雙歧桿菌三聯活菌聯合XELOX 化療對大腸癌術后腸道菌群及免疫功能的影響

劉 丹 粟文釗 吳忠良

蘇州大學附屬第二醫院普外科，江蘇蘇州 215000

大腸癌是臨床常見的惡性腫瘤，主要包括結腸癌和直腸癌[1]。該病早期臨床癥狀不典型，隨著病情的進展，可出現便血、腹瀉及排便習慣改變；晚期時，患者出現體重驟降、貧血等威脅患者生命健康的并發癥，預后較差[2]。手術治療仍是治療大腸癌的有效方式，但存在切緣癌殘留、術后易發生遠處轉移等弊端。因此，術后化療亦是大腸癌治療的重要組成部分。奧沙利鉑+卡培他濱（XELOX）方案是大腸癌術后的常用化療方案之一，在改善患者臨床癥狀、降低術后轉移風險等方面具有一定效果[3]。但由于多數化療藥物對腫瘤細胞沒有高度選擇性，在殺滅腫瘤細胞的同時，也可殺滅或損傷正常組織細胞。此外，大腸癌切除手術不可避免的對患者腸道造成損傷，致使術后患者腸道微生態平衡失調，增加化療毒副作用的發生風險。雙歧桿菌三聯活菌屬于微生物制劑，可有效改善腸腔內環境，增強黏膜通透性[4]。本研究通過探討雙歧桿菌三聯活菌聯合XELOX 化療對大腸癌術后的影響，旨在為臨床大腸癌的治療提供數據支撐。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016 年2 月～2019 年2 月蘇州大學附屬第二醫院（以下簡稱“我院”）診治的大腸癌術后患者93 例。依據隨機數字表法將其隨機分為研究組（47 例）、對照組（46 例），兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P ＞0.05），具有可比性，見表1。本研究經我院醫學倫理委員會批準。

納入標準：①經病理學及臨床影像學確診為大腸癌；②具備手術指征，且接受手術治療者；③生存期均＞6 個月；④既往未接受過化療者；⑤患者及其家屬知情且簽署知情同意書。排除標準：①影像學顯示已存在遠處轉移者；②妊娠及哺乳期婦女；③治療前存在腸梗阻、腸穿孔等癥狀；④對本次研究使用藥物存在禁忌者；⑤合并血液系統、免疫系統、心肝腎等疾病者；⑥近期服用過抗生素、微生態制劑等影響腸胃動力者。

1.2 方法

兩組均接受手術治療，術后對照組患者予以XELOX化療，具體如下：奧沙利鉑（成都長青制藥有限公司，生產批號：20151124）130 mg/m2，將其溶入500 mL 5%葡萄糖注射液靜脈滴注，1 次/d，只在第1 天注射；卡培他濱（齊魯制藥有限公司，生產批號：20150823）800 mg/m2，2 次/d，在第1～14 天口服。研究組在對照組的基礎上給予口服雙歧桿菌三聯活菌（上海上藥信誼藥廠有限公司，生產批號：20160117）0.63g，3 次/d。21 d 為一個治療周期，為期2 個周期。

表1 兩組一般資料比較

1.3 觀察指標

1.3.1 免疫功能 取兩組治療前、治療2 個周期后清晨空腹靜脈血2 mL，Fascalibur 流式細胞儀（美國BD 公司，批號：20150624）檢測患者T 淋巴細胞亞群：CD4+、CD8+，并計算CD4+/CD8+。

1.3.2 腸道菌群 取兩組治療前、治療2 個周期后新鮮糞便0.1 g，經生理鹽水倍比稀釋混勻，分別接種至含有厭氧菌、需氧菌的培養基中。需氧菌包括雙歧桿菌、乳酸桿菌，有氧環境，37℃，培養48 h，計數；厭氧菌包括大腸埃希菌、糞腸球菌，抽氣換氣法，培養72 h，計數。鑒定采用ALB 半自動生物檢定系統（蘭州生物制品研究所有限責任公司，批號：141205）。

1.3.3 腫瘤標志物 取兩組治療前、治療2 個周期后清晨空腹靜脈血4 mL，3300 r/min 離心11 min（離心半徑8 cm），取上清液。酶聯免疫試劑盒（上海恒遠生物科技有限公司，生產批號：20141027）檢測糖類抗原199（CA199）、癌胚抗原（CEA）水平。

1.3.4 安全性評價 記錄兩組治療期間不良反應情況。

1.4 療效判定標準

記錄兩組治療2 個周期后的臨床效果。療效判定標準包括：①完全緩解，病灶直徑縮小＞70%，且維持1 個月以上；②部分緩解，病灶直徑縮小40%～70%，且維持1 個月以上；③疾病穩定，病灶直徑縮小＜40%或直徑未見明顯變化；④疾病進展，病灶直徑增大或見新病灶[5]。總有效=部分緩解+完全緩解。

1.5 統計學方法

采用SPSS 25.0 統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（）表示，兩組間比較采用t 檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗。以P ＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組臨床效果比較

研究組治療2 個周期后臨床總有效率高于對照組，差異有統計學意義（P ＜0.05）。見表2。

表2 臨床療效比較[例（%）]

2.2 兩組腸道菌群比較

兩組治療前雙歧桿菌、乳酸桿菌、大腸埃希菌、糞腸球菌比較，差異無統計學意義（P >0.05）；兩組治療2 個周期后乳酸桿菌、雙歧桿菌升高，大腸埃希菌、糞腸球菌降低，差異均有統計學意義（均P <0.05）；研究組治療2 個周期后乳酸桿菌、雙歧桿菌高于對照組，大腸埃希菌、糞腸球菌低于對照組，差異均有統計學意義（均P <0.05）。見表3。

