支原體肺炎病兒體內(nèi)Toll樣受體4、CXCL8、可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1水平變化及臨床意義

李會娟，靳秀紅，梁東閣，常會娟

小兒支原體肺炎的發(fā)生率具有一定的上升趨勢，流行病學(xué)研究證實(shí)，小兒支原體肺炎的發(fā)生率可達(dá)272～383/10 000左右［1］。臨床上小兒支原體肺炎的發(fā)生，能夠?qū)е轮匕Y肺部感染的發(fā)生，增加了多器官功能損傷的風(fēng)險(xiǎn)［2］。

在探討小兒支原體肺炎的病情進(jìn)展機(jī)制的過程中，可以發(fā)現(xiàn)炎癥相關(guān)因子的改變，在促進(jìn)肺部感染性病情的擴(kuò)散等方面發(fā)揮了重要的作用。Toll

樣受體4（TLR4）能加深炎癥性反應(yīng)的程度，加劇中性粒細(xì)胞的激活效應(yīng)，進(jìn)而促進(jìn)了肺泡上皮組織的損傷［3］；趨化因子CXCL8能夠通過誘導(dǎo)單核細(xì)胞或者巨噬細(xì)胞的激活，提高相關(guān)炎癥性細(xì)胞對于肺泡上皮細(xì)胞膜完整性的破壞，進(jìn)而導(dǎo)致病兒的肺換氣或者肺通氣功能障礙［4］；可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1（sTREM-1）是重要的炎癥因子及氧化應(yīng)激性指標(biāo)，其濃度的上升能夠?qū)е孪掠窝装Y信號通路的激活，提高了效應(yīng)因子如白細(xì)胞介素6（IL-6）的上調(diào)，進(jìn)而促進(jìn)了肺部感染性病情的進(jìn)展［5］。為了揭示小兒支原體肺炎體內(nèi)TLR4，CXCL8，sTREM-1水平變化及臨床意義，本次研究收集了相關(guān)臨床病例，探討了TLR4，CXCL8，sTREM-1的表達(dá)及其與病兒病情的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2016年12月至2017年10月在鄭州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院接受治療的支原體肺炎病兒100例為觀察組，男68例，女32例，年齡范圍為3～11歲，年齡（8.75±2.01）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）年齡≤12周歲；（2）經(jīng)檢查確診為支原體肺炎；（3）無其他呼吸系統(tǒng)疾病者；排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）不愿參與本項(xiàng)研究者；（2）近期合并其他感染性疾病者。根據(jù)不同疾病程度再分為重癥組35例和非重癥組65例，重癥的診斷：①呼吸困難與缺氧癥狀明顯，吸氧后癥狀不能緩解；②有明顯中毒癥狀（如昏迷等）；③有心力衰竭或中毒性腦病或中毒性麻痹；④肺部濕羅音密集，X線有大片陰影者；⑤有嚴(yán)重合并癥，如膿胸、膿氣胸等。選取同期接受體檢的健康兒童100例為對照組，男65例，女35例，年齡范圍為3～12歲，年齡（8.81±2.13）歲，納入標(biāo)準(zhǔn)：年齡≤12周歲，近期無感染性疾病者。兩組的一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，具有可比性。所有病兒及健康兒童近親屬均知情同意。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會赫爾辛基宣言》相關(guān)要求。

1.2 檢測方法采集入院后靜脈血，離心后收集上清液，采用免疫發(fā)光法檢測TLR4，CXCL8，sTREM-1水平，檢測儀器為美國Bio-Bad全自動酶標(biāo)儀，配套試劑盒購自羅氏檢測公司；采用全自動生化法檢測腫瘤壞死因子a（TNF-α）、IL-6、超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）值，配套試劑盒購自南京碧云天生物檢測公司。

1.3 評價(jià)指標(biāo)觀察兩組研究對象、不同疾病程度支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平、炎癥因子和肺功能指標(biāo)的差異，分析支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子和肺功能的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 11.5軟件進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)和計(jì)量資料分別采用例和±s表示。TLR4、CXCL8、sTREM-1水平、炎癥因子和肺功能指標(biāo)的比較采用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析；采用Pearson相關(guān)分析法分析支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子和肺功能的相關(guān)性。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組TLR4、CXCL8、sTREM-1水平的比較

觀察組TLR4、CXCL8、sTREM-1水平均高于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 支原體肺炎和健康對照組TLR4、CXCL8、sTREM-1水平的比較/± s

表1 支原體肺炎和健康對照組TLR4、CXCL8、sTREM-1水平的比較/± s

注：TLR4為Toll樣受體4，sTREM-1為可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1

組別對照組觀察組t值P值sTREM-1/（ρg/mL）18.42±3.12 55.36±5.69 56.925＜0.001例數(shù)100 100 TLR4/（ng/mL）1.03±0.02 3.48±0.67 36.551＜0.001 CXCL8/（pg/mL）148.53±19.12 288.67±12.65 61.127＜0.001

