雷珠單抗對糖尿病黃斑水腫患者黃斑區視網膜血管密度及形態的影響

顏智鵬，蔣 沁

0引言

糖尿病視網膜病變(diabetic retinopathy, DR)是臨床常見的眼底病變之一，多伴有黃斑水腫、眼底出血、視網膜脫離等并發癥，從而直接影響患者視力及生活質量。其中，糖尿病黃斑水腫(diabetic macular edema, DME)[1]最為常見，在病程發展的多個階段均有可能出現，而對于DME的治療方法，目前主要為玻璃體腔內注射抗血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)藥物，大量臨床觀察顯示效果顯著[2-4]。而在治療效果的評價上，除了主觀的視力、客觀的黃斑中心凹厚度的檢測，光學相干斷層掃描血管成像(optical coherence tomography angiography, OCTA)[5]可以從黃斑區不同層面血管分布及中心凹無血管區(foveal avascular zone,FAZ)結構變化的角度提供更為細微的監測與評價指標[6]。本研究采用OCTA觀察DME患眼經玻璃體腔內注射雷珠單抗(Rainbizumab)治療前后黃斑區血管形態、密度及微血管瘤等變化，并探討其臨床意義。

1對象和方法

1.1對象收集2019-03/05在我院門診確診為DR且伴有DME患者45例52眼，其中男23例26眼，女22例26眼，年齡35～72(平均54.27±11.24)歲。所有觀察對象均在門診行裂隙燈顯微鏡及直接眼底鏡檢查，并經光學相干斷層掃描(optical coherence tomography,OCT)及眼底熒光血管造影(fundus fluorescein angiography, FFA)檢查，確診為DME者。DME診斷標準[7]：視網膜水腫增厚以及硬性滲出波及距黃斑中心凹500μm以內和在中心凹周圍出現超過1PD范圍的視網膜水腫區，OCT測量黃斑中心凹厚度>300μm。納入標準：糖尿病病史，且OCT及FFA檢查確診為DME。排除標準：視網膜中央動脈或靜脈阻塞、年齡相關性黃斑變性、先天性黃斑營養不良、黃斑裂孔、眼前節炎癥、青光眼、眼外傷、屈光介質嚴重混濁等，同時排除伴有玻璃體積血、視網膜前出血或增殖膜形成等影響黃斑區掃描的增殖性糖尿病視網膜病變患者。所有患者治療前均被詳細告知其患病的性質及治療必要性，簽署知情同意書，并經醫院倫理委員會批準。

1.2方法所有患眼均接受玻璃體腔內注射雷珠單抗治療，玻璃體腔注射按常規內眼手術要求操作，5g/L鹽酸丙美卡因滴眼液行3次表面麻醉后，分別用50g/L聚維酮碘和生理鹽水沖洗結膜囊，30G注射針頭于患者顳下方角膜緣后35mm處睫狀體平坦部進針，玻璃體腔注射雷珠單抗注射液 0.05mL/0.5mg，氧氟沙星眼膏點眼、術后左氧氟沙星滴眼液點眼，3次/d，連續1wk。采用光學相干斷層掃描血管成像(OCTA)(Optovue，Avanti RTVue XR系統)對所有患眼治療前及治療1wk后進行檢查，檢查時選擇angio retina 3mm×3mm范圍模式進行掃描，所有掃描均開啟“Follow up”及“Tracking”功能，以黃斑中心凹為中心，對3mm×3mm范圍掃描數據系統進行自動分析。淺層毛細血管叢(superficial capillary plexuses，SCP)為內界膜至內叢狀層外界，深層毛細血管叢(deep capillary plexuses, DCP)為內叢狀層外界至外叢狀層后外界，系統對該兩層均可分析獲得相應血管密度，并由兩位經驗豐富的檢查技師逐個列數SCP及DCP微血管瘤(表現為小簇狀微血管膨大)個數，并取兩者平均值計數，同時通過系統FAZ分析功能獲得FAZ面積、周長及非圓度指數(測得周長與等面積標準圓周長比值)。

2結果

治療后1wk SCP血管密度較治療前略降低，但差異無統計學意義(t=1.635，P=0.10)，而治療后DCP血管密度較治療前明顯增加，差異有統計學意義(t=1.104，P=0.02)。治療后1wk SCP微血管瘤個數較治療前減少，但差異無統計學意義(t=1.623，P=0.21)；而治療后DCP微血管瘤個數較治療前減少明顯，差異有統計學意義(t=1.124，P=0.01)。治療后1wk FAZ面積較治療前略擴大，FAZ周長略增加，且非圓度指數稍降低，但與治療前比較，三者差異均無統計學意義(P>0.05)，見表1、圖1～3。

3討論

DR是常見的視網膜血管性疾病，該疾病的微血管病變會導致眼底出血，嚴重影響視力，甚至致盲，其發病過程可能主要是由于代謝和微環境的變化導致毛細血管和內皮細胞損傷，VEGF 表達水平上調，引起新生血管的形成，從而導致視網膜出血、玻璃體腔積血及纖維血管增生，晚期可能會導致牽拉性視網膜脫離。而DME常伴發于DR進展過程中，導致中心視野內視覺質量下降，其發病機制與高血糖密切相關，主要病理特征是高血糖使位于毛細血管內皮細胞水平的血-視網膜內屏障損壞，導致視網膜血管滲漏增加，液體和血漿等有形成分進入黃斑區視網膜組織內使其增厚形成黃斑水腫。而目前DR診斷及分級的金標準仍是FFA，其檢查中觀察到的微血管瘤、無灌注區及新生血管滲漏等改變，均是該疾病診斷分級及指導進一步治療的依據，但由于FFA檢查設備放大倍率的局限，及晚期熒光滲漏遮擋的影響，黃斑區淺層及深層毛細血管改變均不能得到清晰觀察[8]；且之前對于DME的觀察及治療前后療效的比較評估，只能依靠OCT進行黃斑區二維斷層成像，通過對比視網膜全層厚度來評價治療效果，因此DME診斷及評估均較為單一，缺乏進一步血管及發病機制層面的立體觀察。

