ANA及ANA譜聯合檢測在自身免疫性疾病中的應用價值

文/胡麗梅（梧州市紅十字會醫院）

自身免疫性疾病（autoimmune disease,AID）是指機體免疫系統對自身成分的免疫耐受減低或破壞，致使自身抗體和致敏淋巴細胞損傷自身器官組織而引發的疾病。AID 患者的一個共同特征為血清中常存在有多種特異性或相關性自身抗體。因此，自身抗體成為診斷AID 的重要依據，每種自身免疫性疾病都伴隨有其特征的自身抗體譜。抗核抗體（ANA）和可提取的核抗原譜（ANA 譜）檢測至今仍然是臨床自身免疫性疾病診斷應用最多的項目，其在自身免疫性疾病的診斷、治療中具有重要臨床意義[1-3]。本文通過對不同的自身免疫性疾病患者的ANA 和ANA 譜檢測，旨在探討ANA及ANA 譜聯合檢測結果對AID 診療的臨床應用價值。現將結果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2016 年1 月-2019 年2 月醫院診治的AID 患者118 例，入選者均經臨床確診為自身免疫性疾病患者，包括系統性紅斑狼瘡（SLE）35 例，干燥綜合征（SS）27 例，類風濕關節炎（RA）48 例，系統性硬化癥（PSS）8 例，年 齡13-65 歲，平均（33.9±11.7）歲；選取80 例健康體檢者作為對照組，年齡25-67 歲，平均（42.8±7.2）歲，經統計學檢驗各組的一般資料無差異，具有可比性。

1.2 檢測方法

全部受檢者清晨空腹靜脈采血3ml，2小時內離心分離血清，將獲得的血清放置在-18℃冰箱中待測。ANA 檢測采用酶聯免疫ELISA 法，試劑由德國歐蒙公司提供，安圖RT-6000 酶標分析儀判讀；ANA 譜采用免疫印跡法進行檢測，使用儀器為YHLO Tenfly BlotB 型全自動蛋白印跡儀，試劑由YHLO 亞輝龍生物科技公司提供，其生產的ANA 譜試劑可同時檢測17 種不同抗原的IgG 類抗體。每批測定均采用質控物作為對照，相關操作步驟必須嚴格根據有關操作說明完成，標準和質控均符合要求,并判定結果。

1.3 統計分析

采用SPSS11.5 統計學軟件對數據進行統計和處理，計量資料以（±s）表示，比較采用t 檢驗；計數資料以百分率表示，比較采用x2檢驗；以 P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同AID 患者ANN 與ANA 譜檢測結果的敏感性

ANA 和ANA 譜檢測在自身免疫性疾病中的陽性率分別為61.86%和56.78%，明顯高于非自身免疫性疾病患者，與正常對照組相比較，差異具有統計學意義（P<0.05）。而在各AID 病組中，ANA 陽性率在SLE、PSS 比較高,ANA 譜陽性率在SLE 中比較高，ANA 和ANAs 檢測結果僅在SLE 患者中存在相關性（P<0.05）,在其他組中不存在相關性（P>0.05），兩者聯合檢測敏感性大大提高。見表1。

2.2 各組自身免疫性疾病患者血清ANA 譜檢測結果。

各類自身免疫性疾病出現多種自身抗體陽性，SLE 組的dsDNA、Sm、核小體、核糖體P 蛋白、u1-RNP、SS-A/Ro52 抗原的抗體出現陽性率較高，與其他各組比較，差異有統計學意義（P<0.05）；SS 組中的SS-A/Ro60、SSA/Ro52、SS-B 抗原的抗體；PSS 組的抗U1-RNP、抗Scl-70、抗PMScl；RA組的抗U1-RNP與其他各組相比較，差異有統計學意義（P<0.05）。 見表2。

表1 不同AID患者ANN與ANA譜檢測陽性率（%）結果比較

表2 118例AD患者血清ENA抗體譜檢測結果[n(%)]

3 討論

ANA 是一組具有多種細胞核成分的自身抗體，是抗核抗酸和核蛋白抗體的總稱，ANA 可與不同來源的細胞核起反應，因此其器官和種屬特異性不高，對多種自身免疫性疾病均可出現陽性[4]。ANA 譜是可提取性核抗原抗體的總稱，主要包括有17 種自身抗體，本實驗通過118 例AD 患者和80 例健康體檢者ANA 及ANA 譜檢測，研究結果顯示SLE、SS、RA、PSS 組中都有ANA、ANA 譜檢出，ANA 的陽性率為61.86%，ANAs 陽性率為56.78%，聯合檢測陽性率為66.10%，與對照組比較差異具有統計學意義（P<0.05）,對于自身免疫性疾病,ANA 的敏感度較高，ANA 在SLE組中的檢出率最高，達91.43%，其次為SS:81.48%,PSS62.5%,在RA 中也有31.25%的陽性率。與對照組比較差異有統計學意義（P<0.05），但特異度比較差，其不能作為某種AID 的特異性診斷指標，但可起到篩查的作用，一般作為篩查實驗。ANA 譜陽性率低于ANA ,但疾病特異度相對較好，對于AID 鑒別病種有重要意義[5]。從表2中可看出抗dsDNA、抗Sm 對SLE 的陽性率為85.7%和88.6%，敏感性明顯高于其他疾病組，與文獻報道一致。此外，SLE在核小體、組蛋白、核糖體P 蛋白抗原的抗體的檢測特異性也很高，有研究報道，抗核小體抗體對SLE 診斷的敏感性和特異性較高，其與狼瘡腎炎損害有很強的相關性，是SLE 診斷的標志性抗體之一，本次研究結果顯示，抗核小體抗體、抗組蛋白抗體、抗-PO 也可能成為SLE 診斷的標志性抗體，對臨床診斷SLE 有重要意義。

類風濕關節炎（RA）是一種經典的常見的AID,發病機制復雜，在RA 組中以抗SSA、抗Ro52、抗SSB、抗CNEP B、抗核小體抗體檢出率較高，本研究結果顯示，對RA 患者進行ANA 及ANA 譜的檢測，無敏感性和特異性指標，RA 的診斷目前主要依賴于RA 的臨床癥狀，ANA、ANA 譜作為類風濕性疾病的篩查項目，聯合其他自身抗體RF、AKA、抗CCP、抗Sa、抗RA33、抗MCV 進行檢測，可大大提高RA的正確確診率[6]。

綜上所述，自身免疫性疾病發病機制復雜，臨床表現多樣化，ANA 及ANA 譜等自身抗體對其有較高的敏感度和特異度，對AID 患者進行ANA 和ANA 譜聯合檢測，具有結果互相彌補，提高患者檢出率及準確性的優點，同時，根據ANA 譜的不同譜型，更有利于AID 病種的分型、治療、預后判斷，有較好的臨床應用價值，值得廣大臨床醫師運用推廣。