2.2 兩組炎癥因子和肺功能指標(biāo)的比較觀察組TNF-α、IL-6、hs-CRP水平高于對照組，F(xiàn)VC、MMEF、PEF水平低于對照組（P＜0.05）。見表2。

表2 支原體肺炎和健康對照組炎癥因子和肺功能指標(biāo)的比較/±s

表2 支原體肺炎和健康對照組炎癥因子和肺功能指標(biāo)的比較/±s

注：TNF-α為腫瘤壞死因子α，IL-6為白細(xì)胞介素6、hs-CRP為超敏C反應(yīng)蛋白，F(xiàn)VC為用力肺活量，MMEF為最大呼氣中期流量，PEF為最大呼氣流量

組別對照組觀察組t值P值PEF/（L/s）7.86±0.64 6.11±1.03-14.431＜0.001例數(shù)100 100 TNF-α/（μg/L）15.37±2.43 24.55±4.18 18.987＜0.001 IL-6/（pg/mL）9.06±1.65 45.25±9.58 37.228＜0.001 hs-CRP/（mg/L）1.68±0.72 5.63±1.35 25.817＜0.001 FVC/L 2.65±0.63 2.38±0.57-3.178＜0.001 MMEF/（L/s）2.82±0.67 2.17±0.48-7.886＜0.001

2.3 不同疾病程度病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平比較重癥支原體肺炎病兒的TLR4、CXCL8、sTREM-1水平高于非重癥組（P＜0.05）。見表3。

表3 不同疾病程度支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平的比較/± s

表3 不同疾病程度支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平的比較/± s

注：TLR4為Toll樣受體4，sTREM-1為可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1

組別重癥組非重癥組t值P值sTREM-1/（ρg/mL）60.75±5.28 49.62±4.22 11.502＜0.001例數(shù)35 65 TLR4/（ng/mL）4.01±1.13 3.12±0.71 4.231 0.000 CXCL8/（pg/mL）319.47±16.14 250.35±15.08 21.330＜0.001

2.4 不同疾病程度病兒炎癥因子和肺功能指標(biāo)的比較重癥支原體肺炎病兒的TNF-α、IL-6、hs-CRP水平高于非重癥組，F(xiàn)VC、MMEF、PEF水平低于非重癥組（P＜0.05）。見表4。

表4 不同疾病程度支原體肺炎病兒炎癥因子和肺功能指標(biāo)的比較/±s

表4 不同疾病程度支原體肺炎病兒炎癥因子和肺功能指標(biāo)的比較/±s

注：TNF-α為腫瘤壞死因子α，IL-6為白細(xì)胞介素6，hs-CRP為超敏C反應(yīng)蛋白，F(xiàn)VC為用力肺活量，MMEF為最大呼氣中期流量，PEF為最大呼氣流量

組別重癥組非重癥組t值P值PEF/（L/s）5.76±1.11 6.62±1.23 3.448 0.001例數(shù)35 65 TNF-α/（μg/L）32.12±3.09 16.01±2.36 29.147 0.000 IL-6/（pg/mL）50.84±8.26 40.67±7.24 6.375 0.000 hs-CRP/（mg/L）6.84±1.65 4.48±1.02 7.706 0.000 FVC/L 2.01±0.41 2.46±0.67 4.159 0.000 MMEF/（L/s）1.85±0.36 2.52±0.54 7.404 0.000

2.5支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子和肺功能的相關(guān)性支原體肺炎病兒的TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子水平正相關(guān)，與肺功能水平負(fù)相關(guān)。見表5。

表5 支原體肺炎病兒TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子和肺功能的相關(guān)性

3 討論

在具有自身免疫力下降的兒童中，支原體肺炎的發(fā)生率具有進(jìn)一步的上升表現(xiàn)［6-7］。臨床上小兒支原體肺炎的發(fā)生，不僅能夠?qū)е虏悍尾扛腥拘园Y狀的發(fā)生，同時(shí)還能夠?qū)е虏盒呐K、肝腎組織的受累，導(dǎo)致病兒不良臨床結(jié)局的發(fā)生［8-9］?，F(xiàn)階段臨床上缺乏對于小兒支原體肺炎的有效診斷指標(biāo)，雖然影像學(xué)檢查能夠評估肺部感染性疾病的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，但胸部CT或者X片檢查等的滯后性較為明顯，早期多數(shù)病兒并無顯著的影像學(xué)檢查的改變。血清學(xué)指標(biāo)的分析，能夠?yàn)樾焊腥拘约膊〉脑\斷過程中發(fā)揮重要的作用，其能夠指導(dǎo)臨床上小兒支原體肺炎的早期臨床干預(yù)，進(jìn)而改善病兒的臨床結(jié)局。

