B7-H3在類風濕關節炎中的研究進展

劉文亞 朱紅勝 嚴茹紅

1.南京醫科大學附屬蘇州醫院檢驗科，江蘇蘇州 215001；2.南京醫科大學附屬蘇州科技城醫院檢驗科，江蘇蘇州 215153

類風濕關節炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種病因未明的慢性炎癥，主要累及關節滑膜，臨床表現有關節腫脹、疼痛、僵硬、畸形、活動困難等，可能與遺傳、感染及內分泌等因素有關[1]。

B7-CD28家族作為重要的協同刺激分子，參與T細胞活化的雙信號途徑，在細胞免疫中發揮不可或缺的作用。目前B7家族包括10個成員，分別為 B7-H7（HHLA2）、B7-H6（NCR3LG1）、B7-H5（VISTA）、B7-H4（ B7S1，B7x，VTCN1）、CD276（B7-H3）、CD275（ICOS-L，B7-H2）、CD274（PDL1，B7-H1）、CD273（PD-L2，B7-DC ）、CD80（B7-1）和CD86（B7-2）[2-3]。研究發現， B7-H3參與腫瘤的增殖、侵襲和轉移，被認為是一種新的腫瘤標志物[4-5]。同時，B7-H3在免疫應答中發揮重要的監視作用，可能成為治療自身免疫性疾病的靶點[6-8]。本文就B7-H3的結構、表達、功能、在類風濕關節炎的發病機制中的研究等方面進行綜述。

1 B7-H3的結構

2001年，B7-H3由Chapoval等[9]在人類樹突狀細胞cDNA文庫中發現，B7-H3（CD276）是典型的Ⅰ型跨膜蛋白分子，屬于免疫球蛋白超家族。B7-H3編碼的蛋白結構含有316個氨基酸，包含氨基端的一段信號肽、一段跨膜蛋白區、一段胞質尾區、一段胞外免疫球蛋白樣可變區（IgV）和恒定區（IgC）。在氨基酸序列上，B7-H3與B7家族的其他成員在胞外域受體結合區有一定的同源性，分別是B7-H3與B7-H1有 27%的同源性、B7-H3與B7-H2有25%的同源性、 B7-H3與B7-1有 21%的同源性、B7-H3與B7-2有20%的同源性。B7-H3的亞型由B7-H3a（2IgB7-H3）和B7-H3b（4IgB7-H3）組成，B7-H3a（2IgB7-H3）由IgV-IgC組成，B7-H3b（4IgB7-H3）由IgV-IgC-IgV-IgC組成，4IgB7-H3主要存在于人類細胞，而2IgB7-H3主要存在于人類和小鼠細胞[10-11]。研究發現，狗、豬、母牛等哺乳動物表達4Ig-B7-H3，而魚綱、兩棲類和鳥綱則表達2Ig-B7-H3[12]。鼠B7-H3分子和人B7-H3分子分別位于9號染色體和15號染色體，鼠B7-H3同B7家族的其他成員有20% ～ 30%的同源性，鼠B7-H3與人B7-H3的氨基酸結構有88%的相似性[12]。

2 B7-H3的表達

B7-H3具有可溶性和膜型兩種形式。可溶性B7-H3（sB7-H3）通過裂解細胞表面的基質金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）而形成[13]。研究發現，B7-H3被一個4.1kb的mRNA所編碼[9]。在肝臟、心臟、胎盤、前列腺等組織中，人類B7-H3 mRNA高表達，而人類B7-H3 mRNA在腦、骨骼肌、腎臟、肺臟呈低表達。B7-H3在外周血白細胞不表達，但是B7-H3在脾、淋巴結、骨髓和胸腺等淋巴器官中均有表達。B7-H3mRNA在多種腫瘤細胞株不表達，如淋巴細胞白血病Molt-4、急性早幼粒細胞白血病HL-60、伯基特淋巴瘤Raji。同時B7-H3 mRNA也在多種腫瘤細胞株表達，包括宮頸腺癌Hela S3、黑色素瘤 G361、肝癌 SK-HEP-l、結腸癌 SW480、肺癌A549和慢性髓系白血病K562。相比B7-H3 mRNA的廣泛表達，B7-H3在蛋白水平表達很局限，僅表達在肝臟、肺臟、膀胱、睪丸、前列腺、乳腺、胎盤和淋巴器官[9，11，14-15]。B7-H3 分子在 mRNA 的廣泛表達而在蛋白水平表達局限，說明可能與其轉錄后調控機制有關[9]。

