穴位埋線關元穴、腎俞穴對慢性前列腺炎大鼠IgG和血清Zn的影響

張晟杰，高 玲，李直兵，梁 進，金純純，李 嘉

(貴州中醫藥大學，貴州 貴陽 550025)

慢性前列腺炎(chronic prostatitis，CP)是一種與復發性下尿路感染有關，繼發于駐留在前列腺內的局灶性尿致病菌或慢性盆腔疼痛綜合征(CPPS)，好發于中老年男性，其特征是盆腔或會陰疼痛，前列腺組織和分泌物可能檢測到炎癥變化[1]。研究顯示[2]，我國CP的主要病因為飲酒、辛辣食物、久坐、長時間憋尿、尿道炎、焦慮等，且與個人生活方式、環境因素、心理因素息息相關。目前還沒有統一、規范的治療方法，因此尋求有效的治療方案越來越重要。免疫球蛋白G(Immunoglobulin G，IgG)占血清Ig的75%，在機體免疫中起保護作用，研究顯示[3]，在晚期前列腺癌患者中可以檢測到多種IgG反應，提示IgG可用于檢測患前列腺癌的風險。鋅元素(Zn)一直被認為與前列腺的健康有關，主要作用是維持前列腺組織結構和生理功能處于穩定狀態，前列腺液中Zn的含量對于自身抗前列腺炎癥反應具有十分重要的臨床意義。本研究觀察簡易埋線關元穴和腎俞穴對瓊脂所致慢性非細菌性前列腺炎大鼠的前列腺勻漿IgG和血清Zn的影響，以探討其治療慢性前列腺炎的機制。

1 材料

1.1 實驗動物與分組

SPF級SD雄性大鼠40只，9～10周齡，體重(280±350)g，由貴陽中醫學院針灸推拿學院實驗中心提供。隨機分籠飼養，室內溫度控制在20～25 ℃之間，濕度控制在40%～50%，明暗周期12 h，定時定量喂養，由專人進行喂養及清潔大鼠生存環境。本研究符合《關于善待動物的指導性意見》的相關規定。

1.2 主要試劑

10%中性緩沖福爾馬林固定液(廣州妙博生物科技有限公司提供)；0000號鉻制羊腸線(上海金環醫療有限公司)；標準馬抗人IgG血清(抗體)(北京生物制品研究所生產)；pH7.2PBS(00000203上海北諾生物科技有限公司)；瓊脂粉(A1296-500G上海北諾生物科技有限公司)；IgG試劑盒(IC-IgG-Ch 上海鈺博生物科技有限公司)。

1.3 主要儀器

6號一次性注射針頭(浙江康德萊醫療器械公司)；一次性埋線針(濟南思卓醫療器械有限公司)；肝素抗凝管(JC-051上海優予生物科技有限公司)；kimble微量勻漿器(749540-0000 美國Kimble)；離心機(ROTOFIX32A 德國Hettich)； 3 mm打孔器(上海玉研科學儀器有限公司)；10 μL微量加樣器(BL-HC-0570 上海博光生物科技有限公司)；紫外可見分光光度計(E0955 上海碧云天生物技術有限公司)。

1.4 實驗方法

1.4.1 慢性前列腺炎大鼠造模和分組 定時定量喂養1周后，觀察大鼠無異常即可開始進行造模。將40只大鼠隨機分為假手術組、模型對照組、腎俞組、關元組，共4組，每組10只，除假手術組外，其余各組大鼠均采用文獻方法[4]造模，即從前列腺雙側背葉各注射滅菌的20 g/L(大鼠質量/注射劑量)瓊脂溶液0.1 mL，假手術組于同樣部位、同樣方法注入9 g/L(大鼠質量/注射劑量)氯化鈉溶液0.2 mL，隨時觀察大鼠排尿情況和前列腺肉眼改變情況，直至造模成功。

