草莓屬植物種質(zhì)資源對(duì)炭疽病抗性的離體評(píng)價(jià)

韓永超，曾祥國(guó)，向發(fā)云，過(guò)聰，張慶華，陳豐瀅，關(guān)偉

草莓屬植物種質(zhì)資源對(duì)炭疽病抗性的離體評(píng)價(jià)

韓永超，曾祥國(guó)，向發(fā)云，過(guò)聰，張慶華，陳豐瀅，關(guān)偉

（湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所/蔬菜種質(zhì)創(chuàng)新與遺傳改良湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，武漢 430064）

【】對(duì)草莓屬植物12個(gè)草莓野生種24份材料、1個(gè)栽培種41個(gè)品種、種間雜交種6個(gè)品種共71份種質(zhì)資源的炭疽病抗性進(jìn)行評(píng)價(jià)，為草莓屬植物種質(zhì)資源的利用提供依據(jù)。以從草莓上分離得到的果生炭疽菌（）為接種病原，采用離體接種法將炭疽菌孢子懸浮液（１×106個(gè)分生孢子/mL）均勻接種在草莓葉片的葉面、葉柄上。置于28℃條件下保濕培養(yǎng)4 d，然后分別對(duì)每個(gè)葉片的發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查，統(tǒng)計(jì)葉面病斑數(shù)量、葉面最大病斑直徑、葉柄最大病斑長(zhǎng)度。運(yùn)用IBM SPSS 15.0軟件對(duì)不同供試材料的葉面病斑數(shù)量、葉面病斑直徑、葉柄病斑長(zhǎng)度進(jìn)行相關(guān)性分析。根據(jù)葉柄病斑長(zhǎng)度對(duì)每個(gè)葉片的病害嚴(yán)重程度進(jìn)行分級(jí)，計(jì)算每份材料的病情指數(shù)，以接種炭疽菌后葉柄的病情指數(shù)為依據(jù)對(duì)供試材料的炭疽病抗性進(jìn)行評(píng)價(jià)。以草莓種類為固定因素，供試材料為隨機(jī)因素，采用SAS中的一般線性模型程序計(jì)算鳳梨草莓（41份）、東北草莓（3份）、綠色草莓（4份）、黃毛草莓（3份）、種間雜交種（6份）的病情指數(shù)差異（＜0.05）。供試材料中沒(méi)有對(duì)炭疽病完全免疫的材料，所有材料在接種果生炭疽菌4 d后均有不同程度的發(fā)病。對(duì)不同材料間的對(duì)比發(fā)現(xiàn)，感染炭疽病后草莓葉柄病斑長(zhǎng)度與葉面病斑數(shù)量、葉片病斑直徑均呈極顯著正相關(guān)。以接種炭疽菌后的葉柄病斑長(zhǎng)度為依據(jù)可以對(duì)供試材料的炭疽病抗性進(jìn)行區(qū)分，供試材料中高抗17份、抗病20份、中抗21份、中感3份、感病6份、高感4份，炭疽病抗性水平為中抗及以上的材料占全部供試材料的81.7%。鳳梨草莓中的‘3公主’‘森加森加拉’‘達(dá)賽萊克特’‘全明星’‘香野’‘威斯塔爾’和‘京藏香’，種間雜交種中的‘桃薰’對(duì)炭疽病的抗性水平為高抗。在草莓野生種中全部東北草莓、綠色草莓、東方草莓供試材料對(duì)炭疽病的抗性水平為高抗，東北草莓和綠色草莓的病情指數(shù)顯著低于鳳梨草莓。對(duì)草莓屬種質(zhì)資源71份材料的炭疽病抗性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，從栽培草莓中篩選出‘3公主’‘森加森加拉’‘達(dá)賽萊克特’‘全明星’‘香野’‘威斯塔爾’‘京藏香’7個(gè)高抗品種。東北草莓和綠色草莓中存在高抗炭疽病的資源，其對(duì)炭疽病的整體抗性水平顯著高于鳳梨草莓，在種間雜交育種過(guò)程中可以作為炭疽病抗原來(lái)源。

