從線粒體穩態失衡探討脾病“脈道不利”所致動脈粥樣硬化的科學內涵?

曹慧敏，宋 囡，賈連群，張會永，呂曉明，陳 寧，陳 絲，楊關林Δ

(1.遼寧中醫藥大學中醫臟象理論及應用教育部重點實驗室，沈陽 110847；2.遼寧省中醫轉化醫學研究中心，沈陽 110847；3.遼寧中醫藥大學附屬醫院血脈病研究室，沈陽 110032)

動脈粥樣硬化(AS)是嚴重危害人類健康的一種疾病，由AS導致的心腦血管疾病目前已成為全球人口死亡的首位原因[1]。中醫認為，脾失健運痰瘀互結脈道不利是動脈粥樣硬化的關鍵病機[2]。“脾病脈道不利”之說出自《素問·太陰陽明論篇》。因“脾病”氣血衰少，脈道不能充盈，導致“脈道不利”。這種病理表現病程較長，逐漸加重，如不能及時糾正，痰濕、瘀血停滯脈道，最終會導致脈道阻塞，出現“脈道不通”，說明脾病“脈道不利”是AS中醫病機的重要理論基礎。線粒體在生理狀態下的結構和功能彼此緊密聯系，構成了線粒體內部穩態。線粒體穩態失衡在AS形成的過程中發揮了重要作用。因此，在“脾-線粒體”相關性理論的指導下[3]，“從脾論治”AS逐漸成為熱點。本文將以線粒體穩態失衡為切入點，以脾病“脈道不利”為理論基礎，概述并試圖闡明AS的中醫病機及演變特點，為中醫藥防治AS提供理論依據，豐富“從脾論治”AS的科學內涵。

1 脾病“脈道不利”之現代解析

脾病“脈道不利”之說出自《素問·太陰陽明論篇》：帝曰：“脾病而四肢不用何也? 岐伯曰：四肢皆稟氣于胃，而不得至經，必因于脾，乃得稟也。今脾病不能為胃行其津液，四肢不得稟水谷氣，氣日以衰，脈道不利，筋骨肌肉，皆無氣以生，故不用焉。”四肢功能正常是因為得到胃中水谷精氣的充養，但水谷精氣不能直達四肢，必須依賴脾氣散精才能到達。如果“脾病”不能為胃輸散精微，四肢不能稟受水谷精微進而“脈道不利”，肌肉失養而不用。《靈樞·經脈》曰：“人始生，先成精，精成而腦髓生，骨為干，脈為營，筋為剛，肉為墻，皮膚堅而毛發長，谷入于胃，脈道以通，血氣乃行。”脈道的主要功能是運行氣血精微輸布全身。氣血正常輸布運行，除心氣推動之外，一個重要的先決條件就是“脈道以通”，如脈道不能貫通則可變生他疾。“脈道不利”泛指血脈運行不暢。因“脾病”氣血衰少，脈道不能充盈，導致“脈道不利”。此種情況氣血尚能循脈流通但運行不暢。上述“脾病”導致“脈道不利”的病機為水谷精氣不足，氣日以衰，脈道不盈或失養。綜合后續醫家之觀點，可將之歸納為脾虛“脈道不利”。

然而以上病理表現病程較長，如若未能及時得以改善且逐漸加重，最終會導致脈道阻塞，出現“脈道不通”。“脈道不通”表現為脈道阻塞，氣血運行受阻，不能循脈流通，為疾病發生的重要病理環節。其一論述百病“風雨寒暑，陰陽喜怒，飲食居處，大驚卒恐”，導致“血氣分離，陰陽破敗，經絡厥絕，脈道不通”而致百病由生(《靈樞·口問》)；其二論述突發疾病，“急虛身中卒至，五臟絕閉，脈道不通，氣不往來，譬如墮溺，不可為期”(《素問·玉機真藏論篇》)。“脈道不通”則與“脾實”關系密切。《圣濟總錄·脾藏門》載有脾虛、脾實專篇論述[4]。脾實、邪氣盛實壅滯于脾，多由飲食停滯，或濕熱困脾，或瘀血停積所致[5]。《素問·太陰陽明論篇》所述脾病“脈道不利”當為脾虛，因脾虛氣日以衰，脈道不盈，失其充養而致脈道不利。而脾實邪氣內盛，痰濕、瘀血停滯脈道，亦可導致脈道不利。