1.4.2 埋線治療 造模成功24 h后，各組開始進行簡易穴位埋線，每1周埋線1次，共4周，穴位的選取與操作依據《實驗針灸學》及華興邦研制的大鼠穴位圖譜，取穴如下：腎俞穴位于第二腰椎下兩旁，斜刺約6 mm；關元穴位于臍下約25 mm處，直刺約3 mm。埋線：①消毒穴位及周圍皮膚用碘伏棉簽消毒；②進針：選用9號埋線針，裝上3-0號羊腸線，長度約0.2～0.3 cm；③埋線：穴位埋線1周1次，4周為1個療程。

1.4.3 取材 飼養36 d后，準備取材。大鼠麻醉成功后，背部固定，打開腹腔，用采血針從腹主動脈采血至肝素抗凝管中，搖勻靜置，待析出血清后將血清吸出，置于冰箱-20 ℃溫度下保存；另取出大鼠前列腺備用。

1.4.5 觀察大鼠一般情況 從造模第1天開始，觀察SD大鼠行為、攝食、飲水、小便性狀、體征等情況。

1.4.6 采用單項免疫擴散法測定前列腺勻漿IgG含量 稱重大鼠前列腺質量，每100 mg加生理鹽水1 mL，放入勻漿器中，制成勻漿，離心取上清液。

1.4.7 采用原子吸收分光光度法測定Zn含量 測定前將-20 ℃保存的血清置室內溫度復融混勻，4 ℃，3 000 R/min，離心5 min，取上清液，離心。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 各組大鼠一般情況

假手術組大鼠活動度高，體重正常穩定，飲食引水量正常，小便澄清，無白濁或異樣，解剖后大鼠前列腺組織柔軟、潤澤、無粘連；與假手術組相比，模型對照組大鼠活動度明顯降低，飲水量減少，小便渾濁且量少，解剖后大鼠前列腺水腫、充血、色澤較暗黃且有較多硬結、粘連；與模型對照組相比，腎俞組和關元組大鼠活動度明顯增高，飲水量較多，小便渾濁度低，解剖后大鼠前列腺呈暗紅色，無硬結，見少量軟性結節，粘連減少。

2.2 各組大鼠前列腺勻漿中 IgG含量對比

與假手術組對比，模型對照組大鼠前列腺勻漿中IgG含量增高，差異有統計學意義(P<0.05)。與模型對照組相比，腎俞組和關元組的前列腺勻漿IgG含量均降低，差異有統計學意義(P<0.05)。腎俞組與關元組相比，差異無統計學意義(P>0.05)。詳見表1、圖1。

表1 腺勻漿中IgG含量對比

組別動物數(只)IgG(mg·L-1)假手術組10106.62±11.43模型對照組10211.21±20.63?腎俞組10172.47±22.26△關元組10163.39±25.67△

注：假手術組對比，*P<0.05；與模型對照組對比，△P<0.05。

圖1 各組大鼠前列腺勻漿中 IgG含量柱狀圖

2.3 各組大鼠血清Zn含量對比

與假手術組對比，模型對照組的血清Zn含量降低，差異有統計學意義(P<0.05)；與模型對照組對比，腎俞組合關元組的血清Zn含量均增高，差異有統計學意義(P<0.05)；腎俞組與關元組相比，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2、圖2。

表 2 各組大鼠血清鋅含量對比

組別動物數(只)Zn含量(μmol·L-1)假手術組100.184±0.036模型對照組100.019±0.006?腎俞組100.065±0.021△關元組100.071±0.017△

