五加參歸芪精改善睡眠功能的時(shí)效關(guān)系研究

徐 杰，姜文月*，王寶成，王美慧，邢 成，肖俊美，楊明爽，李芯茹

(1.吉林省現(xiàn)代中藥工程研究中心有限公司，吉林 長(zhǎng)春 130012；2.通藥制藥集團(tuán)股份有限公司，吉林 通化 134001)

五加參歸芪精由刺五加、黃芪、當(dāng)歸3味中藥組方而成，具有扶正固本、補(bǔ)氣固表、補(bǔ)血養(yǎng)血的功效，用于久病衰弱、失眠自汗、腰膝酸軟、氣短心悸等。近年來(lái)，對(duì)五加參歸芪精的研究報(bào)道僅有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，如李春實(shí)等[1]建立五加參歸芪精質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，尚未見(jiàn)有關(guān)于五加參歸芪精改善睡眠功能時(shí)效關(guān)系的研究報(bào)道。

本研究采用戊巴比妥鈉誘導(dǎo)催眠模型開(kāi)展本品在改善睡眠功能方面的藥效學(xué)研究，依據(jù)產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)用法與用量要求，選取每日服用10 mL、20 mL的低、高兩組劑量，設(shè)置3、7、14、21天的給藥周期，考察五加參歸芪精改善睡眠功能的藥效作用及時(shí)效關(guān)系，為臨床用藥提供參考。

1 材料與儀器

1.1 動(dòng)物

ICR小鼠，雄性，體重18～22 g，由長(zhǎng)春市億斯實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為SCXK(吉)-2016-0003。

1.2 藥物與試劑

五加參歸芪精(批號(hào)：180519)由通藥制藥集團(tuán)股份有限公司提供；復(fù)方刺五加片(批號(hào)：180403)由吉林天力泰藥業(yè)有限公司提供；戊巴比妥鈉(批號(hào)：69020100)購(gòu)自北京化學(xué)試劑廠(chǎng)；氯化鈉注射液(批號(hào)：1805090401)購(gòu)自吉林省都邦藥業(yè)股份有限公司。

1.3 儀器

JY2003電子天平(上海舜宇恒平科學(xué)儀器有限公司)。

2 方法

2.1 給藥劑量

按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)用法與用量要求，口服，每日1～2次，每次10 mL，故選取每日服用10 mL、20 mL的低、高劑量。每人按平均60 kg算，10 mL/d/人，折算小鼠劑量為1.50 mL/kg；20 mL/d/人，折算小鼠劑量為3.03 mL/kg。

2.2 戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間試驗(yàn)[2-12]

將雌性小鼠隨機(jī)分為空白組、陽(yáng)性藥復(fù)方刺五加片組、五加參歸芪精低劑量和高劑量組，每組10只。末次給藥后1 h各鼠腹腔注射戊巴比妥鈉50 mg/kg，以注射戊巴比妥鈉開(kāi)始至小鼠翻正反射消失為睡眠潛伏期，以翻正反射消失至恢復(fù)時(shí)間為睡眠持續(xù)時(shí)間。

2.3 戊巴比妥鈉閾下劑量催眠試驗(yàn)[2-12]

將雌性小鼠隨機(jī)分為空白組、陽(yáng)性藥復(fù)方刺五加片組、五加參歸芪精低劑量和高劑量組，每組10只。末次給藥后1 h各鼠腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg，觀(guān)察記錄30 min內(nèi)入睡動(dòng)物數(shù)(動(dòng)物翻正反射消失達(dá)1 min以上者)。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析，組間比較采用雙側(cè)獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 戊巴比妥鈉閾下催眠的時(shí)效關(guān)系

與空白組相比，陽(yáng)性藥復(fù)方刺五加片組給藥3天開(kāi)始起效，3、7、14、21 天均顯著提高小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量時(shí)的入睡率；五加參歸芪精低劑量各給藥周期入睡率均無(wú)顯著性差異；五加參歸芪精高劑量組給藥3天開(kāi)始起效，3、7、14、21 天均顯著提高小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量時(shí)的入睡率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1。

