中藥干預(yù)痰證動(dòng)物模型系統(tǒng)評(píng)價(jià)研究

尹 玫，李思琦，王 洋，劉 悅，張 哲，楊關(guān)林*

(1.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 116600；2.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧 沈陽(yáng) 110032)

痰證為痰濁之邪滯留于體內(nèi)的病證，臨床上根據(jù)痰濁因、證部位及癥狀表現(xiàn)的不同，有風(fēng)痰、燥痰、濕痰、寒痰、熱痰等病證[1]。“百病皆由痰作崇”，有研究顯示痰證相關(guān)疾病可出現(xiàn)在多個(gè)系統(tǒng)，如循環(huán)系統(tǒng)的冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、高血壓、急性心肌梗死；神經(jīng)系統(tǒng)的腦梗死、缺血性腦血管病；呼吸系統(tǒng)的肺惡性腫瘤、肺炎、COPD；內(nèi)分泌代謝系統(tǒng)的非胰島素依賴(lài)型糖尿病、代謝綜合征、高脂血癥；生殖系統(tǒng)的不孕癥等疾病[2]。構(gòu)建動(dòng)物模型是研究痰證的重要方法，本研究擬采用Meta分析方法進(jìn)行中藥干預(yù)痰證動(dòng)物模型的系統(tǒng)評(píng)價(jià)，為后續(xù)的痰證動(dòng)物模型研究提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 檢索策略

由兩位研究者獨(dú)立篩選文獻(xiàn)，遇到有爭(zhēng)議的地方和第三位研究者共同協(xié)商。分別以痰證、中醫(yī)、中西醫(yī)、中藥、動(dòng)物模型、草藥等為關(guān)鍵詞或主題詞檢索中文數(shù)據(jù)庫(kù)，包括CNKI、CBM、VIP、萬(wàn)方數(shù)據(jù)庫(kù)。檢索時(shí)間為建庫(kù)到2018年10月1日。

1.2 文獻(xiàn)納入標(biāo)準(zhǔn)

研究對(duì)象為實(shí)驗(yàn)性痰證動(dòng)物模型，不限定動(dòng)物模型的構(gòu)建方式。干預(yù)措施為中藥組給予中藥或中成藥治療，模型組給予安慰劑對(duì)照治療。觀察指標(biāo)為血清總膽固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇。語(yǔ)種限制為中文。

1.3 文獻(xiàn)排除標(biāo)準(zhǔn)

排除：①臨床研究和綜述類(lèi)文獻(xiàn)；②有關(guān)細(xì)胞及其他體外實(shí)驗(yàn)的文獻(xiàn)；③干預(yù)措施為非中藥治療的文獻(xiàn)；④無(wú)法獲得數(shù)據(jù)的研究。重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)僅保留1篇。

1.4 文獻(xiàn)資料提取

由兩位研究者獨(dú)立進(jìn)行資料提取，遇到有爭(zhēng)議的地方和第三位研究者共同商議。包括動(dòng)物類(lèi)型、論文類(lèi)型、干預(yù)措施、結(jié)局指標(biāo)等，并交叉互審。

1.5 文獻(xiàn)偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

評(píng)估動(dòng)物實(shí)驗(yàn)質(zhì)量的條目國(guó)際上有很多，但缺乏統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)。本研究采用SYRCLE動(dòng)物實(shí)驗(yàn)偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估工具推薦的6類(lèi)偏倚類(lèi)型共10個(gè)條目進(jìn)行評(píng)價(jià)：選擇性偏倚、實(shí)施偏倚、測(cè)量偏倚、失訪(fǎng)偏倚、報(bào)告偏倚、其他偏倚。結(jié)果以“是”“否”和“不確定”分別代表低偏倚風(fēng)險(xiǎn)、高偏倚風(fēng)險(xiǎn)和不確定偏倚風(fēng)險(xiǎn)。由兩位研究者各自獨(dú)立閱讀文獻(xiàn)，并單獨(dú)進(jìn)行偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，遇有不一致的評(píng)價(jià)結(jié)果時(shí)需由兩人討論解決，意見(jiàn)一致后通過(guò)，不一致時(shí)需由本篇通訊作者參與討論解決以達(dá)成一致結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

使用Revman 5.3軟件進(jìn)行Meta分析。計(jì)數(shù)資料采用比值比(OR)或相對(duì)危險(xiǎn)度(RR)為療效分析統(tǒng)計(jì)量；計(jì)量資料采用均數(shù)差(MD)或標(biāo)準(zhǔn)化均數(shù)差(SMD)，各效應(yīng)量均以 95%可信區(qū)間(95%CI)表示。最后，對(duì)納入的指標(biāo)采用漏斗圖分析納入文獻(xiàn)的偏倚情況，最后對(duì)研究結(jié)果進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1 文獻(xiàn)篩選結(jié)果

共檢索到中文文獻(xiàn) 328篇。剔除重復(fù)文獻(xiàn) 31篇，閱讀文題及摘要篩除臨床研究、綜述、細(xì)胞研究及其他體外研究文獻(xiàn)共 168篇，閱讀全文剔除非線(xiàn)粒體氧化應(yīng)激損傷相關(guān)研究、檢測(cè)標(biāo)本不明確、標(biāo)本制備方法缺陷、數(shù)據(jù)不完整、重復(fù)發(fā)表的文獻(xiàn)共120篇，最終納入文獻(xiàn)9篇，所有實(shí)驗(yàn)均在中國(guó)進(jìn)行，均以中文發(fā)表。

