直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法在臨床血液檢驗(yàn)中的敏感性、準(zhǔn)確性分析

宋廣賾

隨著抗菌藥物在臨床上的廣泛使用，使人體細(xì)菌耐藥性不斷提升，因此，在臨床血液檢驗(yàn)中，選擇準(zhǔn)確的檢驗(yàn)方式，以獲得細(xì)菌耐藥性發(fā)展趨勢(shì)相關(guān)數(shù)據(jù)，在指導(dǎo)臨床合理用藥及制定防治策略中具有重要意義[1-3]。常用的臨床血液檢驗(yàn)方法主要經(jīng)過(guò)細(xì)菌培養(yǎng)，進(jìn)行細(xì)菌檢測(cè)及藥敏試驗(yàn)，但該方法所需時(shí)間較長(zhǎng)，不適用于急診患者的臨床治療[4]。直接細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)法屬于臨床血液檢驗(yàn)新興檢測(cè)方法，但臨床對(duì)于直接細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)法的檢測(cè)準(zhǔn)確性、敏感性類報(bào)道鮮少。本次研究，即結(jié)合血液采集樣本，合理探究直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法在臨床血液檢驗(yàn)中的敏感性及準(zhǔn)確性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年6月—2019年6月因發(fā)熱或伴有感染癥狀在我院就診的182例患者進(jìn)行研究，其中，男102例，女80例，年齡20～65歲，平均年齡（42.18±7.22）歲。血液樣本采集后，分為2份，分別進(jìn)行檢測(cè)。按照檢測(cè)方法分組：常規(guī)組（182份血液樣本）采用常規(guī)細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)，觀察組（182份血液樣本）采用直接細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)。排除精神障礙、免疫及血液系統(tǒng)疾病患者。本次研究屬于自愿參與，參與者獲知情權(quán)。

1.2 方法

在無(wú)菌操作下，采集患者空腹靜脈血10 mL冷藏，血液檢驗(yàn)環(huán)節(jié)在血液樣本采集后2 h內(nèi)完成。

觀察組：使用生化自動(dòng)血培養(yǎng)儀對(duì)血培養(yǎng)標(biāo)本進(jìn)行自動(dòng)培養(yǎng)及檢測(cè)，當(dāng)培養(yǎng)儀自動(dòng)報(bào)警時(shí)，提示血液樣本檢測(cè)呈陽(yáng)性，有細(xì)菌生長(zhǎng)；用無(wú)菌注射器快速抽取10 mL陽(yáng)性樣品，注入無(wú)菌試管，以1 500 r/min，離心10 min；收集上清液，以3 000 r/min，離心20 min，保留沉淀物，用無(wú)菌生理鹽水洗滌兩次后收集細(xì)菌懸液，取20 μL懸液涂片，行革蘭染色后鏡檢；如看到革蘭氏陽(yáng)性菌（G+）呈鏈狀，可以水解酪蛋白陳（MH）瓊脂平板聯(lián)合血平板行藥敏試驗(yàn)，并得到結(jié)果制定酶試驗(yàn)方案；稀釋菌液濃度，若細(xì)胞黏液內(nèi)出現(xiàn)一般菌類，可將其直接接種至MH瓊脂平板中，使用無(wú)菌拭子均勻涂抹，隨后貼上藥敏紙片，實(shí)施藥敏試驗(yàn)。

常規(guī)組：將所選血液樣本放置在血平板、巧克力平板中進(jìn)行接種；設(shè)置培育溫度為35℃、二氧化碳濃度為5%，培育時(shí)間為18～24 h；培育完成后，取出菌落圖片，進(jìn)行革蘭染色鏡檢，根據(jù)鏡檢結(jié)果，選擇相應(yīng)觸酶或氧化酶進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；使用生物鑒定儀鑒定細(xì)菌種類并進(jìn)行藥敏試驗(yàn)。

1.3 觀察指標(biāo)

以常規(guī)細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)為“金標(biāo)準(zhǔn)”，常規(guī)組各選取1 415份革蘭氏陰性菌桿菌標(biāo)本，698份革蘭氏陽(yáng)性菌球菌標(biāo)本，觀察組選取1 435份革蘭氏陰性菌桿菌標(biāo)本，685份革蘭氏陽(yáng)性菌球菌標(biāo)本，觀察直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法在臨床血液檢驗(yàn)中的敏感性及準(zhǔn)確性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