OCTA作為近年來出現的新技術，得到眼科臨床的廣泛應用，其能夠檢測并分析黃斑區各層微血管形態及血管密度等相關參數，且具有較高的重復性及一致性，對于全方位觀察DME特點表現及進一步探究DME的發病機制、疾病進程具有獨特優勢[9-11]。

本研究主要通過最新OCTA量化指標觀察研究DME患眼玻璃體腔注射雷珠單抗治療前后黃斑區血管密度、微血管瘤個數、FAZ結構及面積變化，結果顯示，DME患眼眼內注射雷珠單抗治療后黃斑區3mm×3mm范圍內SCP血管密度較治療前無明顯差異，這與Khalil等[12]觀察的DME在眼內單次注射抗VEGF后中心凹和旁中心凹視網膜毛細血管密度較治療前均無明顯變化的結果一致；而治療后DCP血管密度明顯提高，微血管瘤個數減少，與治療前相比具有統計學差異，這與Lee等[13]研究發現DME患眼DCP血管異常(如微動脈瘤數增加、血管密度降低)明顯高于SCP，認為DCP的完整性參與DME發病機制的結果基本一致，提示注射雷珠單抗治療后促進了視網膜深層血液循環與分布，并可能改善了黃斑水腫的吸收。以往研究表明，以雷珠單抗為代表的抗VEGF藥物主要通過拮抗作用抑制新生血管生成、降低血管通透性、調控血-視網膜屏障通透性，從而達到促進視網膜內滲液吸收和改善黃斑水腫的目的[14-16]。本研究中，通過OCTA確實可以觀察到抗VEGF藥物注射治療后，糖尿病黃斑水腫消退的同時，淺層及深層視網膜微血管瘤數減少，毛細血管更為密集的深層視網膜尤為顯著，且該層血管密度的增加也提示血管本身的通透性及屏障功能得到保護；另一方面，囊樣水腫的改善也進一步在結構上減少了對視網膜微血管的“擠壓”，從而提高了單位面積內的血管密度。

圖1DME患者玻璃體腔注射雷珠單抗治療前后OCTA血管密度圖A：治療前SCP層血管密度圖；B：治療后1wk SCP層血管密度圖；C：治療前DCP層血管密度圖；D：治療后1wk DCP層血管密度圖。

圖2DME患者玻璃體腔注射雷珠單抗治療前后微血管瘤分布圖A：治療前SCP層 3mm×3mm范圍內微血管瘤分布(綠色圈內)；B：治療后1wk SCP層3mm×3mm范圍內微血管瘤分布(綠色圈內)；C：治療前DCP層 3mm×3mm范圍內微血管瘤分布(黃綠色圈內)；D：治療后1wk DCP層3mm×3mm范圍內微血管瘤分布(黃色圈內)。

時間眼數黃斑區血管密度(%)SCPDCP微血管瘤個數(個)SCPDCPFAZ面積(mm2)周長(mm)非圓度指數治療前5236.22±3.3442.47±4.163.21±0.318.21±0.410.303±0.0232.25±0.411.18±0.34治療后1wk5235.71±3.1246.59±4.912.92±0.426.10±0.670.328±0.0312.33±0.341.16±0.22t1.6351.1041.6231.1241.8511.9621.783P0.100.020.210.010.170.280.21

圖3DME患者玻璃體腔注射雷珠單抗治療前后FAZ形態分析圖A：治療前；B：治療后1mo。

同時，對于DME患眼治療前后FAZ的變化觀察，盡管結果顯示治療后FAZ面積、周長略增加，非圓度指數稍降低，但與治療前比較，三者均無統計學差異，這與Khalil等[12]觀察的DME抗VEGF治療前后FAZ面積無明顯變化的結果一致。FAZ形態變化受多種因素影響，除視網膜表面皺褶牽拉等機械性作用外，視網膜內囊樣水腫、微血管血供減少等也是可能原因之一，DME患眼黃斑區視網膜增厚，中心凹周圍血管受囊腔等“擠壓”，可能導致FAZ形態不規則等改變，而雷珠單抗注射治療后，黃斑區囊樣水腫減退，因此FAZ形態趨于規則；同時，在上述血管密度觀察中，我們發現治療后短期內SCP血管密度無明顯變化，提示視網膜表層毛細血管缺血狀態并無明顯改善，推測可能也是研究結果中顯示FAZ形態參數較治療前無明顯統計差異的原因之一。

當然，本研究的局限性在于樣本量小，對DME患眼沒有進行分期等進一步研究，觀察時間較短等不足，在后續研究中會進一步加大樣本量，延長隨訪時間，細化研究過程，進一步觀察研究。

總之，DME患眼經雷珠單抗注射治療后，短期內可改善黃斑區DCP血管分布，促進其密度增加，減少微血管瘤形成，而對SCP血管分布改變不明顯；另外，治療后FAZ面積、周長可能有擴大的趨勢，且FAZ形態可能更規則，但尚無顯著臨床意義。