應用瑞舒伐他汀降血脂后的不同療效人群腸道微生態菌群差異分析

張玲 陳雪梅

[摘要]目的 分析瑞舒伐他汀治療高脂血癥后不同療效的患者腸道微生態菌群的差異。方法將本院68例行瑞舒伐他汀治療的高脂血癥患者作為研究對象，根據患者治療后2個月降脂效果的不同，分為降脂良好組（A組，n=49）與降脂欠佳組（B組，n=19）。比較兩組患者治療前后血脂水平的差異，并收集患者糞便提取腸道微生態菌群DNA，采用DNA測序技術分析患者腸道微生態菌群的差異。結果A組治療后總膽固醇（TC）、甘油三酷（TG）、低密度脂蛋白-膽固醇（LDL-C）的含量較治療前均明顯下降，高密度脂蛋白-膽固醇（HDIr-C）含量較治療前明顯升高，且治療后A組與B組比較TC、TG、LDL-C的含量均明顯下降HDI}C含量明顯升高（P<0.05）。A組疣微菌門、厚壁菌門、梭桿菌門及柔壁菌門豐度較B組顯著升高，而互養菌門、藍細菌門、放線菌門及擬桿菌門豐度較B組顯著下降（P<0.05）。A組擬桿菌門中的擬桿菌科的相對豐度較B組明顯減少（P<0.05）;厚壁菌門中的乳酸桿菌科、毛螺菌科、瘤胃菌科和梭菌科的相對豐度較B組均明顯增多（P<0.05）。結論采用瑞舒伐他汀治療高脂血癥后，不同療效差異的患者在腸道微生態菌群門豐度和科數量方面存在較大差異。

[關鍵詞]瑞舒伐他汀;高脂血癥;腸道;微生態菌群

中圖分類號：R589.2;R972⁺.6 文獻標識碼：A 文章編號：1009-816x（2019）05-0408-04

doi：10.3969/j.issn.1009-816x.2019.05.006

近年來高脂血癥的發病率呈現逐年升高的趨勢，而心血管系統疾病已是威脅人們健康的主要公共衛生問題，是引起成年人死亡的主要原因[1]。他汀類藥物是目前國內外廣泛應用于臨床治療高脂血癥患者的重要藥物，該類藥物通過阻滯脂質合成限速步驟中的HMG-CoA還原酶，進而抑制甲基戊酸的合成。其中，瑞舒伐他汀是具有代表性的他汀類藥物之一，其在臨床中的應用較廣，是第三代他汀類藥物，經人工合成，亦是一種HMG-CoA還原酶抑制劑[2]。腸道微生態菌群與高脂血癥的發生和發展密切相關，高脂血癥患者多合并腸道微生態菌群失調，進而引起機體脂代謝失調加重，造成惡性循環。本研究將本院68例行瑞舒伐他汀治療的高脂血癥患者作為研究對象，分析經藥物治療后不同療效的患者腸道微生態菌群的差異，旨在為高脂血癥患者更好地應用瑞舒伐他汀進行降脂治療。

