一株西藏綿羊鏈球菌的分離與鑒定

達娃卓瑪

（西藏自治區拉薩市堆龍德慶區獸醫站，西藏 拉薩 851400）

羊鏈球菌病（Streptococcusovis）又稱為羊敗血性鏈球菌病，是危害綿羊、山羊的嚴重疫病，廣泛分布于我國多個省市[1]。但由于不同地區流行的血清型不同，各血清之間相互免疫能力不強等特點[2],羊鏈球菌時有發生。

2018年4月，西藏某村綿羊出現發熱，精神沉郁，后期出現了食欲廢絕，呼吸困難，下頜淋巴結、最終死亡。

1 材料與方法

1.1 病料

2018年4月，西藏某村采集疑似羊鏈球菌病料：肺臟、肝臟、脾臟和淋巴結，保存至-20℃，待檢。

1.2 主要試劑

氨芐西林、青霉素、頭孢氨芐、氧氟沙星、環丙沙星、諾氟沙星、頭孢唑啉、新霉素、多西環素、慶大霉素、卡那霉素等 11 種抗菌藥物均購自杭州微生物試劑有限公司。

1.3 細菌的分離培養及純培養

將肺臟、肝臟、脾臟和淋巴結接種于血平板上，置37 ℃培養箱中培養18 h；挑取疑似的單個菌落進行細菌純培養。

1.4 染色鏡檢

將純培養后的單個菌落涂在干凈的載玻片上進行干燥固定后細菌革蘭氏染色，鏡檢。

1.5 生化試驗

挑取菌落接種于葡萄糖、乳糖、麥芽糖、果糖、山梨醇、甘露醇），精氨酸、七葉苷、V-P、還原硝酸鹽等生化培養基上進行細菌鑒定。

1.6 藥敏試驗

用滅菌涂棒將培養的菌液均勻涂布于血平板上，藥敏紙片貼壓于血平板上，37 ℃培養24 h，觀察結果。

2 結果與分析

2.1 細菌的分離培養

從肝臟中分離出1株大小一致透明、淡灰色圓形小菌落。

2.2 染色鏡檢

對純化后的菌落進行革蘭染色，鏡檢，分離菌株呈藍紫色，為 圓形或卵圓形，排列成長鏈狀或成對排列（見圖 1）。

圖1 細菌染色結果

2.3 生化試驗結果

與相關教材進行比對，其生化特性與牛摩拉菌的生化特性基本一致（見表1），初步確定該菌為牛摩拉菌。

表1 生化特性

2.4 藥敏試驗

選用 11種獸醫臨床中常用的抗菌藥物，采用K-B紙片法進行耐藥檢測。結果顯示，分離菌株對所選用的抗菌藥物有不同程度的耐藥現象（見表2）。

表2 藥敏試驗判定標準

3 討論

羊鏈球菌病在西藏地區已經有相關報道[3-4]，本試驗從西藏地區某村病死綿羊體內分離到一株革蘭氏陽性球菌，經臨床癥狀及實驗室診斷為羊鏈球菌。

本次分離的菌株對常用抗菌藥物存在一定的耐藥性現象。其中頭孢氨芐、頭孢唑啉、青霉素、新霉素和多西環素產生耐藥，對氨芐西林、慶大霉素、卡那霉素中介，對氧氟沙星、環丙沙星和諾氟沙星敏感。可見西藏綿羊鏈球菌耐藥性較為嚴重，可能該地區飼養綿羊過程中存在抗生素使用不當的現象，因此，需要大力宣傳抗生素耐藥相關專業知識，讓農戶掌握合理使用抗菌藥物方法，大幅提升知曉率。