TLR4的上升能夠反應(yīng)中性粒細(xì)胞的激活程度，評估病兒體內(nèi)的急性感染性病情變化?；A(chǔ)方面的研究認(rèn)為，TLR4的上升能夠提高中性粒細(xì)胞對于肺泡組織的浸潤程度，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、肺泡上皮細(xì)胞凋亡等病理改變的發(fā)生［10］；CXCL8表達(dá)濃度的上升不僅能夠影響到中性粒細(xì)胞的激活，還能夠促進(jìn)巨噬細(xì)胞的上調(diào)，增加巨噬細(xì)胞對于肺泡上皮組織的吞噬能力；sTREM-1是重要的趨化因子和炎癥因子，其能夠通過對于MAPK的激活，進(jìn)而促進(jìn)下游炎癥性瀑布因子的激活，加劇了肺部感染性病情的擴(kuò)散［11］。部分研究者報(bào)道了CXCL8在支原體肺炎病兒血清中的表達(dá)情況，認(rèn)為其表達(dá)濃度的上升與肺炎病兒的病情發(fā)生密切相關(guān)［12］，但缺乏對于不同指標(biāo)與病兒病情嚴(yán)重程度和肺功能的關(guān)系研究。

本次研究中可以發(fā)現(xiàn)，在小兒支原體肺炎中，TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達(dá)濃度均明顯的上升，高于非支原體感染組，差異較為明顯，提示了TLR4、CXCL8、sTREM-1均可能影響到了小兒支原體肺炎的病情進(jìn)展過程，通過薈萃國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，筆者認(rèn)為TLR4、CXCL8、sTREM-1的高表達(dá)與肺炎的病情關(guān)系，可能與下列幾個方面的因素有關(guān)［13-14］：（1）TLR4的上升能夠?qū)е滦獾榔交〖?xì)胞的炎癥性浸潤程度的增加，導(dǎo)致小氣道阻塞的風(fēng)險(xiǎn)上升，影響到了肺換氣過程；（2）sTREM-1的上升能夠?qū)е孪掠蜹NF-α的激活，增加了其對于肺泡間質(zhì)成分的破壞作用。郭冰冰等［15］研究者也發(fā)現(xiàn)，在支原體肺炎病兒中，TLR4的表達(dá)濃度可平均上升30%以上，同時(shí)在治療預(yù)后較差或者發(fā)生了遠(yuǎn)期并發(fā)癥的病兒中，TLR4的表達(dá)濃度可進(jìn)一步的上升。TNF-α、IL-6及hs-CRP的表達(dá)是評估病兒體內(nèi)炎癥反應(yīng)的重要指標(biāo)，在支原體肺炎病兒血清中，TNF-α、IL-6、hs-CRP的表達(dá)明顯的上升，提示了病兒體內(nèi)存在明顯的炎癥反應(yīng)激活的表現(xiàn)，而肺功能指標(biāo)則明顯的下降，提示病兒的肺功能累及表現(xiàn)較為明顯，這主要考慮與長期的炎癥性反應(yīng)，導(dǎo)致支氣管平滑肌的痙攣，進(jìn)而影響到肺通氣或者肺換氣過程。重癥支原體肺炎病兒，其肺部實(shí)質(zhì)性病變程度較為明顯，病兒的咳喘、咳痰及發(fā)熱等臨床表現(xiàn)較為嚴(yán)重，短期內(nèi)可合并有其他組織臟器的損害，臨床上通過支原體抗體評估重癥支原體肺炎病情的一致性率較低，而本次研究中，在重癥組病兒中，TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達(dá)濃度可進(jìn)一步的上升，高于非重癥組，同時(shí)體內(nèi)的炎癥反應(yīng)因子的上升也較為明顯，肺功能的下降同樣較為顯著，提示了TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達(dá)與支原體肺炎病兒的病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，臨床上可以通過檢測血清中相關(guān)指標(biāo)，進(jìn)而評估小兒支原體肺炎的病情。相關(guān)關(guān)系分析也可見，支原體肺炎病兒的TLR4、CXCL8、sTREM-1水平與炎癥因子水平正相關(guān)，與肺功能水平負(fù)相關(guān)，進(jìn)一步提示了TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達(dá)與病兒綜合性病情的關(guān)系，這主要由于TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達(dá)能夠影響到病兒體內(nèi)的炎癥反應(yīng)的調(diào)控，并能夠促進(jìn)氣道阻塞、支氣管痙攣等病理改變的發(fā)生。

本次研究的創(chuàng)新性在于探討了TLR4、CXCL8、sTREM-1的表達(dá)與肺炎病兒肺功能的關(guān)系。綜上所述，支原體肺炎病兒的TLR4、CXCL8、sTREM-1水平較高，與炎癥因子和肺功能指標(biāo)相關(guān)，且受疾病嚴(yán)重程度的影響。