1 資料與方法

1.1 一般資料：將2017年3月至2018年3月本院68例行瑞舒伐他汀治療的高脂血癥患者作為研究對象，入選標準：（1）以下指標≥1項：血清總膽固醇（totalcholesterol，TC）≥5.72mmol/L，甘油三醋（triglyceride，TG）≥1.70mmol/L，低密度脂蛋白-膽固醇（low-densi-ty lipoprotein cholesterol，LDL-C）≥3.64mmol/L，高密度脂蛋白-膽固醇（high-density lipoprotein cholesterol，HDL-C）≤0.91mmol/L[3]：（2）服用瑞舒伐他汀治療1-2個月。排除標準：（1）伴有急慢性胃腸道疾病;（2胖有藥物性血脂異常、近期服用抗生素;（3）伴有惡性腫瘤、肝腎功能不全、甲狀腺功能低下、骨折、嚴重感染、腎上腺皮質功能亢進;（4）長期服用避孕藥、類固醇激素、甲狀腺激素治療者;（5胖有精神性疾病等。根據患者治療后2個月降脂效果的不同，其中降脂良好者為A組（49例），降脂欠佳者為B組（19例）。降脂良好定義為治療后血清TC水平下降至少10%，TG水平下降至少20%，LDL-C水平下降至少10%，HDL-C水平增加至少0.10mmol/L[4]，符合上述任一條件，即為降脂良好;反之，則為降脂欠佳。A組男29例，女20例，年齡28～73歲，平均（48.97±8.04）歲;伴有糖尿病9例，高血壓12例，冠心病11例。B組男12例，女7例，年齡31～74歲，平均（49.74±7.52）歲;伴有糖尿病4例，高血壓7例，冠心病5例。兩組患者性別、年齡及合并癥的比較，差異均無統計學意義（P>0.05）。

1.2 方法：在患者治療后1～2個月后，糞便標本盒經環氧乙烷消毒后，用于裝人新鮮糞便約5g，即刻密封糞便標本后，置于-80℃下冷凍保存，時間嚴格控制在30min內。提取并鑒定糞便細菌總DNA，制備基因組DNA模板，使用帶有Barcode特異引物，16S V3-V4區引物8068及341F序列，酶和緩沖液，聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）反應體系包括Primei（2μM）3μL（6μM），H₂O 2μL，Phusion Master Mix（2×）15μL，gDNA（1ng/μL）10μL（5～10ng）。98℃預變性60s，以相同溫度變性15s，56℃退火30s，72℃延伸30s，35個循環，72℃延伸5min。對所得PCR產物進行混養及純化，確定產物回收膠濃度，上機測序，采用DNA測序技術分析患者腸道微生態菌群的差異。觀察指標：記錄兩組患者治療前和治療后2個月血脂四項水平的情況，包括TC、TG、LDL-C及HDL-C;記錄兩組患者腸道微生態菌群門相對豐度和科數量的情況。

1.3 統計學處理：將數據錄入SPSS 23.0版統計學軟件，計量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗，計數資料用率表示，組間比較則用χ²檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者治療前后血脂四項的比較：A組治療后TC、TG、LDL-C的水平較治療前均明顯下降，HDL-C水平較治療前明顯升高，且治療后A組與B組比較TC、TG、LDL-C的水平均明顯下降，HDL-C水平明顯升高（P<0.05），見表一。

2.2 兩組患者腸道微生態菌群門豐度的比較：A組疣微菌門、厚壁菌門、梭桿菌門及柔壁菌門豐度較B組顯著升高，而互養菌門、藍細菌門、放線菌門及擬桿菌門豐度較B組顯著下降（P<0.05），見表2。

2.3 兩組患者腸道微生態菌群科相對豐度的比較：A組放線菌門中的雙歧桿菌科、擬桿菌門中的擬桿菌科的相對豐度較B組明顯減少（P<0.05）;厚壁菌門中的乳酸桿菌科、毛螺菌科、瘤胃菌科和梭菌科的相對豐度較B組均明顯增多（P<0.05），見表3。

