人參凍干粉中總皂苷測定方法研究

韓亞男 李曉怡 許永超 鄒曉峰 丁爽 潘士鋼

摘? 要：目的? 該文通過對人參凍干粉進(jìn)行質(zhì)量評價，測定人參凍干粉中總皂苷含量。方法? 采用柱層析法分離皂苷;對比不同樹脂研究總皂苷含量。結(jié)果? 人參皂苷Re在40～200μg之間呈良好的線性關(guān)系（r=0.9998）。PT-大孔吸附樹脂柱能夠很好地吸附人參皂苷，有效地分離出人參皂苷，加樣回收率為98.53%。結(jié)論? 該方法簡便，準(zhǔn)確性及靈敏性高，可以應(yīng)用于人參凍干粉質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：人參? 凍干粉? 總皂苷

中圖分類號：R284 ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-3791（2019）10（a）-0040-02

人參（Panax ginseng C A Meycr）為五加科多年生草本植物，味甘、微苦，性溫，素有“百草藥”之美稱，是我國傳統(tǒng)的滋補養(yǎng)生名貴藥材，證實人參具有改善微循環(huán)、提高組織抗缺氧能力、抑制血小板聚集、抗腫瘤、抗衰老、抗輻射、抗疲勞等多種生物活性[1]。目前市售制劑有片劑、膠囊劑、酒劑和人參茶。鮮人參不加防腐劑很難長時間保存，人參采收后通過清洗等處理后通常都會炮制，生曬、蒸制等處理來長期保存。炮制后的人參直接口服給藥吸收差，口感差。

針對上述問題，該研究制備了人參凍干粉，利用凍干技術(shù)將鮮人參經(jīng)工藝加工成凍干粉，保存了鮮參原有的氣味、成分，吸收好、口感好。還可長時間保存，生物利用度更加高。總皂苷是評價凍干粉質(zhì)量及工藝的重要指標(biāo)，因此筆者研究建立了人參凍干粉中總皂苷的含量測定方法，為人參凍干粉的質(zhì)量評價提供依據(jù)。

1? 儀器與試藥

紫外可見分光光度計（日本島津公司UV-2600）;Amberlite-XAD-2大孔吸附樹脂（sigma）、PT大孔吸附樹脂柱（河北省津楊濾材廠），人參凍干粉（自制），人參皂苷Re對照品（中國食品藥品檢定研究院）;試劑均為分析純。

2? 方法與結(jié)果

2.1 供試品溶液的制備

取該品20支，取內(nèi)容物置自封袋中，展研細(xì)，精密稱取0.2g左右的試樣，置于100mL量瓶中，加少量水，超聲30min，再用水定容至100mL，搖勻，放置，吸取上清液1.0mL進(jìn)行柱層析。

2.2 柱層析

以PT-大孔吸附樹脂柱進(jìn)行層析分離。先用25mL70%乙醇洗柱，棄去洗脫液，再用25mL水洗柱，棄去洗脫液，精確加入1.0mL已處理好的試樣溶液，用25mL水洗柱，棄去洗脫液，用25mL70%乙醇洗脫人參皂苷，收集洗脫液于蒸發(fā)皿中，置于60℃水浴揮干。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

稱取人參皂苷Re對照品20mg置容量瓶中，加甲醇溶解并定容至10mL，分別精密量取標(biāo)準(zhǔn)溶液：20、40、60、80、100μL于蒸發(fā)皿中，放在水浴揮干（60℃），蒸發(fā)皿中準(zhǔn)確加入0.2mL5%香草醛冰醋酸溶液，轉(zhuǎn)動蒸發(fā)皿，使殘渣都溶液，再加0.8mL高氯酸，混勻后移入5mL帶塞刻度離心管中，60℃水浴上加熱10min，取出，冰浴冷卻后，準(zhǔn)確加入冰醋酸5.0mL，搖勻后，以1cm比色池于560nm波長處比色測定。并分別記錄各吸光值，以吸光值A(chǔ)對質(zhì)量C繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。回歸方程為A=0.0044C-0.0009（r=0.9998），結(jié)果：人參皂苷Re在40～200μg之間呈良好的線性關(guān)系。

2.4 回收率試驗

采用加樣回收法，取本品，一式9份，分別按樣品總皂苷量的80%、100%、120%精密加入人參皂苷Re對照品，按供試品制備方法進(jìn)行含量測定并計算回收率，經(jīng)統(tǒng)計處理，平均回收率為：98.53%，RSD分別為1.21%。

2.5 不同樹脂對總皂苷含量的影響考察

分別采用PT-大孔吸附樹脂柱和Amberlite-XAD-2大孔吸附樹脂吸附總皂苷，然后用洗脫液洗脫，收集洗脫液 [2-3]測定含量。結(jié)果表明，采用PT-大孔吸附樹脂柱時總皂苷含量比采用Amberlite-XAD-2大孔吸附樹脂柱時高。說明采用Amberlite-XAD-2大孔吸附樹脂柱時，有部分皂苷被水洗脫掉了，會使總皂苷的測定含量降低，因此，采用PT-大孔吸附樹脂柱。結(jié)果見表1、表2。

3? 討論

《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》2003年版中“二十三.保健食品中總皂苷的測定”用的Amberlite-XAD-2大孔吸附樹脂對皂苷的吸附性比較差，結(jié)果重現(xiàn)性不好，準(zhǔn)確性不好。采用PT-大孔吸附樹脂柱對皂苷的吸附性好，重現(xiàn)性、準(zhǔn)確性良好。可能與人參中的皂苷種類、苷元不同等有關(guān)，有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)

[1] 呂建平，郝冠中.人參抗疲勞作用研究進(jìn)展[J].中國社區(qū)（醫(yī)學(xué)專業(yè)），2012，14（34）：43.

[2] 劉花梅，杜裕芳，鄒敏，等.保健食品中總皂苷測定方法研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2018，46（15）：163-166.

[3] 白鴻.保健食品功效成分檢測方法[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社，2011.