以SPSS 20.0軟件分析。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，用例（%）表示。計(jì)量資料兩組之間采用t檢驗(yàn)，兩組以上采用方差分析，用（）表示。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 直接細(xì)菌鑒定的準(zhǔn)確性

常規(guī)組182份血培養(yǎng)標(biāo)本中，經(jīng)常規(guī)組鑒定出革蘭陰性菌桿菌134株，革蘭陽(yáng)性菌球菌18株；觀察組182份血培養(yǎng)標(biāo)本中，鑒定出革蘭陰性菌桿菌129株，革蘭陽(yáng)性菌球菌15株。

常規(guī)組：革蘭陰性桿菌共134株，準(zhǔn)確性為100%（134/134），包括克雷柏桿菌25株、埃希氏菌35株、銅綠假單胞菌22株、大腸桿菌32株、不動(dòng)桿菌14株、變形桿菌6株；革蘭陽(yáng)性球菌共18株，包括葡萄球菌13株、腸球菌5株。觀察組：革蘭陰性桿菌共129株，準(zhǔn)確性為96.27%（129/134），包括克雷柏桿菌25株、埃希氏菌34株、銅綠假單胞菌20株、大腸桿菌30株、不動(dòng)桿菌14株、變形桿菌6株；革蘭陽(yáng)性球菌共14株，準(zhǔn)確性為93.33%（14/15），包括葡萄球菌10株、腸球菌4株。

與常規(guī)組相比，直接細(xì)菌鑒定的準(zhǔn)確性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 兩組檢驗(yàn)方法的敏感性

常規(guī)組：革蘭氏陰性菌桿菌敏感620份、中度敏感265份、耐藥530份，敏感性為62.54%（885/1 415）；革蘭氏陽(yáng)性菌球菌敏感240份、中度敏感68份、耐藥390份，敏感性為44.13%（308/698）。觀察組：革蘭氏陰性菌桿菌敏感640份、中度敏感245份、耐藥550份，敏感性61.67%（885/1 435）；革蘭氏陽(yáng)性菌球菌敏感230份、中度敏感60份、耐藥395份，敏感性42.34%（290/685）。

兩組檢驗(yàn)方法在臨床血液檢驗(yàn)中的敏感性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

3 討論

臨床血液檢驗(yàn)包括血液一般檢測(cè)、溶血性貧血的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)、骨髓細(xì)胞學(xué)檢測(cè)、血型鑒定與交叉配血試驗(yàn)等內(nèi)容，可通過(guò)檢測(cè)人體的血液學(xué)持征，為臨床疾病診斷提供參考[5-7]。現(xiàn)階段，實(shí)驗(yàn)室常見的血液檢驗(yàn)方法較多。本次研究數(shù)據(jù)顯示，直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法在血液樣本檢測(cè)中，對(duì)細(xì)菌的檢驗(yàn)敏感性及準(zhǔn)確性較高，表明，直接細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn)法屬于較優(yōu)秀的血液檢驗(yàn)方法。臨床檢驗(yàn)中，常規(guī)檢驗(yàn)法檢測(cè)陽(yáng)性血液標(biāo)本的數(shù)據(jù)較準(zhǔn)確，但細(xì)菌鑒定速度及藥敏試驗(yàn)結(jié)果報(bào)告較慢，通常，一份完成的檢測(cè)報(bào)告需要耗費(fèi)3～4 d時(shí)間。考慮到臨床部分疾病發(fā)病較急，需要快速確定致病菌種類的情況，常規(guī)法不利于臨床感染性疾病的治療及診斷。本次研究中，觀察組選用生化自動(dòng)血培養(yǎng)儀對(duì)血液樣本進(jìn)行檢測(cè)，在獲得陽(yáng)性樣本后，可直接進(jìn)行細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)。與常規(guī)組相比，直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)省略了分離培養(yǎng)步驟，操作更方便快捷，且結(jié)果準(zhǔn)確性高。采用常規(guī)檢測(cè)法進(jìn)行細(xì)菌鑒定+藥敏試驗(yàn)與直接細(xì)菌鑒+藥敏試驗(yàn)，均具有較高的準(zhǔn)確性[8-9]。還可縮短臨床報(bào)告出具時(shí)間，幫助臨床盡快使用合理抗菌藥物，延緩患者的耐藥性[10-12]。

綜上所述，直接細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)法在臨床血液檢驗(yàn)中，敏感性及準(zhǔn)確性較高，是臨床檢驗(yàn)中較為可靠的檢驗(yàn)方法。