草莓；種質(zhì)資源；果生炭疽菌；炭疽病；抗性

0 引言

【研究意義】草莓是薔薇科（Rosaceae）草莓屬（）多年生常綠草本植物，有“漿果皇后”之稱，在世界小漿果生產(chǎn)中居于首位。近年來(lái)世界各國(guó)草莓種植業(yè)發(fā)展迅速，中國(guó)草莓種植面積和產(chǎn)量不斷增加，2017年中國(guó)草莓種植面積達(dá)13.37萬(wàn)公頃，總產(chǎn)量達(dá)372.46萬(wàn)噸[1]，種植面積和產(chǎn)量均穩(wěn)居世界第一位，但各種草莓病害的發(fā)生卻阻礙了其健康發(fā)展。炭疽病已成為全世界草莓產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要病害之一[2-3]，該病害在我國(guó)草莓種植區(qū)發(fā)生普遍，且近年來(lái)有危害愈發(fā)嚴(yán)重的趨勢(shì)，目前已成為我國(guó)夏季草莓育苗期的主要病害[4-5]。施用殺菌劑是最為常見(jiàn)的防治方法，但目前已發(fā)現(xiàn)對(duì)多種殺菌劑具有抗藥性的菌株[6]，藥劑防治效果已不顯著，種植抗病品種是防治草莓炭疽病的有效措施。對(duì)草莓屬植物種質(zhì)資源的炭疽病抗性進(jìn)行評(píng)價(jià)，對(duì)生產(chǎn)上選用、選育抗炭疽病品種均具有重要意義。【前人研究進(jìn)展】全世界草莓屬植物有25個(gè)種，其中14個(gè)種原產(chǎn)我國(guó)，染色體基數(shù)為=7，由2、4、6、8等倍性構(gòu)成。被廣泛栽培利用的草莓屬植物是八倍體鳳梨草莓（，2=8=56），其余多為野生或半野生狀態(tài)。現(xiàn)有草莓栽培品種對(duì)炭疽病的抗性存在顯著差異[7]，主栽品種中‘瑪利亞’和‘吐德拉’抗性較強(qiáng)，‘哈尼’和‘甜查理’表現(xiàn)為中抗，‘豐香’表現(xiàn)為中感，而‘紅顏’屬感病品種[8-9]，尚未發(fā)現(xiàn)對(duì)炭疽病完全免疫的栽培草莓品種。野生草莓資源不僅對(duì)不良環(huán)境條件具有良好的適應(yīng)性，還蘊(yùn)藏著豐富的抗性基因[10-11]，在提高栽培品種抗逆性、抗病性等方面具有較大潛力。我國(guó)自然分布的野生草莓包括8個(gè)二倍體種：森林草莓（）、西藏草莓（.）、黃毛草莓（.）、綠色草莓（）、東北草莓（）、五葉草莓（.）、裂萼草莓（）、中國(guó)草莓（）；5個(gè)四倍體種：傘房草莓（）、西南草莓（）、東方草莓（）、纖細(xì)草莓（.）、高原草莓（）[12-13]。野生草莓蘊(yùn)藏著豐富的基因資源，如黃毛草莓不僅具有耐旱、耐高溫、抗葉部病害等特點(diǎn)，且果實(shí)具有獨(dú)特香氣；五葉草莓抗寒、抗旱、抗?。粬|北草莓和東方草莓抗寒；綠色草莓抗寒、抗病性強(qiáng)。五葉草莓、黃毛草莓、西南草莓、綠色草莓和東北草莓中均存在中抗炭疽病的資源[14]。這些野生資源為栽培品種品質(zhì)、抗性改良提供了豐富的資源庫(kù)[13,15]。炭疽病可危害草莓根頸、匍匐莖、葉柄、葉片和果實(shí)[16-17]，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致80%的草莓苗在移栽前帶菌或因根頸處感病死亡。一般認(rèn)為，可引起草莓炭疽病的病原有3種，分別為膠孢炭疽菌（）、尖孢炭疽菌（）和草莓炭疽菌（）[18-19]，前人多以膠孢炭疽菌為病原對(duì)草莓品種的抗病性進(jìn)行接種鑒定[14]。但最近研究結(jié)果顯示膠孢炭疽菌和尖孢炭疽菌均為復(fù)合種群[20-21]，暹羅炭疽菌（）、果生炭疽菌（）、隱秘炭疽菌（）、膠孢炭疽菌睡蓮炭疽菌（）和昌平炭疽菌（）均可侵染草莓引起炭疽病[22-24]，其中果生炭疽菌和暹羅炭疽菌對(duì)草莓的致病力強(qiáng)，是引起我國(guó)草莓炭疽病的主要病原物[23]?！颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】近年來(lái)國(guó)內(nèi)草莓研究工作進(jìn)展迅速，大量新品種被選育出來(lái)，同時(shí)還有大量?jī)?yōu)秀國(guó)外草莓品種被引入到國(guó)內(nèi)種植。前人對(duì)部分草莓種質(zhì)資源的炭疽病抗性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，但評(píng)價(jià)的資源數(shù)量有限，很多種質(zhì)資源的抗性水平尚不明確。因此，亟需對(duì)國(guó)內(nèi)現(xiàn)有的主要草莓資源進(jìn)行評(píng)價(jià)，以準(zhǔn)確評(píng)估這些資源在抗炭疽病品種選育方面的應(yīng)用潛力。【擬解決的關(guān)鍵問(wèn)題】對(duì)草莓屬種質(zhì)資源的炭疽病抗性水平進(jìn)行鑒定與評(píng)價(jià)，為利用草莓屬中的抗炭疽病資源、選育高抗炭疽病品種提供依據(jù)。

