大黃酚抑制自噬改善HIBI新生大鼠腦組織病理損傷和炎癥反應(yīng)①

邴小三 望燕妮 趙 申 肖惠玲 黃亞萍

(湖北文理學(xué)院附屬襄陽市中心醫(yī)院兒科，襄陽 441000)

缺氧缺血性腦損傷(Hypoxic-ischemic brain injury,HIBI)是圍產(chǎn)期常見的腦損傷形式，是導(dǎo)致新生兒和兒童死亡的主要原因，也可導(dǎo)致終身的神經(jīng)功能損害，如認(rèn)知和記憶障礙、腦癱和癲癇等[1,2]。新生兒窒息是導(dǎo)致HIBI最常見的原因，它導(dǎo)致了臟器的缺血和再灌注行為，從而致使機(jī)體重要器官發(fā)生缺氧缺血性損傷[3]。缺氧缺血引發(fā)的炎癥是導(dǎo)致大腦損傷的關(guān)鍵因素，增加了后期神經(jīng)疾病的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，因此，減輕炎癥對大腦的病理損傷成為改善HIBI的方法之一[4]。大黃(Rhubarb)具有廣泛的生物學(xué)活性，包括治療發(fā)熱、腹瀉和中毒，蒽醌類化合物是其主要活性成分，大黃酚(Chrysophanol,CP)是蒽醌類化合物的一種，已被證實(shí)具有多種功能，包括抗氧化應(yīng)激、神經(jīng)保護(hù)、抗癌等，而大黃酚發(fā)揮生物活性與其強(qiáng)大的抗炎作用相關(guān)[5-10]。但尚未見大黃酚對HIBI中炎癥水平的作用報(bào)道，因此，本文采用改良的Rice法建立HIBI新生大鼠模型，研究大黃酚對模型大鼠腦組織病理損傷和炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用及其可能機(jī)制。

1 材料與方法

1.1材料

1.1.1主要試劑 大黃酚(純度≥98 %，貨號(hào)：01542)購自美國SIGMA公司；尼莫地平(30 mg/片，國藥準(zhǔn)字H37022796，批號(hào)：20171026)購自天津市中央藥業(yè)有限公司；雷帕霉素(Rapamycin,RAP)(貨號(hào)：S1039)購自Selleck公司；LC3Ⅱ、Beclin1、P62/SQSTM1、Bcl-2、Bax、p-mTOR、mTOR、p-p70S6K和β-actin抗體(貨號(hào)：bs-2912R、bs-1353R、bs-2951R、bs-4563R、bs-0127R、bs-3495R、bs-1992R、bs-1426R和bs-0061R)購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司；TNF-α、 IL-4、IL-10和iNOS試劑盒(貨號(hào)：F26260、F3742、F3745和F01544)購自上海西唐生物科技有限公司。

1.1.2主要儀器 QuantStudio3熒光定量PCR儀，美國ThermoFisher公司(美國)；SMART行為視頻記錄和分析系統(tǒng)，東樂自然基因生命科學(xué)公司(西班牙)；……