由此可見，脾病“脈道不利”可以理解為“脾虛脈道不利”及“脾實脈道不通”兩層含義，體現了中醫病機的演變特點及規律，對中醫藥防治疾病奠定了一定的理論基礎。

2 “脾失健運，脈道不利”是AS的關鍵病機

中醫對AS的認識早在《黃帝內經》時期就有所記載。《素問·痹論篇》云：“心痹者，脈不通，煩則心下鼓，暴上氣而喘”，提出“脈道不利”是AS的主要病機。張景岳在《景岳全書·雜證漠·痰飲》中說：“水谷……隨食隨化，皆成血氣，焉得留而為痰？惟其不能盡化，而十留一二，則一二為痰矣；十留三四，則三四為痰矣。[6]”關于AS的病因病機，中醫認為飲食失宜，嗜食肥甘厚味，損傷脾胃，運化不利，或脾虛無力運化，以致水谷難以隨食隨化，日久為痰為瘀，脈道不利而為病。張會永[2]等強調血脂是由水谷化生，并依賴脾的轉輸功能布散周身。脾失健運，不能將多余脂質運化，積存在血脈之中而致血脂異常，即內生之痰濁，阻礙脈道氣血運行，導致“脈道不利”，較為形象地從現代醫學的角度解讀AS的中醫病機，即脾失健運脂質代謝異常是導致早期動脈粥樣硬化病理變化的主要因素。以上內容均說明“脾失健運，脈道不利”是AS的關鍵病機，與上述闡明的脾病“脈道不利”內涵相符合。

針對AS的中醫病機特點，在脾病“脈道不利”理論的指導下，臨床“從脾論治”AS則成為熱點并采用健脾益氣中藥干預AS已取得良好效果。田蔚然[7]等運用健脾通脈湯能明顯降低頸動脈斑塊患者的C積分，并改善其中醫臨床證候。曾國安[8]等發現，黃芪主要活性成分黃芪多糖具有抗氧化、調節免疫的作用，進而起到保護血管內皮細胞、改善動脈粥樣硬化的作用。凌露等[9]通過體外實驗發現，人參皂苷R1通過促進血清剝奪誘導的R 264.7巨噬細胞自噬，發揮抗凋亡抗AS的作用。課題組前期研究發現[10-11]，“從脾論治”脾虛痰濁AS巴馬小型豬，益氣健脾法可以影響模型小豬血脂的變化，并抑制其AS的形成。

