貴州原發性高血壓人群相關藥物基因多態性研究*

任凌雁，靳 倩，廖 喆，袁 露，令狐克燕，李安潔，駱姝琳

(貴州省人民醫院檢驗科，貴陽 550002)

原發性高血壓是一種多基因遺傳疾病，由環境因素和遺傳因素共同決定，其中遺傳因素對個體血壓變化的影響占所有影響因素的30%～50%。目前，臨床常用的降壓藥物包括利尿劑、β腎上腺素受體阻滯劑、鈣拮抗劑、血管緊張素轉換酶抑制劑(ACE)、血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑和α腎上腺素受體阻滯劑。其中，利尿劑、β腎上腺素受體阻滯劑、ACE抑制劑和血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑的使用受原發性高血壓患者的遺傳因素影響較大，與基因多態性有關[1]。近年來，貴州地區原發性高血壓患者發病呈上升趨勢，用藥效果個體差異較大，究其原因可能與抗藥物基因多態性有關。貴州是一個多民族聚集地，多民族的基因交流使得貴州地區人群遺傳基因分布具有復雜性，因此本文分析159例貴州地區原發性高血壓患者抗高血壓藥物基因，旨在獲得貴州原發性高血壓人群抗高血壓藥物基因分布特點。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年12月至2016年12月在本院就診的原發性高血壓患者159例，男99例，女60例。納入標準：(1)年齡大于18歲，性別不限；(2)根據中國高血壓防治指南(2018 年修訂版)中血壓的測量方法，連續3次非同日坐位收縮壓(SBP)≥ 140 mm Hg和(或)舒張壓(DBP)≥90 mm Hg。排除標準：(1)繼發性高血壓；(2)急性心腦血管事件發生3個月內；(3)合并嚴重心肌病、風濕性心臟病、先天性心臟病和嚴重肝腎疾病。

1.2方法

1.2.1基因組DNA提取 抽取高血壓患者靜脈血2 mL，利用廈門至善全自動DNA提取儀提取基因組DNA。

1.2.2基因檢測 使用無錫瑞奇AGTR1、CYP2D6*10、ACE(I/D)、CYP2D6*10、ADRB1檢測試劑盒(PCR- 熔解曲線法)，無錫瑞奇CYP2C19基因檢測試劑盒(PCR- 熔解曲線法)對AGTR1、CYP2D6*10、ACE(I/D)、CYP2D6*10、ADRB1、CYP2C19*2、CYP2C19*3基因進行檢測。

1.3統計學處理 采用SPSS19.0統計軟件進行統計分析，計數資料以例數或百分比表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1各基因位點檢測結果 檢測的159例貴州原發性高血壓患者抗高血壓藥物相關的7個基因多態性位點分布頻率見表1。

表1 貴州原發性高血壓患者抗高血壓藥物相關的 7個基因多態性位點分布頻率[n(%)]

2.2各基因位點等位基因頻率在不同性別中的分布 159例貴州原發性高血壓患者中，男性和女性抗高血壓藥物相關的7個基因多態性位點等位基因分布頻率見表2。其中，CYP2D6*10、ACE(I/D)、CYP2D6*10、ADRB1、CYP2C19*2、CYP2C19*等位基因頻率在男女間分布比較，差異無統計學意義(P>0.05)；AGTR1等位基因頻率在男性和女性患者間比較，差異有統計學意義(P<0.01)，見表2。

表2 不同性別患者抗高血壓藥物相關的7個基因 多態性位點分布頻率比較[n(%)]

a：P<0.01，與男性比較

2.3貴州地區高血壓患者相關藥物基因頻率與中國健康人群比較 將159例貴州原發性高血壓患者抗高血壓藥物相關的7個基因多態性位點等位基因分布頻率與中國健康人群[2- 3]比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 貴州地區高血壓患者與中國健康人群抗高血壓 藥物相關基因分布頻率比較(%)

3 討 論

在高血壓治療過程中抗高血壓藥物療效和不良反應的個體差異是目前的普遍現象。造成個體藥物反應差異的主要原因是藥物代謝酶、轉運體和受體(藥物作用靶點)的遺傳變異。根據個體與藥物治療相關的代謝酶、轉運體和受體的遺傳變異制訂不同的治療方案，實現藥物治療個體化不僅可以減輕不良反應，而且可以達到較好的降壓效果，具有十分重要的臨床意義及社會價值。