1 材料與方法

抗性評(píng)價(jià)試驗(yàn)于2018—2019年在湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院完成。

1.1 供試草莓材料

供試材料為草莓野生種和栽培品種共71份。草莓野生種共12種24份材料，其中東北草莓3份，黃毛草莓3份，綠色草莓4份，森林草莓2份，西藏草莓1份，五葉草莓2份，東方草莓2份，傘房草莓1份，西南草莓2份，麝香草莓（）1份，弗州草莓（）2份，智利草莓（）1份。栽培種鳳梨草莓品種41個(gè)；草莓栽培種與野生種、近緣屬之間遠(yuǎn)緣雜交后代6個(gè)品種。所有供試草莓材料均種植在位于武漢市洪山區(qū)的草莓試驗(yàn)基地內(nèi)，常規(guī)栽培管理，試驗(yàn)前兩周開(kāi)始停止施用殺菌劑。

1.2 菌株來(lái)源及種類鑒定

2014年從湖北省武漢市東西湖區(qū)采集發(fā)病草莓樣本，參考韓永超等[22]的方法進(jìn)行病原菌的分離純化，從發(fā)病草莓葉柄上分離得到炭疽菌株Gwha-1，采用斜面培養(yǎng)基（4℃）保存于湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所草莓課題組。采用基于形態(tài)學(xué)和部分肌動(dòng)蛋白基因（）、鈣調(diào)蛋白基因（）、甘油醛-3-磷酸脫氫酶基因（）、-維管蛋白基因（）及幾丁質(zhì)合成酶基因（）序列的多位點(diǎn)系統(tǒng)進(jìn)化分析[23]，對(duì)Gwha-1菌株進(jìn)行種類鑒定。結(jié)果顯示Gwha-1屬于膠孢炭疽復(fù)合種內(nèi)的果生炭疽菌，Gwha-1對(duì)草莓的致病力強(qiáng)，可將該菌株用于人工接種鑒定草莓對(duì)炭疽病的抗性水平。

1.3 炭疽菌分生孢子懸浮液制備

在超凈工作臺(tái)中用接種針挑取菌株Gwha-1的菌絲塊，接種至新的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（potato dextrose agar，PDA）平板上，置于28℃避光條件下活化3—5 d。然后從平板中菌落邊緣截取菌絲塊接種于含有0.05%酵母提取液的PDA培養(yǎng)基平板上，置于28℃條件下避光培養(yǎng)10—15 d，直到平板上長(zhǎng)出橘紅色的分生孢子。用無(wú)菌水將分生孢子從平板上洗下來(lái)，通過(guò)雙層紗布過(guò)濾掉菌絲和培養(yǎng)基雜質(zhì)。用血球計(jì)數(shù)板測(cè)量分生孢子懸浮液的濃度，用無(wú)菌水將濃度稀釋到1×106個(gè)分生孢子/mL，然后向其中加入2—3滴吐溫20。將分生孢子懸浮液短時(shí)間置于4℃條件下備用。

