NLR及PLR在膀胱尿路上皮癌中的表達及相關(guān)性分析

陳杰翔，廖大忠

(1.西南醫(yī)科大學附屬醫(yī)院泌尿外科，四川瀘州 646000；2.西南醫(yī)科大學附屬中醫(yī)醫(yī)院腫瘤血液病科，四川瀘州 646000)

目前對于膀胱尿路上皮癌的檢測方法主要集中在分子生物學等層面的研究上，例如癌基因HER-2、H-Ras、CDC91L1等，這些腫瘤標志物的測定，價格昂貴、操作復雜，需要相應的實驗平臺和技術(shù)人員，不利于廣大基層醫(yī)院的普及推廣。如何做到較好的術(shù)前評估，并且相應的預測方法實施起來方便、快捷且經(jīng)濟,又能在各級醫(yī)院廣泛開展并普及，意義重大。

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取2013年6月至2018年6月就診于西南醫(yī)科大學附屬醫(yī)院泌尿外科并施行手術(shù)治療，術(shù)后經(jīng)病理診斷確診為膀胱尿路上皮癌的患者152例行回顧性研究，設為病例組。其中男95例，女57例，年齡28～83歲，平均(65.60±10.88)歲。WHO 2004膀胱尿路上皮癌惡性程度分級法進行臨床病理分級(其中低級別36例，高級別116例)， 56例開放性手術(shù)治療患者按照UICC 2002年第6版TNM分期法進行臨床病理分期(其中T1期22例，T2期20例，T3期11例，T4期3例)。隨機選取同期健康體檢血常規(guī)正常者117例為對照組，其中男59例，女58例，年齡47～86歲，平均(63.36±8.56)歲。兩組性別、年齡等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 納入標準 (1)研究對象均為西南醫(yī)科大學附屬醫(yī)院泌尿外科住院患者，均施行了手術(shù)治療，術(shù)前均未經(jīng)歷放療、化療、生物治療及其他抗腫瘤藥物治療；(2)術(shù)后病理診斷確診為膀胱尿路上皮癌；(3)患者臨床資料記錄齊全，可提供術(shù)前血常規(guī)、生化全套、病理診斷資料；(4)無嚴重心腦血液系統(tǒng)疾病、無感染性疾病及原發(fā)性血脂代謝異常疾病；(5)無原發(fā)性高血壓。

1.3 排除標準 (1)未經(jīng)手術(shù)治療，無法取得相關(guān)病理診斷資料者；(2)術(shù)后病理診斷為非膀胱尿路上皮癌的其他類型膀胱腫瘤患者，如膀胱鱗狀細胞癌、膀胱腺癌，其他罕見的還有膀胱透明細胞癌、膀胱小細胞癌、膀胱類癌等；(3)合并有其他部位腫瘤者，如肺癌、肝癌、胰腺癌、胃癌、結(jié)腸癌、乳腺癌等；(4)各種原因?qū)е禄颊吲R床資料缺失，不能完整收集臨床數(shù)據(jù)者；(5)術(shù)前經(jīng)過放療、化療、激素治療及免疫治療者；(6)術(shù)前患有急、慢性感染性疾病者；(7)合并有自身免疫系統(tǒng)性疾病者；(8)合并有影響血脂的內(nèi)分泌系統(tǒng)疾病，如糖尿病、高血壓者；(9)術(shù)前因腫瘤或其他原因繼發(fā)出血導致貧血者。

1.4 實驗數(shù)據(jù)采集 所有研究對象均于入院后取清晨空腹(至少禁食禁飲12 h)5 mL肘靜脈血置于真空抗凝管內(nèi)送本院臨床醫(yī)學檢驗中心統(tǒng)一處理。術(shù)前血小板/淋巴細胞比率(PLR)由血小板/淋巴細胞的絕對值計算出，中性粒細胞/淋巴細胞比率(NLR)由中性粒細胞/淋巴細胞的絕對值計算出。術(shù)后病理學標本送本院病理學教研室統(tǒng)一處理；病理分級按照WHO 2004膀胱尿路上皮癌惡性程度分級法；病理分期按照UICC 2002年第6版TNM分期法。

2 結(jié) 果

2.1 各組PLR及NLR指標比較 膀胱癌病理級別組與對照組PLR及NLR指標比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；膀胱癌低級別組與高級別組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組PLR及NLR指標比較

2.2 評價PLR和NLR指標的預測診斷價值 PLR的曲線下面積為0.899，95%可信區(qū)間(CI)為0.864～0.935，選取PLR最佳臨界點為141.074時，靈敏度為80.9%，特異度為83.8%；NLR的曲線下面積為0.832，95%CI為0.784～0.881，選取NLR最佳臨界點為3.188時，靈敏度為66.4%，特異度為94.9%。見圖1、2。

