食管癌細胞株中NFKB調控miR-21表達的機制研究

鄭天明 謝亮 吳春平 安尼瓦爾·買買提(通信作者)

844000喀什地區第一人民醫院，新疆 喀什

食管癌是世界上最常見的惡性腫瘤之一，在世界常發腫瘤中居第8 位，癌癥死亡原因居第5 位[1-2]。本次研究對食管癌細胞株與癌旁正常組織分別對比NFKB 與miR-21 表達情況展開相應的分析，具體報告如下。

資料與方法

2018年11月-2019年10月收治食管癌患者40 例，男25 例，女15 例；年齡31～75 歲，平均(56.21±2.17)歲；依據TNM 分期：Ⅰ期5 例、Ⅱ期8 例、Ⅲ期13 例、Ⅳ期14例；腫瘤分化程度：高分化12例、中分化11例、低分化17例；淋巴結轉移存在19 例，無淋巴結轉移存在21例。所有患者家屬簽署知情同意書。

方法：對食管癌組織與癌旁正常組織的NFKB 與miR-21 表達機制進行檢測，NFKB應用免疫組織化學染色SP法，具體步驟嚴格依據試劑說明書進行相關操作，若細胞漿內存在黃棕色顆粒狀則表示為NFKB 陽性細胞，部分處于細胞核內，未有陽性著色的細胞則表示為陰性；采用熒光定量聚合法檢測miR-21表達機制，相關步驟嚴格依照試劑盒說明書進行操作。

統計學方法：數據采用SPSS22.0 軟件分析；計量資料以(±s)表示，采用t檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

對比食管癌組織與癌旁正常組織NFKB 調控miR-21 的表達情況：食管癌組織中的NFKB 與miR-21 表達水平均顯著高于癌旁正常組織，差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 對比食管癌組織與癌旁正常組織NFKB調控miR-21的表達情況(±s)

表1 對比食管癌組織與癌旁正常組織NFKB調控miR-21的表達情況(±s)

組別 n NFKB miR-21食管癌組織 40 142.36±5.87 1.36±0.22癌旁正常組織 40 120.01±7.45 0.77±0.18 t 14.903 13.127 P 0.000 0.000

表2 食管癌組織中NFKB、miR-21與臨床病理之間的關系(±s)

表2 食管癌組織中NFKB、miR-21與臨床病理之間的關系(±s)

項目 分型 miR-21 NFKB P陽性 陰性TNM分期 Ⅰ～Ⅱ期 1.24±0.23 8 5 0.000Ⅲ～Ⅳ期 1.60±0.31 21 6分化程度 高中分化 1.03±0.21 14 8 0.000低分化 1.65±0.24 15 3淋巴結 有 1.57±0.24 23 4 0.000轉移 無 1.23±0.18 6 7

食管癌組織中NFKB、miR-21 與臨床病理之間的關系，見表2。

討 論

近幾年來醫學界對于腫瘤靶向逐漸重視到了miRNAs的機制表達，有研究發現其表達與人體惡性腫瘤的發展和預后存在一定聯系。本次研究中顯示，食管癌組織的miR-21高于正常組織，差異有統計學意義(P＜0.05)，提示食管癌組織miR-21 有表達增高趨勢。miR-21 廣泛存在人體細胞和組織中，并且在miRNAs中發現也較早，它能夠在細胞的分化、發育、增殖、程序細胞死亡(凋亡)、代謝等方面發揮重要作用，并且隨著食管癌病期及淋巴結轉移的進展，在癌組織中表達會逐漸增高，在癌組織中miR-21的表達增高，參與腫瘤的發生、發展過程是通過其靶基因實現的，可見miR-21易成為促進癌基因，參與到食管癌發生發展的過程中來，并且我們通過分析與食管癌臨床病理的相關性得出，miR-21表達與食管癌腫瘤分期、分化程度及淋巴轉移均有密切的關系[3]。除此之外，研究中食管癌組織的NFkB 也高于正常組織，NFkB信號通路是許多基因轉錄激活的基本途徑之一，NFkB抗細胞凋亡的主要方式是通過誘導或上調抗凋亡基因的表達實現，這些基因調節位點上有NFkB 的結合位點，他們的表達產物通過抑制細胞凋亡的死亡受體途徑或線粒體途徑發揮作用[4]。同時在食管鱗癌細胞珠中，建立NFkB 過表達及shRNA 質粒載體，通過調控NFKB 信號通路的改變，了解NFkB、miR-21 在轉錄及蛋白水平的變化情況，也就證明了NFkB 信號通路與miR-21 的表達存在調控關系，對闡明miR-21 在食管癌組織高表達的機制尤為關鍵，能夠為臨床腫瘤治療提供新的靶點。

綜上所述，在食管癌組織中miR-21與NFkB均參與整個發生發展的過程，通過分析其表達機制可為食管癌早期診斷與預后提供可靠依據。