3 B7-H3的功能

B7-H3在免疫調控中發揮重要的作用，同時參與了腫瘤的增殖、侵襲和轉移[4-5]。早期研究發現B7-H3具有協同刺激和協同抑制的雙重作用[3]。有研究發現，B7-H3不僅促進CD4+、CD8+T 細胞的增殖，還促進細胞毒性T淋巴細胞的產生，并且刺激干擾素（IFN-γ）的產生[9]。然而，還有研究表明，B7-H3對T細胞的活化和增殖及細胞因子的產生具有抑制作用[16-19]。研究表明，B7-H3在Th1介導的免疫反應中起負調控作用，通過抑制主要轉錄因子的活性包括激活的T細胞的核因子（nuclear factor of activated T cells，NFAT）、激活蛋白 1（activator protein 1，AP-1）和核因子Kappa-B（NF-κB）來調節T細胞的功能[20-22]。同時，B7-H3作為協同抑制分子，抑制T細胞的活化及細胞因子IL-2的產生[15]。

4 B7-H3在類風濕關節炎的研究

類風濕關節炎是一種常見的自身免疫性疾病，主要表現有關節腫脹、疼痛、僵硬、畸形、活動困難等，對患者的心理造成了極大的負擔。在類風濕關節炎患者中，主要受影響的是滑膜和軟骨細胞[1]，滑膜環境由許多細胞類型組成，如CD4+T細胞、B細胞、單核細胞、巨噬細胞和成纖維細胞樣滑膜細胞。

血管生成在類風濕滑膜炎中發揮關鍵作用，而血管內皮生長因子（vascular endothelial growth factor ，VEGF）是RA血管生成的主要促血管生成因子，并且VEGF與疾病的嚴重程度有關[23-24]。Lai等[25]研究表明，B7-H3通過增加VEGF的分泌促進內皮細胞的血管生成，從而參與RA的發病機制。先前的研究表明，成纖維細胞樣滑膜細胞是侵犯關節軟骨的關鍵細胞[26-28]。Tran等[29]研究發現，B7-H3表達于類風濕關節炎患者滑膜組織內的成纖維樣滑膜細胞，主要呈4Ig亞型形式，并且B7-H3對成纖維細胞樣滑膜細胞和T細胞的相互作用取決于T細胞的活化狀態。Guo等[30]研究發現，類風濕關節炎滑膜組織內有B7-H3陽性細胞，B7-H3+細胞主要為 CD68+巨噬細胞、CD31+內皮細胞及 CK-18+上皮細胞，提示B7-H3有可能參與并調節關節炎的病理進程。此外，研究表明，在類風濕關節炎患者活動期，滑膜腔液的單核細胞被活化，活化的單核細胞可以特異性刺激Th17的產生[31]。Yoon等發現滑膜單核細胞可以促進CD4+T細胞的Th1反應以及Th17反應，同時，類風濕關節炎患者滑膜單核細胞主要表達B7-H3的4Ig亞型[32-33]。孫靜等[34]發現類風濕關節炎患者外周血單核細胞B7-H3高表達，同時，B7-H3與類風濕因子、腫脹關節數、壓痛關節數、疾病的分期、病程的長短、疾病活動度評分28（DSA28）顯著相關，提示B7-H3的高表達可能誘導單核細胞遷移、活化，繼而參與類風濕關節炎疾病的進程。

孫靜等[35]從基因層面對類風濕關節炎的發病機制進行分析。通過體外直接測序法發現B7-H3基因存在的單核苷酸多態性（single nucleotide polymorphism，SNP）位點，再結合序列特異性引物聚合酶鏈反應（SSP-PCR）檢測出6個位點的SNP，提示B7-H3與類風濕關節炎的發生相關[35]。還有研究表明，新的B7-H3-TACT多態性變異與類風濕關節炎的發生有關[36]。

5 總結與展望

越來越多的研究證實 B7-H3參與類風濕關節炎的發病機制，并且B7-H3與類風濕因子、腫脹關節數、壓痛關節數、疾病的分期、病程的長短、疾病活動度評分28（DSA28）顯著相關，B7-H3已顯示出作為免疫治療靶標的巨大潛力。然而，現有研究對 B7-H3 在類風濕關節炎中的相關信號通路尚未完全闡明，需要進行更深的研究，將為B7-H3 的免疫靶向療法提供新的方向。