圖1 PLR受試者工作特征曲線

2.3 低PLR組與高PLR組臨床病理資料比較 病例中有56例為開放性手術(shù)治療患者，根據(jù)PLR最佳臨界值(141.073 9)將其分為低PLR組和高PLR組。結(jié)果顯示：高PLR組患者的腫瘤病理(T)分期更晚(P<0.05)。見表2。

2.4 低NLR組與高NLR組臨床病理資料比較 根據(jù)NLR最佳臨界值(3.187 5)將56例開放性手術(shù)治療患者分為低NLR組和高NLR組。結(jié)果顯示：高NLR組患者的腫瘤病理分期更晚(P<0.05)，存在局部浸潤及遠處轉(zhuǎn)移的可能性越大，預后則越差。見表3。

圖2 NLR受試者工作特征曲線

組別n病理分期T1T2T3T4低PLR組2615(57.69)8(30.77)3(11.54)0(0)高PLR組30 7(23.33)12(40.00)8(26.67)3(10.00)

表3 低NLR組與高NLR組病理資料比較[n(%)]

2.5 PLR及NLR與膀胱尿路上皮癌的相關(guān)性分析 單因素Logistic回歸法分析顯示，PLR、NLR指標升高增加了膀胱尿路上皮癌的發(fā)病風險，其OR值分別為1.048和2.603。見表4。

表4 PLR及NLR指標與膀胱尿路上皮癌的單因素Logistic回歸法分析

再將單因素分析結(jié)果中有統(tǒng)計學意義的指標(PLR、NLR)納入多因素Logistic分析，結(jié)果顯示：高PLR及高NLR水平均是增加膀胱尿路上皮癌發(fā)病的獨立危險因素(P<0.05)。見表5。

2.6 PLR、NLR指標與膀胱尿路上皮癌病理級別的相關(guān)性分析 通過Logistic危險因素分析，結(jié)果顯示：膀胱尿路上皮癌病理級別組間的PLR及NLR指標差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表6。

表5 PLR及NLR指標與膀胱尿路上皮癌的多因素Logistic回歸法分析

表6 PLR、NLR指標與膀胱尿路上皮癌病理分級的Logistic危險因素分析

3 討 論

膀胱尿路上皮癌是膀胱癌中最常見的病理類型，占膀胱癌的90%～95%[1]。許多研究表明，腫瘤是自身特性和系統(tǒng)性炎性反應相互作用的結(jié)果，機體的自身免疫狀態(tài)和相關(guān)炎性反應的改變與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[2]。炎性反應可通過炎癥介質(zhì)、細胞因子反應出來，也可以通過血液中高表達的炎癥蛋白、炎癥細胞反應出來，它們加速腫瘤細胞的浸潤與轉(zhuǎn)移[3]。近年來，非特異度炎癥和免疫反應已成為腫瘤發(fā)生、發(fā)展的研究熱點[4]。

3.1 中性粒細胞與腫瘤的關(guān)系 中性粒細胞能促進腫瘤的形成與發(fā)展，主要機制包括：(1)中性粒細胞通過釋放彈性蛋白酶、分解組織蛋白及破壞細胞外基質(zhì)，促進新生毛細血管形成，從而加速腫瘤細胞的生長和轉(zhuǎn)移[5]。(2)中性粒細胞通過釋放環(huán)氧化物水化酶-2、前列腺素E2、白細胞介素-1β等細胞因子，損傷血管內(nèi)皮細胞及間質(zhì)細胞，導致血管壁的通透性增加，腫瘤細胞易于透過血管壁發(fā)生血行轉(zhuǎn)移。(3)中性粒細胞通過產(chǎn)生氧自由基物質(zhì)及釋放精氨酸酶-1物質(zhì)，降低T淋巴細胞的增殖能力，抑制T淋巴細胞的免疫監(jiān)視作用，從而導致腫瘤細胞逃避T淋巴細胞的免疫清除。(4)中性粒細胞通過抑制NK細胞的生物學活性，釋放活性基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP-9)，促進腫瘤組織的新生血管形成，刺激腫瘤細胞的快速增殖，加速腫瘤的局部浸潤和遠處轉(zhuǎn)移。(5)中性粒細胞通過介導腫瘤免疫抑制，加速腫瘤的進展。有實驗研究顯示:通過產(chǎn)生一氧化氮合成酶和腫瘤壞死因子-α，中性粒細胞能引起細胞DNA損傷，誘導基因突變，促使結(jié)腸癌的發(fā)生[6]；中性粒細胞可通過釋放氧自由基物質(zhì)損傷肝細胞端粒體DNA，導致肝癌的發(fā)生[7]；中性粒細胞來源的髓過氧化物可催化機體產(chǎn)生次氨酸，損傷肺上皮細胞DNA，引起肺上皮細胞突變，導致肺癌的發(fā)生[8]。(6)中性粒細胞可通過產(chǎn)生促腫瘤生長因子和蛋白酶來促進腫瘤的發(fā)展。腫瘤組織中浸潤的中性粒細胞的數(shù)量與腫瘤的新生血管生成、腫瘤的病理分期及腫瘤的轉(zhuǎn)移顯著相關(guān)，腫瘤組織中浸潤的中性粒細胞的數(shù)量越多，患者的預后情況就越差[9]。

