細菌耐藥性監測在臨床微生物檢驗中的應用價值分析

林楚楚 鄭文萍

深圳市人民醫院感染管理科，廣東深圳 518020

細菌耐藥性是在臨床藥物治療過程中由于細菌耐藥性基因的存在導致細菌自身耐藥性的產生，以及同一類抗菌藥物被長期不合理使用等因素，造成抗菌藥物對菌株的作用效果急劇降低[1]。并且耐藥菌株被繁殖的同時，細菌對抗菌藥物的耐藥性也隨之大幅度提高[2]。患者若不能得到及時有效的治療，隨著病情惡化可嚴重危害其健康及生命安全。因此，進行有效的細菌耐藥性監測尤為必要[3]。本研究旨在通過對臨床常見標本的細菌耐藥性監測數據進行分析，評估其在臨床微生物檢驗中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2013 年11 月～2016 年11 月在我院臨床所收集的尿標本、血液標本、痰標本及分泌物標本中分離出的500 例致病菌株，作為研究對象進行對比分析。其中男性標本255 例，女性標本245 例，年齡11 ～76 歲，平均（39.98±6.12）歲。痰液標本122 例，咽喉拭子標本78 例，血標本42 例，中段尿標本58 例，腦脊液標本13 例，分泌物標本67 例，糞便標本70 例，胸水標本23 例，腹水標本17 例，其他標本10 例。兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經本院倫理委員會批準。

1.2 方法

將收集的尿、血液、痰及分泌物標本在生物安全柜中接種于血瓊脂培養基及巧克力培養基上，置于培養箱內培養，并肉眼觀察其生長狀況。若有細菌生長，需進一步從菌落的大小、形狀、邊緣的形狀、顏色、表面光滑或粗糙、透明度等形態特征上，觀察菌落是否為純一菌落，挑選可疑的單個菌落再次劃線，進行純化培養。然后采用VITEK 系統進行細菌自動化鑒定試驗。使用肉湯稀釋的方法進行抗菌藥物最小的抑菌濃度檢測[4]。

1.3 統計學處理

將本研究結果錄入SPSS20.0 軟件進行統計描述。標本中致病菌株、耐藥性檢測結果均由雙人錄入并利用[n（%）] 表示，計數資料行χ2檢驗，P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 致病菌株分布情況

對于臨床所收集的尿標本、血液標本、痰標本及分泌物標本中分離出的500 例致病菌株中，其中革蘭陽性菌為148 株、革蘭陰性菌為352 株。其中凝固酶陰性葡萄球菌檢出率最高，其次為銅綠假單胞菌、大腸埃希菌。對于臨床所收集的尿標本、血液標本、痰標本及分泌物標本中分離出的500 例致病菌株中，革蘭陰性菌出現的比例高于革蘭陽性菌（χ2=166.464，P＜0.05）。見表1。

2.2 細菌耐藥性監測結果分析

變形桿菌對氨芐西林耐藥性最高為92.09%，腸桿菌屬對頭孢唑林的耐藥性最高為42.78%，金黃色葡萄球菌中MRSA[ 耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus）] 對 青霉素和氨芐西林耐藥性均達到100%，凝固酶陰性葡萄球菌中MRCNS 及MSCNS 對青霉素及氨芐西林耐藥性分別為100%、100%、96.72% 及89.89%，腸球菌屬對頭孢唑林的耐藥性最高為32.48%。見表2。

表1 致病菌株分布情況[n（%）]

表2 細菌耐藥性監測結果分析（%）

3 討論

自1928 年青霉素問世以來，20 世紀40 年代青霉素投入使用，抗生素對人體健康做出了巨大貢獻[5]，由于耐藥性基因的存在導致細菌自身耐藥性產生，并且抗生素在臨床治療中被大規模應用[6]，基因突變引起細菌耐藥、細菌表型耐藥、持留現象、細菌固有耐藥、群體感應與微生物耐藥等造成臨床多重耐藥菌株生成，其在很大程度上抑制了臨床用藥效果。耐藥菌的出現，可能導致多種感染陷入到無藥可用的狀態[7-9]。保護人體對抗菌藥物的耐藥性成為了目前至關重要的考慮因素。2011 年，WHO 提出了抵御耐藥性的號召，并在2014 年公布了全球抗生素耐藥性報告[10-12]。2016 年9 月杭州舉行的二十國集團領導人峰會重新提出了抗生素耐藥性的問題。預計到2050 年全球每年可能有一千萬人由于耐藥菌感染而死亡。我國在2016 年8 月下旬引發了《遏制細菌耐藥國家行動》，將從全國大局出發，綜合治理抗生素使用，應對抗生素耐藥[13-15]。

為盡量減少因抗生素的過度使用而導致藥物的使用效果受到極大的影響。細菌耐藥性監測在臨床微生物檢驗中起到了至關重要的作用。臨床應注重細菌耐藥性監測在臨床微生物檢驗中的作用，提升臨床治療的有效率，最大程度上保證藥物被適量使用。

本研究中革蘭陰性菌檢出率70.40% 顯著高于革蘭陽性菌29.6%，且細菌中凝固酶陰性葡萄球菌檢出率最高，其次為銅綠假單胞菌、大腸埃希菌。對不同菌株進行細菌耐藥性監測，不同菌株對不同抗菌藥物的耐藥性不同，腸桿菌屬對氨芐西林（9.56%）較其他菌株敏感度高，腸球菌對左氧氟沙星敏感度高（6.72%），MSSA( 甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌Methicillin-Sensitive Staphylococcus Aureus，MSSA.) 對左氧氟沙星耐藥性差（5.56%）。分析認為，ESBLs( 超廣譜β- 內酰胺酶，Extended Spectrum Beta-Lactamases) 在大腸埃希菌以及克雷伯菌在使用過程中被生成，因而β- 內酞胺類等藥物被大腸埃希菌以及克雷伯菌在很大程度上起到抗藥作用及耐藥作用，臨床用藥治療的效果被極大程度上抑制了，致藥物的使用效果受到極大的影響。β- 內酞胺類- 酶抑制劑復合物對于頭孢他啶耐藥率低，敏感性好，可以在臨床治療過程中被廣泛使用。左氧氟沙星對銅綠假單胞菌的敏感度高，耐藥性差，可以在臨床治療過程中被開展。細菌耐藥性監測在臨床微生物檢驗中的應用開展，保證藥物的治療效率，最大程度上降低臨床上抗生素的過度使用，為臨床合理用藥起到決定性作用。

綜上所述，在細菌耐藥性逐漸升高及多重耐藥菌株的生成的環境下，細菌耐藥性監測在臨床微生物檢驗中起到至關重要的作用，使得細菌耐藥性的變化形勢被準確的掌握。進而可給予患者適量的藥物進行臨床治療，最大程度上減少抗生素的過度使用，為臨床合理操作提供較高的科學依據，值得推廣應用于臨床。