自體CIK細胞肝動脈灌注聯合放化療對原發性肝癌患者免疫功能及生活質量的影響

薛 麟 肖 翔

原發性肝癌(肝癌)是臨床常見的惡性腫瘤之一，在我國的發病率較高，居世界首位，每年約有30多萬人死于肝癌，占世界肝癌死亡率的55%[1-2]。由于肝癌患者早期臨床癥狀隱匿，侵襲性較強，且大多伴有不同程度的肝炎、肝硬化等，手術切除率不足20%[3]，且手術患者的組織損傷較大，術后恢復慢，預后較差，生存率低[4]。對于中晚期肝癌的患者，常采用非手術方法進行治療，包括肝動脈介入治療、系統治療、放療和中醫藥治療[5]。肝動脈介入治療是首選，可延長患者的生存時間，改善患者的生活質量，但同時該方法不能完全去除腫瘤病灶，殘留率高達90%，且對患者的免疫功能會造成影響[6]。放療特別是三維適形放射治療可顯著提高原發性肝癌的治療效果[6]。近年來，隨著細胞免疫學和分子生物學的不斷發展，肝癌的生物免疫治療逐步應用于臨床，自體細胞免疫治療成為目前常用的方法[7]。由于單一治療手段的局限性，聯合治療成為提高肝癌臨床效果的重要手段。因此，本文探討了自體CIK細胞肝動脈灌注聯合放化療對原發性肝癌患者免疫功能及生活質量的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月至2018年1月我院診治的原發性肝癌患者98例進行回顧性分析，所有患者均符合原發性肝癌的診斷和分級標準。按照治療方法不同分為2組，對照組給予肝動脈介入化療和三維適形放療，觀察組在對照組的基礎上給予自體CIK細胞肝動脈灌注治療。對照組50例，男性33例，女性17例；年齡42～65歲，平均(51.32±5.41)歲；Child-Pugh分級：A級26例，B級24例；腫瘤數目：單發38例，多12例。觀察組48例，男性32例，女性16例；年齡41～65歲，平均(50.84±5.12)歲；Child-Pugh分級：A級25例，B級23例；腫瘤數目：單發37例，多11例。2組患者一般資料相比無統計學差異(P>0.05)，具有可比性。

1.2 入選標準

納入標準：①所有患者均經病理學診斷確診；②Child-Pugh分級為A級和B級；③病灶無遠端轉移；④預計生存期6個月以上。排除標準：①合并其他器官功能障礙者；②嚴重凝血功能異常者；③對本研究所用藥物過敏者；④妊娠哺乳期婦女及精神異常者。

1.3 方法

對照組給予肝動脈介入化療和三維適形放療。肝動脈介入化療：經股動脈右側穿刺，在超滑導絲引導下將導管置于腹腔干造影，明確血管走向及腫瘤供血動脈，將微導管超選至腫瘤供血動脈進行化療藥物灌注，順鉑60～100 mg，絲裂霉素10～30 mg，阿霉素40～60 mg。完成后用碘油10～20 ml栓塞，再用明膠海綿栓塞，4～6周重復介入化療1次。三維適形放療：采用螺旋CT掃描患者中腹部，將獲得的數據進行三維立體重建，明確腫瘤大體區域及體積，由醫生和物理師勾畫患者腫瘤靶區及危及器官，依據腫瘤靶區及危及器官確定入射方向，根據劑量曲線和體積直方圖對權重和射入方向進行調整，采用西門子直線加速器進行放療，使腫瘤邊緣總劑量達(46～60)Gy/(23～30)F/(4.5～6)W，全肝平均劑量小于30 Gy。在第2次化療結束后1周開始放療，放療結束1個月后酌情進行后續化療。

觀察組：在對照組的基礎上給予自體CIK細胞肝動脈灌注治療。肝動脈介入化療前采集患者的自體外周血，分離并培養CIK細胞，細菌和真菌培養陰性，細胞數量合格后進行生理鹽水洗滌，用100 ml生理鹽水重懸細胞制備成回輸液(含20%人血蛋白5 ml，IL-2 20萬U)。經股動脈左側穿刺，在超滑導絲引導下將導管置于肝固有動脈，造影證實后將CIK細胞行肝固有動脈灌注，時間30 min，完成后留置導管，肝素水封管，1次/天，連續灌注3 d，3 d灌注完成后拔除導管，穿刺點按壓后進行加壓包扎。每月培養1次，連續灌注3個月，治療結束后2～3周檢測外周血T細胞亞群。

