楊 玉 王 艷 姜晶晶 段強軍 邵 菁 汪天明 汪長中
(安徽中醫藥大學,合肥 230012)
炎癥小體(Inflammasome)是一類由胞漿內模式識別受體(Pattern recognition receptors,PRRs)參與組裝的多蛋白復合體,在感染性疾病、自身免疫性疾病、炎癥性疾病等多種疾病中扮演著重要的角色。其中,NLRP3炎癥小體是迄今為止結構和功能研究得最為明確的炎癥小體,其在抗感染天然免疫中的作用近年來受到高度關注[1,2]。
外陰陰道念珠菌病(Vulvovaginal candidiasis,VVC)是女性生殖道中最常見的真菌感染性疾病。最新研究表明,VVC時,白念珠菌與巨噬細胞相互作用,通過TLR4/NF-κB通路激活NLRP3炎癥小體,產生過量的炎癥因子IL-1β和IL-18,造成陰道黏膜免疫炎癥性損傷。因此,NLRP3炎癥小體被認為是治療VVC的一個重要靶標[3]。研究顯示,許多中藥對NLRP3炎癥小體的活化具有調節作用[4],本課題組近年來致力于中藥抗VVC研究,發現中藥復方白頭翁湯正丁醇提取物對VVC模型小鼠有顯著的治療作用[5]。鹽酸小檗堿是白頭翁湯正丁醇提取物中含量最多的有效成分[6],但鹽酸小檗堿能否對VVC時的NLRP3炎癥小體發揮抑制作用?本實驗擬觀察鹽酸小檗堿對白念珠菌刺激下巨噬細胞NLRP3炎癥小體及TLR4/NF-κB通路的影響,從炎癥小體角度闡明白頭翁湯正丁醇提取物抗VVC的作用機制。
1.1材料 人單核細胞白血病細胞(THP-1細胞)購自中國科學研究院上海細胞庫;白念珠菌標準株SC5314由解放軍第二軍醫大學姜遠英教授提供;FITC-小鼠抗人CD68抗體,批號:11-0689-41購自invitrogen公司;鹽酸小檗堿,批號:MUST-18081510購自成都曼斯特生物科技有限公司;Cell Counting Kit-8(CCK-8),批號:ATSFE1401購自Abbkine公司;……