一起家庭食源性疾病事件的病原學(xué)及分子生物學(xué)調(diào)查分析

沈靜 張靜 王姍 金虹飛

（上海市虹口區(qū)疾病預(yù)防控制中心 上海 200082）

食源性疾病事件在突發(fā)公共衛(wèi)生事件中占有很大的比例，因而明確該事件的致病菌，加強(qiáng)日常食源性疾病的管控就顯得尤為重要。2019年6月14日15時(shí)55分我中心急傳科接轄區(qū)某醫(yī)院電話報(bào)告，稱該院腸道門診接診一名腹瀉病人，自述本人及家中其余2名家屬食用醬鴨后均有腹瀉癥狀。隨即，本疾病預(yù)防控制中心應(yīng)急辦派工作人員赴醫(yī)院及病例家中開(kāi)展流行病學(xué)調(diào)查和處置工作，經(jīng)調(diào)查該家庭3名成員分別出現(xiàn)不同程度的發(fā)熱、腹瀉癥狀。于此同時(shí)，本單位實(shí)驗(yàn)室也對(duì)流調(diào)人員采集的現(xiàn)場(chǎng)標(biāo)本開(kāi)展系列微生物學(xué)檢測(cè)。

1.資料與方法

1.1 樣品來(lái)源

2019年6 月14 日20 時(shí)收到流調(diào)人員送檢的病例肛拭標(biāo)本1件；家屬肛拭樣品2件；食品醬鴨1件。

1.2 檢測(cè)方法

1.2.1 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)《感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)》WS 271-2007,《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn)》GB 4789.4—2016[1]對(duì)送檢樣本開(kāi)展增菌、分離培養(yǎng)、生化鑒定、血清學(xué)鑒定等致病菌檢測(cè)。

1.2.2 PFGE檢測(cè)參照美國(guó)CDC提供的PFGE分子分型的標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室規(guī)程對(duì)腸炎沙門氏菌進(jìn)行脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE）分析[2]。

1.2.3 藥敏檢測(cè)依據(jù)美國(guó)CLSI推薦的微量肉湯稀釋法,購(gòu)置商品化藥敏板進(jìn)行藥敏試驗(yàn),選用30種抗生素包括：氨芐西林AMP、氨芐西林-舒巴坦AMS、四環(huán)素TET、氯霉素CHL、復(fù)方新諾明SXT、頭孢唑林CFZ、頭孢噻肟CTX、頭孢他啶CAZ、頭孢西丁CFX、慶大霉素GEN、亞胺培南IMI、萘啶酸NAL、阿奇霉素AZI磺胺異噁唑SUL、環(huán)丙沙星CIP、阿莫西林-克拉維酸AMC、頭孢噻肟-克拉維酸CTX-T、頭孢他啶-克拉維酸CAZ-C、多粘菌素E CT、多粘菌素B PB、米諾環(huán)素MIN、阿米卡星AMI、氨曲南AZM、頭孢吡肟FEP、美羅培南MEM、左氧氟沙星LEV、多西環(huán)素DOX、卡那霉素KAN、鏈霉素STR、吉米沙星GEM。根據(jù)CLSIM100-S27(2017)出版的藥敏試驗(yàn)指南進(jìn)行耐藥判定,質(zhì)控菌株為大腸埃希氏菌ATCC25922。

2.結(jié)果

2.1 細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定結(jié)果

樣品中分離出4株腸炎沙門氏菌。其中1株來(lái)自病例，2株來(lái)自其家屬，另一株來(lái)自于食品醬鴨（購(gòu)置于單位食堂）。

2.2 PFGE分型結(jié)果

4株腸炎沙門菌依次編號(hào)HKSM19007～`HKSM19010基因組DNA經(jīng)XbaI內(nèi)切酶酶切后,產(chǎn)生4條條帶數(shù)目和分子量大小完全一致的條帶，見(jiàn)下圖1。通過(guò)BioNumerics軟件分析形成了聚類圖,可見(jiàn)條帶數(shù)目和位置也完全相同，相似度達(dá)100%,可見(jiàn)來(lái)自同一克隆株,具有同源性，見(jiàn)圖2。

圖1 腸炎沙門菌脈沖場(chǎng)凝膠電泳分型圖

圖2 4株腸炎沙門氏菌的聚類樹(shù)狀圖

2.3 藥物敏感性試驗(yàn)結(jié)果

經(jīng)藥敏試驗(yàn)4株腸炎沙門氏菌對(duì)AMP,NAL,Sul,STR的耐藥率為100%；對(duì)CFZ的耐藥率為75%；對(duì)AMS的耐藥率為50%，對(duì)其余24種抗生素敏感性為100%，可見(jiàn)具有相似的耐藥譜，結(jié)果見(jiàn)表。

表 4株腸炎沙門氏菌的耐藥譜

3.討論

此次事件通過(guò)對(duì)細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定結(jié)果、分子溯源分析以及細(xì)菌耐藥譜的分析，可以認(rèn)為該事件是由于家庭成員食用了被腸炎沙門氏菌污染的醬鴨所導(dǎo)致的一起聚集性食源性疾病事件。此次調(diào)查過(guò)程中所采集的標(biāo)本包括了可疑食物和病例，分離到了相同血清型的沙門氏菌，并且經(jīng)PFGE分子分型獲得了完全一致的條帶為判定腸炎沙門氏菌引起的食源性疾病事件提供了可靠的證據(jù)。但是，據(jù)流調(diào)顯示可疑食物醬鴨購(gòu)買于患者兒子單位食堂，沒(méi)能采集到食物加工的環(huán)節(jié)是本次事件證據(jù)鏈的重要缺失，希望今后遇到此類事件相關(guān)部門能協(xié)同合作采集到更完整的樣本。

PFGE分型被認(rèn)為是目前細(xì)菌分子流行病學(xué)研究的“金標(biāo)準(zhǔn)”[3]。此次事件就是我們實(shí)驗(yàn)室將PFGE 技術(shù)在病原菌分子溯源方面一次有效的實(shí)踐。然而，我們國(guó)家對(duì)于腸道致病菌的脈沖場(chǎng)數(shù)據(jù)庫(kù)包含的數(shù)據(jù)資料還十分有限,因而加快建設(shè)國(guó)家致病性識(shí)別網(wǎng)體系就顯得非常重要。

腸炎沙門菌是沙門菌食物中毒最常見(jiàn)的血清型之一[4]。為了避免此類食源性疾病的發(fā)生，我們普通老百姓最好采購(gòu)新鮮的食材，應(yīng)避免使用冰箱內(nèi)久置存放的食品，減少隔夜菜的攝入，本次事件經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查，正是由于食用了放置于冰箱的隔夜醬鴨所致。當(dāng)下天氣炎熱，食品極其容易腐敗變質(zhì)，衛(wèi)生監(jiān)督部門，應(yīng)加大對(duì)餐飲業(yè)，集體食堂，學(xué)校等各類場(chǎng)所的監(jiān)查力度，著重加強(qiáng)督查食品采購(gòu)、貯存、加工、銷售中容易造成食源性疾患的重要環(huán)節(jié)[5]。