B7-H3在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的研究進(jìn)展

劉文亞 朱紅勝 嚴(yán)茹紅

1.南京醫(yī)科大學(xué)附屬蘇州醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇蘇州 215001；2.南京醫(yī)科大學(xué)附屬蘇州科技城醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇蘇州 215153

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）是一種病因未明的慢性炎癥，主要累及關(guān)節(jié)滑膜，臨床表現(xiàn)有關(guān)節(jié)腫脹、疼痛、僵硬、畸形、活動(dòng)困難等，可能與遺傳、感染及內(nèi)分泌等因素有關(guān)[1]。

B7-CD28家族作為重要的協(xié)同刺激分子，參與T細(xì)胞活化的雙信號(hào)途徑，在細(xì)胞免疫中發(fā)揮不可或缺的作用。目前B7家族包括10個(gè)成員，分別為 B7-H7（HHLA2）、B7-H6（NCR3LG1）、B7-H5（VISTA）、B7-H4（ B7S1，B7x，VTCN1）、CD276（B7-H3）、CD275（ICOS-L，B7-H2）、CD274（PDL1，B7-H1）、CD273（PD-L2，B7-DC ）、CD80（B7-1）和CD86（B7-2）[2-3]。研究發(fā)現(xiàn)， B7-H3參與腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移，被認(rèn)為是一種新的腫瘤標(biāo)志物[4-5]。同時(shí)，B7-H3在免疫應(yīng)答中發(fā)揮重要的監(jiān)視作用，可能成為治療自身免疫性疾病的靶點(diǎn)[6-8]。本文就B7-H3的結(jié)構(gòu)、表達(dá)、功能、在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制中的研究等方面進(jìn)行綜述。

1 B7-H3的結(jié)構(gòu)

2001年，B7-H3由Chapoval等[9]在人類樹(shù)突狀細(xì)胞cDNA文庫(kù)中發(fā)現(xiàn)，B7-H3（CD276）是典型的Ⅰ型跨膜蛋白分子，屬于免疫球蛋白超家族。B7-H3編碼的蛋白結(jié)構(gòu)含有316個(gè)氨基酸，包含氨基端的一段信號(hào)肽、一段跨膜蛋白區(qū)、一段胞質(zhì)尾區(qū)、一段胞外免疫球蛋白樣可變區(qū)（IgV）和恒定區(qū)（IgC）。在氨基酸序列上，B7-H3與B7家族的其他成員在胞外域受體結(jié)合區(qū)有一定的同源性，分別是B7-H3與B7-H1有 27%的同源性、B7-H3與B7-H2有25%的同源性、 B7-H3與B7-1有 21%的同源性、B7-H3與B7-2有20%的同源性。B7-H3的亞型由B7-H3a（2IgB7-H3）和B7-H3b（4IgB7-H3）組成，B7-H3a（2IgB7-H3）由IgV-IgC組成，B7-H3b（4IgB7-H3）由IgV-IgC-IgV-IgC組成，4IgB7-H3主要存在于人類細(xì)胞，而2IgB7-H3主要存在于人類和小鼠細(xì)胞[10-11]。研究發(fā)現(xiàn)，狗、豬、母牛等哺乳動(dòng)物表達(dá)4Ig-B7-H3，而魚(yú)綱、兩棲類和鳥(niǎo)綱則表達(dá)2Ig-B7-H3[12]。鼠B7-H3分子和人B7-H3分子分別位于9號(hào)染色體和15號(hào)染色體，鼠B7-H3同B7家族的其他成員有20% ～ 30%的同源性，鼠B7-H3與人B7-H3的氨基酸結(jié)構(gòu)有88%的相似性[12]。

2 B7-H3的表達(dá)

B7-H3具有可溶性和膜型兩種形式。可溶性B7-H3（sB7-H3）通過(guò)裂解細(xì)胞表面的基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）而形成[13]。研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3被一個(gè)4.1kb的mRNA所編碼[9]。在肝臟、心臟、胎盤(pán)、前列腺等組織中，人類B7-H3 mRNA高表達(dá)，而人類B7-H3 mRNA在腦、骨骼肌、腎臟、肺臟呈低表達(dá)。B7-H3在外周血白細(xì)胞不表達(dá)，但是B7-H3在脾、淋巴結(jié)、骨髓和胸腺等淋巴器官中均有表達(dá)。B7-H3mRNA在多種腫瘤細(xì)胞株不表達(dá)，如淋巴細(xì)胞白血病Molt-4、急性早幼粒細(xì)胞白血病HL-60、伯基特淋巴瘤Raji。同時(shí)B7-H3 mRNA也在多種腫瘤細(xì)胞株表達(dá)，包括宮頸腺癌Hela S3、黑色素瘤 G361、肝癌 SK-HEP-l、結(jié)腸癌 SW480、肺癌A549和慢性髓系白血病K562。相比B7-H3 mRNA的廣泛表達(dá)，B7-H3在蛋白水平表達(dá)很局限，僅表達(dá)在肝臟、肺臟、膀胱、睪丸、前列腺、乳腺、胎盤(pán)和淋巴器官[9，11，14-15]。B7-H3 分子在 mRNA 的廣泛表達(dá)而在蛋白水平表達(dá)局限，說(shuō)明可能與其轉(zhuǎn)錄后調(diào)控機(jī)制有關(guān)[9]。