3 討論

高血脂是引起動脈粥樣硬化，進一步誘發心、腦缺血的一項高危因素，其病因多種多樣，吸煙、過量進食、運動量少、肥胖、飲食飽和脂肪酸過高、多個遺傳基因缺陷、部分藥物的應用等均可誘發高脂血癥，且該病的發生可引起其它疾病[5，6]。因多數高脂血癥患者無典型臨床癥狀表現，使得臨床容易受忽視，而此類患者發生心血管疾病的風險性較高，亦是導致患者過早死亡的主要原因[7]。他汀類藥物不僅可增強血漿中LDL-C受體的表達水平，抑制肝臟LDL-C的合成，而且可促進血漿LDL-C的清除，促使高脂血癥患者的膽固醇濃度下降，故此可用于冠心病的一級和二級預防[8，9]。本研究發現，A組治療后TC、TG、LDL-C的水平較治療前均明顯下降，HDL-C水平較治療前明顯升高，且A組治療后TC、TG、LDL-C的水平較B組均明顯下降，HDL-C水平較B組明顯升高。作為氨基嘧啶衍生物類，瑞舒伐他汀既有脂溶性亦有水溶性的特點，進入人體后不需要進行代謝，故此可提升該藥的降血脂效果。目前，有關他汀類藥物對高脂血癥患者降脂效果的研究報道并不少見。有研究報道，高脂血癥患者應用瑞舒伐他汀治療后6周，可使患者血清LDL-C含量下降50%[10]。但另有研究指出，20%～30%的患者降脂效果欠佳，即使增加劑量也難以改善療效，甚至會引起更多的藥物不良反應[11]。本研究發現，68例高脂血癥患者中，經瑞舒伐他汀治療后，降脂效果較差者19例，占27.95%，與上述研究報道相符。

人體腸道微生態菌群作為復雜的微生態系統之一，其對機體新陳代謝特別是脂代謝的影響較大，且對人類健康及疾病的發生具有重要的影響。在高脂血癥引起的慢性疾病中，腸道菌群起到重要的作用。已有研究報道，在慢性疾病的發生和發展過程中，腸道微生態菌群的數量、種類及多樣性起到重要的作用[12，13]。一方面，腸道微生態菌群在人體能量代謝和物質代謝中發揮著重要作用，另一方面在宿主的感染及免疫中亦起到主要作用。既往研究通過構建肥胖大鼠模型，發現腸道微生態菌群結構的改變，特別是厚壁菌門與擬桿菌門相對豐度的明顯改變對降脂起到重要作用，且在高脂血癥患者糞便菌群中，主要特征表現為產短鏈脂肪酸的細菌明顯減少，而革蘭陰性菌的種類數量明顯增多[14]。另有研究指出，高脂血癥與腸道微生態菌群失調存在顯著關系，并且該菌群多樣性改變預示人體狀況改變，這對藥物療效亦會造成一定影響[15]。因此，充分分析他汀類藥物在高脂血癥患者中的降脂效果及其與腸道微生態菌群的關系，對有效改善高脂血癥患者療效，提高生活質量具有重要的意義。

本研究顯示A組疣微菌門、厚壁菌門、梭桿菌門及柔壁菌門豐度較B組顯著升高，而互養菌門、藍細菌門、放線菌門及擬桿菌門豐度較B組顯著下降。A組擬桿菌門中的擬桿菌科的相對豐度較B組明顯減少，可能與其具有促進脂肪吸收的作用密切相關。B組擬桿菌門中的普雷沃氏菌科與擬桿菌科等菌可促進內毒素的生成，使得體內炎癥反應加重，進而造成血脂異常。其次，本研究結果顯示，B組放線菌門的雙歧桿菌科的相對豐度較A組明顯增高的原因可能是因血脂增高使得雙歧桿菌含量增多，結果提示腸道微環境的改變會導致菌群結構的改變。A組厚壁菌門中的乳酸桿菌科、毛螺菌科、瘤胃菌科和梭菌科的相對豐度較B組均明顯增多。有研究報道，益生菌具有多種生物效應，如抗結腸癌、緩解炎癥程度和過敏反應，調節腸道微生態菌群等，甚至具有調節血脂的功能[16]。本文中A組乳酸桿菌科的豐度高于B的原因可能與乳酸桿菌作為益生菌具有一定的降血脂效果。

綜上所述，采用瑞舒伐他汀治療高脂血癥后，不同療效差異的患者在腸道微生態菌群門豐度和科數量方面存在較大差異。

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（收稿日期：2019-2-19）

作者單位：723000 陜西省漢中市人民醫院心內科

作者簡介：張玲（1981-），碩士，主治醫師

通訊作者：陳雪梅，副主任醫師，E-mail：2429235829@qq.com