液相色譜-三重串聯四級桿質譜法測定茶葉（金駿眉）中檸檬黃含量的研究

□ 黃 穎 贛州市產品質量監督檢驗所

1 前言

對于市面上非常受歡迎的茶葉金駿眉，一些不良商家抓住一般消費者誤認為“金駿眉”就應該是金色為主的心理誤區，添加檸檬黃著色，嚴重傷害了消費者的健康，以及茶葉的品質口感。在社會上造成了極大的影響。

目前檢測檸檬黃的常用方法有薄層色譜法、液相色譜法等方法，但在實際工作中，由于復雜的基質對方法和儀器的干擾，導致薄層色譜法、液相色譜法在測量一些低含量的樣本時有很大的不確定性，容易出現假陽性的事例。為了能夠精準測量低含量的樣本，本文采用目前最前沿的檢測技術——液相色譜-三重四級桿串聯質譜測定法進行檢測。利用碎片離子和多重反應監測手段進行精準的定性和準確的定量。

2 材料與方法

2.1 儀器與試劑

安捷倫1260液相色譜-G6400質譜聯用儀器（美國Agilent公司）；分析天平（梅特勒-托利公司）；Milli-Referrence超純水機（密理博中國有限公司）；TG16離心機（長沙英泰儀器有限公司）；檸檬黃標準品（純度≥99%）；甲醇（色譜純，美國Fisher公司）；甲酸（色譜純，美國Fisher公司）乙酸銨（優級純，百靈頓威化學科技有限公司）0.45 μm微孔過濾膜（天津津藤公司）。

2.2 實驗方法

2.2.1 樣品處理

取粉碎的茶葉金駿眉樣品3 g于100 mL燒杯中，加水25 mL，超聲30 min，轉移至離心管中，定容至50 mL，5 000 r/min離心5 min，取上清液經微孔濾膜過濾后檢測。

2.2.2 液相色譜-三重四級桿串聯質譜條件

（1）色譜條件

色譜柱：Agilent C18柱（2.1 mm×150 mm，5 μm）柱溫：30 ℃；進樣量：10 μL；流動相：A甲醇+B乙酸銨溶液（10 mmol/L）梯度洗脫程序見表1。

（2）質譜條件

離子源：電噴霧離子源（ESI）；掃描方式：多反應監測（MRM）掃描；霧化氣：高純氮10 L/min；碰撞氣：高純氮，流量為6 psi；離子源溫度：350 ℃。

2.2.3 結果計算

結果的計算公式見式（1）。

式（1）中：W—試樣中檸檬黃含量，單位為微克每千克（μg/kg）；C—進樣液中檸檬黃的質量濃度，單位為微克每升（μg/L）；M—試樣質量，單位為克（g）；V—試樣定容體積，單位為毫升（mL）。

3 條件優化與結果計算

3.1 定性定量離子的確定

首先確定母離子，通過二級掃描選定定性和定量離子，通過優化碰撞能、Fragmengter電壓等參數確保所選定性和定量離子的豐度較強。具體質譜參數見表2。

3.2 線性范圍與檢出限

在5～500 μg/kg線性范圍內相關系數為0.999 5，檢出限為1.0 μg/kg。

表1 梯度洗脫表

表2 檸檬黃質譜定性定量離子對

3.3 檢測結果及回收率

對加標10、50、100 μg/kg樣本的檢測結果分別為9.8、49、102 μg/kg，計算回收率分別為98%、98%、102%。回收率在合理區間。

4 結論

通過對質譜條件的優化，加標樣品回收率為98%～102%，檢測結果準確，該方法前處理簡單、快速，檢出限低，抗干擾能力強，在復雜的基質中能夠得到良好的結果。