG-002撈出死魚14尾。第5天6時HG-001撈出死魚11尾，HG-002撈出死魚20尾，全部死亡，死亡率100%；12時HG-001撈出死魚6尾；18時，HG-001撈出死魚8尾。第6天6時HG-001撈出死魚24尾，12時HG-001撈出死魚9尾，18時HG-001撈出死魚12尾，全部死亡，死亡率100%。不同劑量阿苯達(dá)唑溶液對斑點(diǎn)叉尾的致死率詳見表2。

表2 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾池塘網(wǎng)箱試驗(yàn)記錄

表2 阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾池塘網(wǎng)箱試驗(yàn)記錄

注：吃食正常用“＋＋”表示，吃食減少用“＋”表示，停食用“－”表示，活動正常用“√”表示，活動異常用“×”表示。

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4.池塘試驗(yàn)小結(jié)

三、總結(jié)

無論實(shí)驗(yàn)室小試還是池塘網(wǎng)箱試驗(yàn)，都證實(shí)了阿苯達(dá)唑?qū)Π唿c(diǎn)叉尾有毒。我們根據(jù)藥物作用的四大過程(吸收、分布、代謝、排泄)，可判斷阿苯達(dá)唑利用內(nèi)服或外潑的方法會對斑點(diǎn)叉尾產(chǎn)生相同的毒性。但國標(biāo)水產(chǎn)藥典產(chǎn)品中6%的阿苯達(dá)唑粉在使用說明書中未注明對斑點(diǎn)叉尾禁用或慎用的相關(guān)信息，因此提醒大家阿苯噠唑在斑點(diǎn)叉尾養(yǎng)殖中應(yīng)慎用或禁用。