3.2 戊巴比妥鈉閾上睡眠時(shí)間的時(shí)效關(guān)系

與空白組相比，陽(yáng)性藥復(fù)方刺五加片給藥3 天開(kāi)始起效，3、7、14、21 天均顯著延長(zhǎng)閾上劑量睡眠持續(xù)時(shí)間(P<0.05，P<0.001)，睡眠潛伏期均無(wú)顯著性差異(P>0.05)；五加參歸芪精低劑量組睡眠潛伏期和睡眠持續(xù)時(shí)間均無(wú)顯著性差異(P>0.05)；五加參歸芪精高劑量組續(xù)給藥3 天開(kāi)始起效，顯著延長(zhǎng)閾上劑量睡眠持續(xù)時(shí)間(P<0.05，P<0.01)，縮短睡眠潛伏期(P<0.05)。見(jiàn)表2。

綜合考量閾下與閾上催眠實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在設(shè)置的時(shí)效考察周期內(nèi)，五加參歸芪精低劑量組始終未起效，而五加參歸芪精高劑量組從給藥第3天便開(kāi)始起效，隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，始終維持顯著的藥效作用，表現(xiàn)為提高小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量時(shí)的入睡率，延長(zhǎng)閾上劑量睡眠持續(xù)時(shí)間，縮短睡眠潛伏期，呈現(xiàn)良好的時(shí)效關(guān)系。即每日服藥3.03 mL/kg，服用3 天達(dá)到良好的改善小鼠睡眠功能。

表1 五加參歸芪精對(duì)戊巴比妥鈉閾下催眠量的影響

組別給藥劑量睡眠潛伏期(min)3天7天14天21天空白組—6.625±2.9256.375±2.9734.444±2.6984.200±1.317復(fù)方刺五加片0.18g/kg6.200±3.0115.571±2.6374.500±1.6045.571±2.070低劑量組1.50mL/kg4.875±2.0319.167±4.5356.143±2.0355.444±2.297高劑量組3.03mL/kg4.000±1.803# 3.556±2.186# 2.222±1.093# 2.200±1.135# #組別給藥劑量睡眠持續(xù)時(shí)間(min)3天7天14天21天空白組—8.857±5.81511.143±8.33515.571±8.96016.375±6.413復(fù)方刺五加片0.18g/kg41.000±22.435# #33.000±12.672# # # 40.429±22.751#33.556±16.734#低劑量組1.50mL/kg15.444±9.36915.200±5.89113.571±11.77412.000±6.205高劑量組3.03mL/kg40.400±25.812# #35.167±17.440# #36.250±19.129#39.500±24.190#

注：與空白組比較，# # #P<0.001，# #P<0.01，#P<0.05。

4 討論

本研究采用戊巴比妥鈉誘導(dǎo)催眠模型考察本品在改善睡眠功能方面的藥效作用，在產(chǎn)品使用說(shuō)明書(shū)每日服用最低與最高服用劑量下設(shè)計(jì)不同給藥周期，初步闡明五加參歸芪精對(duì)該適應(yīng)證的時(shí)效關(guān)系，明確最佳給藥劑量與用藥時(shí)間。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明綜合考量閾下與閾上催眠實(shí)驗(yàn)結(jié)果，在設(shè)置的時(shí)效考察周期內(nèi)，五加參歸芪精低劑量組始終未起效，而五加參歸芪精高劑量組從給藥第3天便開(kāi)始起效，隨著用藥時(shí)間的延長(zhǎng)，始終維持顯著的藥效作用，表現(xiàn)為提高小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量時(shí)的入睡率，延長(zhǎng)閾上劑量睡眠持續(xù)時(shí)間，縮短睡眠潛伏期，呈現(xiàn)良好的時(shí)效關(guān)系。即每日服藥3.03 mL/kg，服用3天達(dá)到良好的改善小鼠睡眠功能。