注:與假手術組對比，*P<0.05；與模型對照組對比，△P<0.05。

圖2 各組大鼠血清鋅含量對比柱狀圖

3 討論

祖國醫學中并沒有慢性前列腺炎(CP)這一病名記載，但根據其臨床癥狀及體征，慢性前列腺炎應屬中醫學“淋證”“癃閉”“精濁”等范疇。本病病位在下焦，根據經絡循行路線，主要涉及腎、膀胱、肝、脾胃等臟腑。臨床上以尿頻、尿急、尿痛、小腹和會陰部疼痛不適為主癥，《諸病源候論》曰：“諸淋者，由腎虛而膀朧熱故也……腎虛則小便數，膀朧熱則水下澀、數而且澀，則淋瀝不宣?！盵5]說明CP的發生與腎虛及膀胱濕熱密切相關；腎氣虧虛、固攝無權，則小便多；膀胱濕熱可見尿頻、尿急、尿痛等癥。臨床上CP往往被認為是由多種因素引起的一組綜合征，一般以抗生素治療為主，但前列腺腺泡與微循環間存在由類脂膜構成的前列腺-血屏障，很大程度上抑制了抗生素對組織和體液的滲透，從而降低了治療效果。本課題組選用腎俞、關元二穴進行穴位埋線治療，腎俞穴以補腎固精、補益腎氣為治本之法[6]，關元穴位于下腹部，可培補元氣、導赤通淋、通利膀胱，達到標本兼治的效果[7]。CP病程長，病變部位較深，穴位埋線包括傳統的針刺療法與現代醫學的組織生化療法，通過羊腸線異性蛋白對穴位的持續刺激，可改善局部血液循環，調整臟腑經絡功能，提高機體免疫力，減輕CP癥狀[8]。本研究結果顯示，與模型組相比，腎俞組和關元組的大鼠活動度、飲水量、小便渾濁度都有改善，前列腺組織呈暗紅色，僅有少量軟性結節，粘連減輕，提示穴位埋線腎俞穴和關元穴可有效緩解大鼠CP癥狀。

免疫球蛋白是機體免疫系統的重要組成部分，其中IgG反映了機體的整體免疫水平。BRETT B[3]在研究中對前列腺癌患者、CP患者和正常男性的血清進行對照檢測，結果顯示在前列腺癌患者、CP患者中，前列腺相關抗原普遍被IgG識別，提示前列腺炎癥可能與前列腺癌有關，并提示IgG在評估患者前列腺癌風險方面具有實用價值。另有實驗證實，慢性炎癥細胞常見于前列腺的早期癌前病變附近，所以，阻止CP的病理進展極其重要[9]。在本課題研究中，與假手術組對比，模型對照組大鼠前列腺勻漿中IgG含量增高(P<0.05)，表明在前列腺炎癥時的局部免疫應答能力對前列腺炎的診斷有一定的價值，而埋線腎俞穴和關元穴均能降低前列腺液中IgG的含量，這可能是穴位埋線治療慢性前列腺炎的作用機制之一。

Zn是人體中重要的微量元素和免疫防御因子，在CP的發生發展過程中發揮著重要的作用，可以活化并提高前列腺組織的的抗菌能力，參與相關的殺菌過程[10]。有研究顯示，前列腺分泌物和精液中鋅的含量高于其他器官和體液中鋅的含量[11，12]，CP患者前列腺鋅含量高與前列腺抑菌活性相關，且呈下降趨勢，說明鋅在維持前列腺功能中發揮著重要作用。有研究證實，細菌性CP患者前列腺液中鋅的濃度始終低于正常水平[13]。非細菌性CP患者的鋅濃度較低，但口服鋅可以糾正這一現象。CHO等[11]發現，高水平的前列腺鋅與前列腺的抗菌活性有關，而CP患者的鋅濃度較低。本課題研究結果顯示，造模對照組血清Zn的含量明顯較假手術組降低(P<0.05)，說明血清Zn與CP的發生有著密切的聯系，是維持前列腺組織結構和生理功能處于穩定狀態的重要物質之一；與模型對照組相比，埋線腎俞穴和關元穴均能升高血清Zn的含量(P<0.05)，說明穴位埋線能升高血清Zn的含量從而發揮治療CP的作用。

綜上所述，簡易埋線腎俞穴和關元穴均能降低CP大鼠勻漿IgG的含量，升高血清Zn的含量，改善小便渾濁度，緩解整體癥狀，這可能是其治療CP取得良好效果的主要機制。