本次研究中所檢測的AGTR1、CYP2C9*3、ACE(I/D)、CYP2D6*10、ADRB1、CYP2C19*2、CYP2C19*3是4類常用降壓藥：利尿劑、β腎上腺素受體阻滯劑、ACE抑制劑和血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑的相關基因位點，基因位點多態性可能會影響患者降壓療效。其中，血管緊張素Ⅱ的1型受體(AGTR1)主要介導腎素- 血管緊張素系統，A1166C位點在高血壓的藥物治療中具有重要意義。研究表明，使用氯沙坦治療后，AA基因型個體的有效率明顯高于AC和CC基因型個體[4]。在本次研究中，AGTR1(A/C)野生型純合子頻率為80.50%，突變雜合子頻率為18.87%，突變純合子頻率為0.63%，與中國健康人群相比，AGTR1(A/C)野生型等位基因頻率接近，但是突變型等位基因頻率高于中國健康人群。此外，本研究中AGTR1(A/C)在男女分布上也有不同，男性突變型等位基因頻率為4.04%，而女性突變型等位基因頻率為20.00%，二者比較，差異有統計學意義(P<0.01)。推測AGTR1(A/C)的突變可能與女性發病相關，與許景峰等[5]研究相符。

CYP2C9是細胞色素P450家族中的重要成員，可催化約12%的臨床常用藥物，ACE就是其中之一。CYP2C9基因多態性主要為CYP2C9*1(Arg144/Ile359)、CYP2C9*2(Cys144/Ile359)、CYP2C9*3(Arg144/Leu359)。在中國漢族人群中CYP2C9基因型主要以CYP2C9*3為主。CYP2C9*3可表現為酶活性降低，從而影響ACE的藥效發揮。本次研究中沒有檢測到CYP2C9*3(A/C)純合突變，雜合突變頻率也較低，僅為7.55%，而云南漢族人群[6]CYP2C9*3的雜合突變頻率為7.4%，純合突變率為1.0%；皖南漢族人群[7]的雜合突變和純合突變頻率分別為5.19%、0.74%，與本研究相似。

ACE(I/D)基因編碼血管緊張素轉換酶，為腎素- 血管緊張素系統的關鍵酶，ACE基因存在多種遺傳多態性，其中第16內含子中存在的287 bp的Alu插入片段(I)和缺失片段(D)的多態性與高血壓藥物治療相關。研究表明，DD純合型個體使用貝那普利和福辛普利的療效顯著，Ⅱ純合型個體使用依那普利和咪達普利的療效顯著，ID雜合型個體使用血管緊張素抑制劑類藥物治療，均有效[8]。本研究中，ACEⅡ型、ID型、DD型分布頻率分別為41.51%、47.17%、11.32%，與貴州漢族、布依族高血壓人群的基因型分布大體一致[9]，但是DD型分布頻率略高于貴州漢族、布依族高血壓人群，為后期DD型患者高血壓用藥提供臨床依據。

經CYP2D6催化代謝的藥物多達80多種，如β腎上腺素受體阻滯劑。不同個體CYP2D6的活性相差較大，在中國人群中最常見的多態性為CYP2D6*10，約51.6%的中國人攜帶此遺傳變異。該多態性導致CYP2D6的酶活性降低，且極不穩定，從而影響藥物代謝[10]。本次檢測的CYP2D6*10(C/T)在男性與女性患者的分布頻率上無明顯差異，等位基因頻率與中國健康人群接近，有57.55%的高血壓患者攜帶突變，提示可以為后期研究貴州地區高血壓患者個體化使用β腎上腺素受體阻滯劑奠定研究基礎。

ADRB1(G/C)基因可編碼β1腎上腺素受體，該基因存在多態性。ADRB1(G/C)基因多態性與高血壓藥物治療相關，野生型純合子對該藥不敏感，而突變致該類藥與ADRB1結合能力增強故對該類藥敏感。本研究檢測到約80%的高血壓患者攜帶該突變，略高于中國漢族高血壓人群及中國健康人群[2，5]。但是仍檢測到近20%的高血壓患者未發生突變，該部分患者與β1腎上腺素受體類降壓藥的療效相關性值得進一步研究。

利尿劑類藥物(如吲達帕胺)主要經CYP2C19參與肝臟代謝，CYP2C19存在基因多態性，其中檢測*2、*3兩個位點可覆蓋中國大部分人群[11]。本次檢測中未發現CYP2C19*3純合突變型，推測可能與樣本量較小有關。此外，貴州高血壓患者等位基因頻率的分布與中國健康人群一致，但是沒有更多文獻對CYP2C19與抗高血壓藥物相關性進行報道，因此在后期用藥研究中將持續關注。

貴州是多民族匯聚地，多個民族的基因交流可能使得貴州人群基因有著獨特的分布特點。本次研究對199例貴州地區行4大類降壓藥療效相關基因行檢測，分析貴州地區抗高血壓藥物相關基因在原發性高血壓人群中多態性分布。雖然結果顯示貴州原發性高血壓人群在抗高血壓藥物基因分布上與中國健康人群接近，推測可能與標本量較小有關，后期需增加樣本量為建立貴州原發性高血壓患者基因庫打下基礎，從而為貴州地區高血壓患者用藥情況作出合理評價，最終提供個性化用藥指南。