3 脾失健運所致線粒體穩態失衡是AS的重要機制

3.1 “脾病-脾失健運”與線粒體穩態失衡

“脾主運化”是脾的主要生理功能。《素問·經脈別論篇》：“飲入于胃，游溢精氣，上輸于脾，脾氣散精，上歸于肺”，說明脾氣充足則脾胃生化有源，水谷精微充盛，濡養臟腑，血液充沛，脈道通暢。線粒體的主要功能是產生能量以供給機體的正常生命活動。可見，“脾主運化”與線粒體的功能特征頗為相似。劉友章針對“脾-線粒體”相關理論的提出，使得二者之間的密切關系更為明確。他認為脾主運化不僅僅是指食物在消化道的消化吸收(外運化)，更重要的是指營養物質在體內的氧化磷酸化過程(內運化)，并形成“脾主運化”的“內運化”學說[3]。線粒體亦被稱為細胞的動力室，其最重要的功能是通過氧化磷酸化反應產生ATP，為生命體提供能量。線粒體在生理狀態下的結構和功能彼此緊密聯系，構成了線粒體內部穩態。線粒體生物合成異常直接導致線粒體功能障礙，可以直接影響細胞內新陳代謝狀態而導致疾病的發生[12]。隨著線粒體生物學的發展，線粒體在促進機體能量代謝、參與細胞固有凋亡等生物事件中的重要作用得到了廣泛認可。線粒體雙側膜結構對溶質具有選擇通透性，且內膜向內側彎曲褶皺形成線粒體嵴，為嘧啶、血紅素合成以及尿素循環等多種生化反應提供主要場所。當線粒體內環境改變，首先出現ATP生成的不足，促使機體能量供給的缺乏，與中醫脾失健運不能運化水谷而濡養周身之理論極為相似。然而隨著線粒體能量的不斷變化，呼吸鏈電子傳遞功能紊亂，將會產生大量活性氧物質(reactive oxygenspecies，ROS)，這些病理產物的產生過程，與中醫所提及的“脾失健運，痰瘀互結”亦存在密切關系。研究發現，脾虛狀態下胃腸黏膜細胞線粒體數量明顯減少，且伴隨線粒體腫脹、嵴膜損傷等病理改變[13-14]。課題組前期發現，脾虛模型大鼠線粒體呼吸鏈酶復合物活性與ATP水平降低[15-16]，提示脾失健運是線粒體穩態失衡的中醫病機。

3.2 脾病“脈道不利”-線粒體穩態失衡與AS

目前大量研究表明，線粒體穩態失衡所致能量代謝異常及ROS誘導氧化應激、自噬及凋亡等機制的發生，與AS的發生發展關系密切。由此可以看出，線粒體穩態失衡是一個動態變化的過程，在一定程度體現了中醫由脾虛“脈道不利”到脾實“脈道不通”的病機演變的分子生物學機制。熊詩強[17]等發現，給予ApoE-/-小鼠辣椒素干預后能夠激活PKA/UCP2通路，進而提高線粒體呼吸功能，減少線粒體ROS生成，減輕冠狀動脈粥樣硬化病變。張治業[18]等發現，多肽LL-37與線粒體DNA形成的復合物(LL-37-DNA)，是介導或促進人動脈粥樣硬化疾病發病的主要原因。

課題組前期研究發現，ox-LDL誘導的血管內皮細胞出現線粒體膜電位及呼吸鏈復合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ酶活性下降，給予健脾益氣中藥干預后，上述變化趨勢得以糾正[19]；另外發現，動脈粥樣硬化模型小鼠主動脈線粒體能量代謝相關基因均發生了明顯變化，并且mTOR、ULK1等自噬相關蛋白表達出現異常，中藥絞股藍具有健脾益氣之功效，其主要有效成分絞股藍總甙干預后，使上述結果得以明顯改善[20]。健脾化瘀祛痰法可以通過改善呼吸鏈復合物酶活性及線粒體自噬，減輕AS家兔肝臟脂質沉積情況[21]。

綜上，線粒體穩態失衡的起始環節是線粒體能量代謝異常，主要表現為ATP生成的不足，其對AS的影響與中醫脾虛“脈道不利”極為相似。與此同時，隨著線粒體能量的不斷變化，呼吸鏈電子傳遞功能紊亂，機體出現產生大量活性氧物質ROS，誘發氧化應激、自噬、凋亡等生物過程的發生，導致AS的形成及發展。這一變化過程又與脾實“脈道不通”頗為相似。然而線粒體作為真核生物的能量站，對于細胞內能量需求増加起到的重要反饋和補償生物效應，線粒體穩態的維持涉及到線粒體形態、線粒體重量、線粒體數量等多方面，涉及到細胞器合成和退化的一系列分子反應，其與中醫理論的準確結合有待進一步的深入探討。