3 B7-H3的功能

B7-H3在免疫調(diào)控中發(fā)揮重要的作用，同時(shí)參與了腫瘤的增殖、侵襲和轉(zhuǎn)移[4-5]。早期研究發(fā)現(xiàn)B7-H3具有協(xié)同刺激和協(xié)同抑制的雙重作用[3]。有研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3不僅促進(jìn)CD4+、CD8+T 細(xì)胞的增殖，還促進(jìn)細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞的產(chǎn)生，并且刺激干擾素（IFN-γ）的產(chǎn)生[9]。然而，還有研究表明，B7-H3對(duì)T細(xì)胞的活化和增殖及細(xì)胞因子的產(chǎn)生具有抑制作用[16-19]。研究表明，B7-H3在Th1介導(dǎo)的免疫反應(yīng)中起負(fù)調(diào)控作用，通過(guò)抑制主要轉(zhuǎn)錄因子的活性包括激活的T細(xì)胞的核因子（nuclear factor of activated T cells，NFAT）、激活蛋白 1（activator protein 1，AP-1）和核因子Kappa-B（NF-κB）來(lái)調(diào)節(jié)T細(xì)胞的功能[20-22]。同時(shí)，B7-H3作為協(xié)同抑制分子，抑制T細(xì)胞的活化及細(xì)胞因子IL-2的產(chǎn)生[15]。

4 B7-H3在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的研究

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎是一種常見(jiàn)的自身免疫性疾病，主要表現(xiàn)有關(guān)節(jié)腫脹、疼痛、僵硬、畸形、活動(dòng)困難等，對(duì)患者的心理造成了極大的負(fù)擔(dān)。在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者中，主要受影響的是滑膜和軟骨細(xì)胞[1]，滑膜環(huán)境由許多細(xì)胞類型組成，如CD4+T細(xì)胞、B細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞。

血管生成在類風(fēng)濕滑膜炎中發(fā)揮關(guān)鍵作用，而血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor ，VEGF）是RA血管生成的主要促血管生成因子，并且VEGF與疾病的嚴(yán)重程度有關(guān)[23-24]。Lai等[25]研究表明，B7-H3通過(guò)增加VEGF的分泌促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的血管生成，從而參與RA的發(fā)病機(jī)制。先前的研究表明，成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞是侵犯關(guān)節(jié)軟骨的關(guān)鍵細(xì)胞[26-28]。Tran等[29]研究發(fā)現(xiàn)，B7-H3表達(dá)于類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者滑膜組織內(nèi)的成纖維樣滑膜細(xì)胞，主要呈4Ig亞型形式，并且B7-H3對(duì)成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞和T細(xì)胞的相互作用取決于T細(xì)胞的活化狀態(tài)。Guo等[30]研究發(fā)現(xiàn)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜組織內(nèi)有B7-H3陽(yáng)性細(xì)胞，B7-H3+細(xì)胞主要為 CD68+巨噬細(xì)胞、CD31+內(nèi)皮細(xì)胞及 CK-18+上皮細(xì)胞，提示B7-H3有可能參與并調(diào)節(jié)關(guān)節(jié)炎的病理進(jìn)程。此外，研究表明，在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者活動(dòng)期，滑膜腔液的單核細(xì)胞被活化，活化的單核細(xì)胞可以特異性刺激Th17的產(chǎn)生[31]。Yoon等發(fā)現(xiàn)滑膜單核細(xì)胞可以促進(jìn)CD4+T細(xì)胞的Th1反應(yīng)以及Th17反應(yīng)，同時(shí)，類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者滑膜單核細(xì)胞主要表達(dá)B7-H3的4Ig亞型[32-33]。孫靜等[34]發(fā)現(xiàn)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血單核細(xì)胞B7-H3高表達(dá)，同時(shí)，B7-H3與類風(fēng)濕因子、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)、壓痛關(guān)節(jié)數(shù)、疾病的分期、病程的長(zhǎng)短、疾病活動(dòng)度評(píng)分28（DSA28）顯著相關(guān)，提示B7-H3的高表達(dá)可能誘導(dǎo)單核細(xì)胞遷移、活化，繼而參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病的進(jìn)程。

孫靜等[35]從基因?qū)用鎸?duì)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行分析。通過(guò)體外直接測(cè)序法發(fā)現(xiàn)B7-H3基因存在的單核苷酸多態(tài)性（single nucleotide polymorphism，SNP）位點(diǎn)，再結(jié)合序列特異性引物聚合酶鏈反應(yīng)（SSP-PCR）檢測(cè)出6個(gè)位點(diǎn)的SNP，提示B7-H3與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生相關(guān)[35]。還有研究表明，新的B7-H3-TACT多態(tài)性變異與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)生有關(guān)[36]。

5 總結(jié)與展望

越來(lái)越多的研究證實(shí) B7-H3參與類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制，并且B7-H3與類風(fēng)濕因子、腫脹關(guān)節(jié)數(shù)、壓痛關(guān)節(jié)數(shù)、疾病的分期、病程的長(zhǎng)短、疾病活動(dòng)度評(píng)分28（DSA28）顯著相關(guān)，B7-H3已顯示出作為免疫治療靶標(biāo)的巨大潛力。然而，現(xiàn)有研究對(duì) B7-H3 在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎中的相關(guān)信號(hào)通路尚未完全闡明，需要進(jìn)行更深的研究，將為B7-H3 的免疫靶向療法提供新的方向。