血清SOD、SA、SAA在不同分期結直腸癌中表達及其早期診斷價值

陳正立 王園園 趙小潔 王國欣 耿玉蘭

(河北醫科大學第一醫院 1檢驗一科，河北 石家莊 050030；2普外三科)

結直腸癌是發生在結腸黏膜上皮的惡性腫瘤，其具有病情發展緩慢、死亡率高等特點。結直腸癌隱匿期強，臨床常表現為腹脹、消化不良及便血等〔1〕。據不完全數據統計〔2〕，全世界每年新增結直腸癌病例800萬例左右，占惡性腫瘤的10%～15%。結直腸癌病因復雜，與基因、炎癥病變、飲食習慣及結腸病癥有關。研究表明〔3〕，早期發現并確診結直腸癌早進行治療，可有效切除癌變組織，改善預后，提高患者存活率。X線及內鏡檢查是目前臨床上常用的診斷手段，其操作復雜，患者依從性低，且靈敏度較低，若需確診仍需行有創病理組織檢查〔4〕。而血清指標檢測因操作方便簡單、費用低和周期相對較短等優點，已被臨床廣泛推廣。Michaeli等〔5〕研究表明，血清淀粉樣蛋白(SS)A與結直腸癌發生、發展及惡化轉移有密切關聯，對不同分期結直腸癌診斷有一定的價值，但其敏感度和特異度相對較低，易受機體炎癥反應干擾。研究發現，血清唾液酸(SA)主要分布于機體細胞膜表面，是細胞膜重要組成結構，當細胞發生癌變時，血清SA水平明顯上調，其表達與癌癥分期密切相關，且濃度不隨年齡性別而改變〔6〕；隨著醫學技術深入，研究發現機體內自由基可誘導脂質過氧化反應，斷裂DNA分子氫鍵而造成基因突變，進而對機體產生致癌作用〔7〕，而血清超氧化物歧化酶(SOD)是機體重要的抗氧化酶，其可有效消除機體過剩自由基而減少機體基因突變〔8〕。臨床實踐表明〔9〕，多個血清指標進行聯合檢測有利提高結直腸癌早期的診斷效能，因此本研究對結直腸癌患者和正常人群的血清SOD、SA和SAA進行聯合檢測，探討三者單獨及聯合檢測在結直腸癌早期診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 本研究已獲得醫院倫理委員會批準并獲得患者及其家屬知情同意，選取2015年12月至2018年7月河北醫科大學第一醫院收治的79例結直腸癌老年患者為研究組，其中TNM分期Ⅰ期13例，Ⅱ期23例，Ⅲ期20例及Ⅳ期23例。另外選取同期醫院體檢的79例健康志愿者為對照組。兩組受試者年齡和體重指數(BMI)差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。納入標準：經病理組織確診為結直腸癌；學歷小學以上，便于溝通交流者；年齡60～75歲；患者及其家屬知情同意本研究。排除標準：肝、腎和心臟功能嚴重損害的患者；毒品或酒精濫用者；并發患有其他惡性腫瘤患者；不服從安排者。

表1 兩組年齡、BMI比較

1.2血清SOD、SA與SAA檢測 分別于入組時采集患者空腹肘靜脈血約5 ml，采用BY-G18型高速離心機(北京白洋醫療器械有限公司)以2 000 r/min轉速，溫度5℃，離心時間10 min，獲得血清，-70℃液氮條件下保存，備用。酶聯免疫吸附法(ELISA)測定血清SOD和SAA水平，比色法測定血清SA水平，本研究使用的試劑盒來自上海廣銳生物科技有限公司。

1.3統計分析 使用SPSS19.0軟件進行χ2檢驗、t檢驗、單因素方差分析，采用Hanley-McNeil方法比較受試者工作特征(ROC)曲線下面積(AUC)。

2 結 果

2.1血清SOD、SA與SAA比較 結直腸癌各TNM分期患者的血清SA和SAA與對照組相比明顯上調(P<0.05)，SOD與對照組相比顯著降低(P<0.05)。見表2。

表2 各組血清指標對比

與對照組相比:1)P<0.05

2.2血清SOD、SA與SAA單獨診斷及聯合診斷價值比較 以血清SOD、SA與SAA作為檢驗變量，有無結直腸癌為狀態標量，以靈敏度為X軸，以特異度為Y軸繪制ROC曲線(見圖1)。