表3 兩組腸道菌群比較（IgCFU/g，）

表3 兩組腸道菌群比較（IgCFU/g，）

注：與本組治療前比較，*P <0.05；與對照組同期比較，#P <0.05

2.3 兩組免疫功能比較

兩組治療前CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比較，差異無統計學意義（P >0.05）；兩組治療2 個周期后CD4+、CD4+/CD8+降低，CD8+升高，差異均有統計學意義（均P <0.05）；研究組治療2 個周期后CD8+低于對照組，CD4+、CD4+/CD8+高于對照組，差異均有統計學意義（均P <0.05）。見表4。

表4 兩組免疫功能比較（）

表4 兩組免疫功能比較（）

注：與本組治療前比較，*P <0.05；與對照組同期比較，#P <0.05。

2.4 兩組血清腫瘤標志物比較

兩組治療前CA199、CEA 比較，差異無統計學意義（P >0.05）；兩組治療2 個周期后CA199、CEA 均降低，且明顯低于對照組，差異均有統計學意義（均P<0.05）。見表5。

2.5 安全性評價

治療期間，對照組出現2 例白細胞減少、3 例胃腸道不適、2 例脫發、1 例肝功能損害，不良反應發生率為17.39%（8/46）；研究組出現3 例白細胞減少、3 例胃腸道不適、4 例脫發、2 例肝功能損害，不良反應發生率為25.53%（12/47）；兩組不良反應發生率比較，差異無統計學意義（P >0.05）。

表5 兩組血清腫瘤標志物比較（）

表5 兩組血清腫瘤標志物比較（）

注：與本組治療前比較，*P <0.05；與對照組同期比較，#P <0.05。CA199：糖類抗原199；CEA：癌胚抗原

3 討論

大腸癌是位居我國第四位的惡性腫瘤，其發病率由低到高依次為橫結腸、降結腸、升結腸、盲腸、乙狀結腸、直腸，近幾年有向近端發展的趨勢[6]。手術切除是其主要治療方案，但很多臨床實踐證實[7-8]，部分患者在行手術治療時，已出現癌細胞擴散現象，同時手術操作也可能造成不同程度的癌細胞擴散現象。因此，單純依靠手術切除無法達到根治效果，術后適度的化療可有效降低腫瘤復發率，延長生存期。XELOX 方案是結直腸癌患者常用的化療方案，但是手術及化療均可對患者自身的抗腫瘤免疫應答帶來負面沖擊，極易出現毒副作用，同時手術切除還可造成術后腸道菌群結構發生改變，嚴重影響患者預后[9-10]。雙歧桿菌三聯活菌主要是用于治療腸道菌群失調引起的腹瀉和腹脹[11-12]。現臨床有關其輔助治療大腸癌術后化療的相關報道并不多見，且效果尚存在一定爭議，本研究就此展開探討。

本研究結果顯示，研究組治療2 個周期后臨床總有效率、腸道菌群改善情況均優于對照組，提示雙歧桿菌三聯活菌輔助大腸癌術后化療，可進一步提高治療效果。原因在于奧沙利鉑在多種腫瘤模型系統包括人結直腸癌模型，都表現出廣譜的體外細胞毒性及體內抗腫瘤活性作用。體內、體外試驗也證實其通過形成鏈內鏈間的交聯，產生烷化結合物，作用于DNA，分離或阻礙蛋白質合成，有效抑制腫瘤細胞增殖[13]。卡培他濱在體內轉變成5 氟尿嘧啶，抑制細胞分裂、干擾RNA 和蛋白質合成[14]。既往研究證實[15]，腸道菌群失調是大腸癌發生的影響因素之一。而雙歧桿菌三聯活菌進入腸道后可直接在腸道定植，通過補充腸道益生菌改善腸道微環境，阻止致病菌產生[16-17]。兩種治療方式聯合應用，在確保治療效果的同時還可利用生物奪氧功能改善定植部位的氧濃度，抑制大腸埃希菌等致病菌的繁殖，同時促進雙歧桿菌等有益菌的生長[18]。

本研究結果顯示，兩組免疫功能、血清腫瘤標志物水平均得到有效改善，且觀察組的改善效果更佳。CD8+可抑制B 細胞抗體免疫反應及T 細胞增殖，CD4+可分泌對其他炎癥細胞進行趨化、活化的細胞因子，CD4+/CD8+的動態平衡直觀反映機體免疫功能狀態[19]。另大腸癌在發生發展過程中，可激活多種腫瘤標志物，且該類腫瘤標志物血清水平與臨床分期和預后密切相關。CA199 是一種糖鏈抗原，在多種惡性腫瘤中均明顯升高[20]；CEA 是一種糖蛋白，主要用于調節腫瘤細胞對細胞毒性淋巴細胞的敏感性，使腫瘤細胞逃避免疫攻擊[21]。分析其改善效果更佳原因，可能與雙歧桿菌三聯活菌通過調節腸道菌群保證腸黏膜屏障功能完整性，進而有效改善機體免疫功能有關[22-23]。比外，兩組不良反應發生率比較，差異無統計學意義（P >0.05）。提示該治療方式安全性較好，不會增加不良反應發生率。此外，本次研究尚存在樣本數據偏小、未能觀察患者遠期預后等不足，后續將進行相關的深入報道。

綜上所述，大腸癌術后患者經雙歧桿菌三聯活菌聯合XELOX 化療治療后，效果確切，可有效改善患者腸道菌群、免疫功能，降低血清腫瘤標志物水平，安全性較好，臨床應用價值較高。