3.2 淋巴細胞與腫瘤的關(guān)系 淋巴細胞是抗腫瘤免疫的重要組成部分。通過針對腫瘤細胞的免疫監(jiān)視，淋巴細胞能特異度識別、直接殺滅腫瘤細胞或者通過釋放一系列細胞因子激活自身免疫防御體系，間接殺滅腫瘤細胞，從而發(fā)揮抗腫瘤免疫的作用。有研究表明，淋巴細胞可通過發(fā)揮細胞毒性效應、釋放細胞因子來抑制腫瘤的增殖、浸潤及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移[10],促使腫瘤細胞凋亡。當腫瘤組織內(nèi)的淋巴細胞數(shù)目減少時，導致腫瘤免疫抑制作用減弱，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率逐漸增加，顯示淋巴細胞數(shù)量與腫瘤的大小、腫瘤的復發(fā)率、腫瘤的轉(zhuǎn)移率及預后情況密切相關(guān)[11]。

3.3 血小板與腫瘤的關(guān)系 血小板能協(xié)調(diào)炎性反應和炎癥應答，亦可通過增加血管密度促進腫瘤的發(fā)展[12]。血小板能影響腫瘤細胞的生長和轉(zhuǎn)移播散，主要機制包括:(1)腫瘤細胞進入血液系統(tǒng)后，誘導血小板聚集在其周圍并將其包裹，從而降低腫瘤細胞的免疫原性，避免激活機體的免疫防御體系，協(xié)助腫瘤細胞逃避免疫系統(tǒng)的免疫監(jiān)視及免疫清除[13]；(2)血小板表面的糖蛋白Ⅱb/Ⅲ復合物與腫瘤細胞表面的整合素相互作用，形成腫瘤細胞-血小板栓子復合體。當血管壁的通透性增加時，腫瘤細胞易于穿透血管壁向外移行，發(fā)生血行播散和組織浸潤[14]；(3)血小板通過產(chǎn)生血管內(nèi)皮生長因子，誘導腫瘤組織的血管內(nèi)皮細胞大量增殖，促進腫瘤組織的新生血管形成，導致腫瘤組織過度增殖[15]；(4)血小板可以在腫瘤細胞與毛細血管內(nèi)皮細胞或內(nèi)皮下基膜部之間形成粘連橋結(jié)構(gòu)，促進腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[16]；(5)腫瘤細胞通過產(chǎn)生血小板生成樣激素及腫瘤相關(guān)炎癥介質(zhì)，促進血小板的增殖；而增殖的血小板又可大量釋放血小板衍生生長因子、血管內(nèi)皮生長因子、血小板因子Ⅳ等，刺激腫瘤細胞增殖及新生血管形成，兩者相互影響，形成惡性循環(huán)，從而影響腫瘤的惡化程度及轉(zhuǎn)移傾向[17]。

PLR和NLR指標是反映全身炎性反應負荷及亞臨床炎癥狀態(tài)的新指標，被用于很多臨床研究[18]，特別是在腫瘤、心血管疾病及代謝性疾病等方面的研究日趨增多。PLR和NLR指標獲取方便，對多種惡性腫瘤患者的預后具有預示作用[19]，是評估腫瘤患者預后的重要預測指標。目前證實，PLR和NLR指標是反映結(jié)直腸癌、肝癌、乳腺癌、胃癌和軟組織肉瘤等腫瘤患者預后不良的獨立危險因素[20]。本研究發(fā)現(xiàn)：PLR指標及NLR指標均是影響膀胱尿路上皮癌發(fā)病的獨立危險因素，且與膀胱尿路上皮癌的發(fā)病及病理分期程度呈正相關(guān)關(guān)系。及時糾正患者機體炎癥狀態(tài)對于降低膀胱尿路上皮癌的發(fā)生，提高膀胱尿路上皮癌患者的生存質(zhì)量均有一定的幫助。