圖1 血清SOD、SA與SAA單項檢測及聯合診斷的ROC曲線

根據ROC曲線可得，血清SOD診斷的臨界值為152.25 U/ml，其對應的靈敏度為70.89%，特異度為84.81%，AUC為0.787(95%CI0.746～0.876)；血清SA診斷的臨界值為420.78 mg/L，其對應的靈敏度為64.56%，特異度為87.34%，AUC為0.745(95%CI0.668～0.823)；血清SAA診斷的臨界值為2.35 mg/L，其對應的靈敏度為79.75%，特異度為77.21%，AUC為0.647(95%CI0.561～0.733)。在最佳臨界切點時，聯合檢測的靈敏度為92.40%，特異度為86.08%，AUC為0.861(95%CI0.802～0.919)。聯合檢測靈敏度顯著高于各指標單獨檢測(P<0.05)，且聯合診斷的AUC顯著高于各項指標單獨檢測(P<0.05)，聯合診斷時，當任一指標為陽性即可確診結直腸癌。

3 討 論

隨著醫學診斷技術的進步與發展，臨床醫護人員對結直腸癌診斷、預后評估等階段進行深層次研究。現階段常用的結直腸癌診斷方法有肛管指診、直腸鏡檢、病理檢查和血清檢查等。其中，肛管指診及直腸鏡檢患者依從性較低，且靈敏度和特異度較低；而病理檢查技術要求苛刻、操作煩瑣且有創傷〔10〕。血清學指標診斷結直腸癌因其方便、快捷且靈敏度和特異度高已成為研究熱點。

血清SOD是機體自身產生的內源酶，可有效消除氧自由基，抑制機體自由基連鎖反應，保護機體免受炎癥或腫瘤的傷害〔11〕。研究發現SOD與多種腫瘤的發生及病情進展或惡化有密切關聯，且結直腸癌等腫瘤的發生、進展與機體氧化應激相關，惡性腫瘤患者機體代謝旺盛，體內自由基異常增多而消耗SOD水平〔12〕。Skrzycki等〔13〕報道稱結直腸癌患者血清SOD較健康人群異常減少，結直腸癌患者血清SOD血清表達水平與癌癥分期、淋巴結轉移、骨轉移、手術根治術及藥物化療緊密相連，對結直腸癌的診斷及預后判斷有重要意義。本研究結果證實血清SOD與結直腸癌發生、進展相關這一觀點。進一步分析其診斷效能，血清SOD診斷結直腸癌敏感度和特異度分別為70.89%和84.81%，其靈敏度較低，分析認為，SOD水平機體炎癥反應、氧化應激反應緊密相連，易造成假陰性而漏判〔12〕。

SA參與構成細胞膜，在機體代謝、生理反應中發揮作用〔6〕。馬瑞敏等〔14〕研究表明，SA具有腫瘤細胞抗原性，與正常細胞癌變、癌細胞轉移、浸潤等緊密聯系，屬于廣譜血清腫瘤標志物。正常人體內血清SA水平很低，但細胞癌變后，在唾液轉移酶及唾液酸化反應作用下，機體SA濃度顯著上升〔15〕。Ferrerbatallé等〔15〕研究顯示，當健康組織細胞損傷或基因突變時，細胞膜表面糖脂分泌增多，血清SA異常提高。SAA是在機體炎癥因子或癌癥壞死因子誘導肝細胞而合成分化的急性時相結構蛋白，其可有效反映機體炎癥程度及癌變情況〔5〕。研究發現〔16〕，SAA在腫瘤患者體內異常增高，其檢測可輔助結直腸癌早期診斷、術后恢復評估，但其靈敏度和特異度相對較低。本研究SA靈敏度、特異度與曹修娥等〔17〕診斷卵巢癌的診斷效能相近，二者診斷效能靈敏度均較低，分析認為血清SA水平與機體炎癥程度亦有關系，癌癥診斷易受到干擾而造成漏判現象〔5〕；血清SAA靈敏度與劉丹等〔18〕研究SAA單獨診斷結直腸癌時比較高，特異度接近，分析認為SAA易受到患者機體免疫反應及炎癥影響，且其在多種腫瘤患者體內均能檢測出來〔16〕。

血清SOD、SA及SAA均是結直腸癌診斷的有效指標，單獨檢測靈敏度和特異度均較低，因此需聯合多種血清腫瘤標志物以提高結直腸癌診斷效能。本研究將血清SOD、SA及SAA三者聯合檢測，只要其中任何一個條件判定為陽性，即可確診為結直腸癌。結果發現，聯合應用的靈敏度顯著高于單獨的血清SOD、SA及SAA診斷效能，且能保持較高的特異度。以組織病理檢測為金標準，聯合診斷的準確度和一致性最高，進一步采用ROC曲線分析發現，三種血清因子聯合診斷的AUC明顯高于各血清指標單獨檢測，具有臨床診斷意義。分析原因，血清SOD、SA及SAA在診斷結直腸癌時，均有部分干擾導致漏判，出現假陰性結果，而三者聯合應用，降低漏判發生概率，提高檢測靈敏度。