2.2 文獻(xiàn)基本特征及偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

結(jié)果見(jiàn)表2。

2.3 Meta分析結(jié)果

Meta分析結(jié)果顯示：在改善動(dòng)物模型的痰證指標(biāo)方面，中藥組較模型組改善效果更明顯。10篇文獻(xiàn)報(bào)道了血清TG變化，Meta分析結(jié)果顯示：中藥組可以明顯降低血清TG水平(P<0.000 01)。9篇文章報(bào)道了血清TC變化，Meta分析結(jié)果顯示：中藥組可以明顯降低血清TC水平(P<0.000 01)。5篇文章報(bào)道了血清HDL-C變化，Meta分析結(jié)果顯示：中藥組可以明顯升高血清TC水平(P<0.000 01)。6篇文章報(bào)道了血清LDL-C變化，Meta分析結(jié)果顯示：中藥組可以明顯降低血清LDL-C水平(P<0.000 01)。

2.4 發(fā)表偏倚

10篇文獻(xiàn)評(píng)價(jià)血清TG制作了漏斗圖，分別以MD為橫坐標(biāo)，SE為縱坐標(biāo)，文獻(xiàn)漏斗不對(duì)稱(chēng)，可能發(fā)生偏倚。9篇文獻(xiàn)評(píng)價(jià)血清TC制作了漏斗圖，分別以MD為橫坐標(biāo)，SE為縱坐標(biāo)，文獻(xiàn)漏斗圖不對(duì)稱(chēng)，可能發(fā)生偏倚。

3 討論

痰證主要辨證指標(biāo)為咳痰、喉中痰鳴、舌苔膩、脈滑；次要辨證指標(biāo)為胸腹痞滿(mǎn)、嗜睡、肥胖、口干不飲、惡心嘔吐、口眼歪斜[3]。痰證與脂質(zhì)代謝關(guān)系密切，一般用TC、TG、HDL-C、LDL-C作為微觀指標(biāo)[4]。HDL-C是抗動(dòng)脈粥樣硬化的脂蛋白，是體內(nèi)的保護(hù)因子。LDL-C是被氧化的低密度脂蛋白膽固醇，當(dāng)其過(guò)量時(shí)，易引起動(dòng)脈硬化。本研究發(fā)現(xiàn)，中藥干預(yù)痰證動(dòng)物模型在療效評(píng)價(jià)指標(biāo)方面，可以降低血清TC、TG、LDL-C，升高血清HDL-C，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但按照動(dòng)物不同屬種進(jìn)行亞組分析，結(jié)果顯示中藥對(duì)小鼠模型TG結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，中藥對(duì)地鼠模型TC結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，中藥對(duì)大鼠模型TC結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，中藥對(duì)小鼠模型HDL-C結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，中藥對(duì)地鼠模型LDL-C結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，中藥對(duì)小鼠模型LDL-C結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。我們對(duì)這些亞組納入的文獻(xiàn)進(jìn)行了原文分析，發(fā)現(xiàn)可能是由于小鼠模型的種類(lèi)不同導(dǎo)致的，目前痰證動(dòng)物模型的建立比較少，而且缺乏對(duì)動(dòng)物屬種的統(tǒng)一要求，因此，建議后續(xù)開(kāi)展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究應(yīng)多關(guān)注此方面內(nèi)容，高質(zhì)量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)評(píng)價(jià)會(huì)減少實(shí)驗(yàn)過(guò)程中原材料的浪費(fèi)，避免一些不必要的研究[5]。

納入的9篇文獻(xiàn)均為國(guó)內(nèi)研究者發(fā)表的中文文獻(xiàn)，且大部分文獻(xiàn)報(bào)告指標(biāo)均為陽(yáng)性結(jié)果，因此，研究結(jié)論可能存在發(fā)表偏倚。本研究根據(jù)檢索策略?xún)H對(duì)中文數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行了全面檢索，但在外文數(shù)據(jù)庫(kù)可能也會(huì)出現(xiàn)此類(lèi)研究，因此，可能會(huì)漏檢非中文撰寫(xiě)的相關(guān)文獻(xiàn)，導(dǎo)致納入文獻(xiàn)不夠全面。

通過(guò)本研究發(fā)現(xiàn)，中藥可通過(guò)干預(yù)痰證動(dòng)物模型來(lái)發(fā)揮臨床療效，但此類(lèi)中醫(yī)藥研究仍缺乏系統(tǒng)性。此類(lèi)研究在是否采用盲法和分配隱藏等方面報(bào)道不充分，且研究造模方法、中藥制劑形式、干預(yù)周期、給藥方式等差異將可能影響結(jié)果的可靠性，期待大量可靠的研究進(jìn)一步提供痰證干預(yù)動(dòng)物模型的療效證據(jù)。

圖1 總膽固醇漏斗圖

圖2 甘油三酯漏斗圖

表1 Meta分析結(jié)果

表2 文獻(xiàn)偏倚風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果

表3 文獻(xiàn)基本特征