1.4 觀察指標

①比較2組患者的臨床有效性。按照實體瘤評價標準[8]對患者的治療效果進行評價，完全緩解：基線病灶消失且維持4周；部分緩解：基線病灶長徑總和縮小≥30%并維持4周；穩定：基線病灶長徑總和縮小，但未達到緩解水平，或增加但未達到進展水平；進展：基線病灶長徑總和增加≥20%或有新病灶出現。有效率=完全緩解率+部分緩解率。②比較2組患者免疫功能相關指標的變化情況，分別于治療前和治療結束后2～3周抽取患者空腹靜脈血5 ml，采用EPICSXI流式細胞儀檢測外周血T淋巴細胞群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)的變化情況。③比較2組患者的生活質量，分別于治療前后采用KPS評分法對患者的生活質量進行評價，改善：KPS評分提高>10分；穩定：KPS評分提高或下降≤10分；惡化：KPS評分下降>10分。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 2組患者治療效果比較

觀察組的有效率為91.67%(44/48)，顯著高于對照組74.00%(37/50)，差異有統計學意義(χ2=5.331，P=0.021)，見表1。

表1 2組患者治療效果比較(例，%)

2.2 2組患者治療前后外周血T淋巴細胞群變化情況

2組患者治療前CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平無統計學差異(P>0.05)，治療后2組CD3+、CD4+、和CD4+/CD8+顯著升高，CD8+顯著降低，且觀察組變化更明顯(P<0.05)，見表2。

表2 2組患者治療前后外周血T淋巴細胞群變化情況

注：a為與本組治療前相比，P<0.05，b為與治療后對照組相比，P<0.05。

2.3 2組患者生活質量比較

觀察組患者生活質量改善率顯著高于對照組(P>0.05)，見表3。

表3 2組患者生活質量比較(例，%)

3 討論

目前肝癌的發病率逐年增加，且死亡率較高，嚴重影響患者的健康和生活質量[9]。隨著醫學影像及診斷技術的不斷發展及高危人群肝癌早期篩查的普及，肝癌的檢出率逐年上升[10]。手術和肝移植是根治肝癌的重要手段，也是目前臨床治療的首選[11]。但手術預后差，生存率低，肝移植遠期效果不理想，且由于合并肝炎、肝硬化等原因，肝癌患者的手術率較低，大部分患者需采用非手術方式進行治療[12]。肝動脈介入治療聯合放療成為目前非手術治療肝癌的首選，兩者聯合可增強治療效果，提高腫瘤的壞死率，但仍然存在一定的問題，如放化療后患者的免疫功能低下、不利于患者的康復等[13]。

自體免疫細胞治療以多種細胞因子誘導體外血單個核細胞，分離細胞誘導的殺傷細胞(CIK)，應用于肝癌患者的治療[14]。CIK是T細胞為主要效應細胞的特質性細胞群，具有抗腫瘤特性，可以非特異性免疫的方式根除患者體內的小微腫瘤或殘留病灶，重建患者的免疫功能[15]。對于自體免疫細胞的輸注方式對治療效果的影響，有研究顯示[16]，肝動脈灌注自體DC-CIK細胞對原發性肝癌的治療效果優于靜脈回輸自體DC-CIK細胞。因此，本研究采用肝動脈灌注的方式進行自體免疫細胞灌注治療。本研究結果顯示，觀察組患者的臨床有效率顯著高于對照組，且CD3+、CD4+、CD8+和CD4+/CD8+水平均顯著優于對照組，說明自體CIK細胞肝動脈灌注聯合放化療可顯著提高原發性肝癌患者的臨床治療效果，改善患者的免疫功能。這是由于CIK細胞兼具T淋巴細胞強大的抗腫瘤活性和自然殺傷細胞的殺瘤活性，且在體內外增值能力較強，是一種具有高效殺瘤抑瘤活性的效應細胞[17]。自體免疫細胞進入人體后，效應細胞能否直接到達腫瘤部位發揮作用是該治療方法的關鍵。本文采用肝動脈灌注治療避免了肝首過效應，可直接到達腫瘤部位并在肝臟聚集，提高局部濃度，從而提高腫瘤的殺滅作用，而分3次輸注更有利于CIK細胞流向腫瘤區域，促進其增殖活化，形成免疫連續刺激，從而增強療效[18]。

生活質量是評價癌癥患者治療效果的重要指標之一，本研究結果顯示，觀察組患者的生活質量改善率顯著高于對照組，說明自體CIK細胞肝動脈灌注聯合放化療可顯著改善患者的生活質量，可能與其可有效抑制并殺滅腫瘤，提高患者的免疫功能有關。

綜上所述，自體CIK細胞肝動脈灌注聯合放化療可顯著提高原發性肝癌的臨床治療效果，提高患者的免疫功能和生活質量，值得臨床借鑒。