1.4 草莓葉片離體接種

采用離體葉片接種法對(duì)供試材料的炭疽病抗性水平進(jìn)行鑒定與評(píng)價(jià)。采集從內(nèi)到外的第3—5片帶葉柄葉片，用自來(lái)水將葉片洗凈，用保鮮膜包住葉柄斷口處，以免傷口處接觸炭疽菌的分生孢子。取出配好的炭疽病分生孢子懸浮液，用手持噴壺將過(guò)量孢子懸浮液均勻噴在葉片上，直到水滴從葉片上滴下。撕掉保鮮膜，將接種后的葉片置于白色搪瓷盤(pán)中，用吸水紙蓋住葉柄斷口，向吸水紙上澆少量無(wú)菌水保濕以使葉片不失水。用保鮮膜將搪瓷盤(pán)封口，置于28℃條件下保濕培養(yǎng)4 d。然后分別對(duì)每個(gè)葉片的發(fā)病情況進(jìn)行調(diào)查，統(tǒng)計(jì)葉面病斑數(shù)量、葉面最大病斑直徑、葉柄最大病斑長(zhǎng)度。每份材料接種9個(gè)葉片，每3個(gè)葉片為1個(gè)重復(fù)，重復(fù)2次。

1.5 發(fā)病情況調(diào)查及抗性水平分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)

參考王豐等[8]的方法并略作修改，根據(jù)葉柄病斑長(zhǎng)度（lesion length，LL）對(duì)每個(gè)葉片的病害嚴(yán)重程度（symptoms severity，SS）進(jìn)行分級(jí)，病害嚴(yán)重程度分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)如下：0級(jí)，沒(méi)有發(fā)??；1級(jí)，LL≤2.0 mm；3級(jí)，病斑長(zhǎng)度2.0 mm＜LL≤5.0 mm；5級(jí)，5.0 mm＜LL≤9.0 mm；7級(jí)，病斑長(zhǎng)度9.0 mm＜LL≤15.0 mm；9級(jí)，病斑長(zhǎng)度＞15.0 mm。

將病害嚴(yán)重程度轉(zhuǎn)換為病情指數(shù)（DI），病情指數(shù)計(jì)算公式[25]：DI = [（n0×0+n1×1+n3×3+n5×5+n7× 7+n9×9）/9N]×100，n代表相應(yīng)病害嚴(yán)重程度的葉片數(shù)量；下標(biāo)的0、1、3、5、7和 9代表病害嚴(yán)重程度；N表示葉片總數(shù)。品種群體抗病性劃分標(biāo)準(zhǔn)：DI=0，免疫；0＜DI≤10，高抗；10＜DI≤20，抗病；20＜DI≤40，中抗；40＜DI≤60，中感；60＜DI≤80，感病；80＜DI≤100，高感[8]。

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

運(yùn)用IBM SPSS 15.0軟件對(duì)葉柄病斑長(zhǎng)度、葉面病斑數(shù)量、葉面病斑直徑進(jìn)行相關(guān)性分析，相關(guān)性分析圖表采用Microsoft Excel 2007軟件制作。以草莓種類為固定因素，供試材料為隨機(jī)因素，采用SAS（Version 8.0；SAS Institute，Cary，NC）中的一般線性模型程序（PROC GLM）計(jì)算草莓種間的病情指數(shù)差異（＜0.05）。由于供試材料中不同草莓種的材料數(shù)量不同，在分析不同草莓種類的病情指數(shù)差異時(shí)，對(duì)材料份數(shù)≥3的鳳梨草莓（41份）、東北草莓（3份）、綠色草莓（4份）、黃毛草莓（3份）和種間雜交種（6份）進(jìn)行差異顯著性分析，材料份數(shù)＜3的不進(jìn)行差異分析。

2 結(jié)果

2.1 草莓屬種質(zhì)資源對(duì)炭疽病的抗性評(píng)價(jià)

接種4 d后，全部71份供試草莓種質(zhì)資源均不同程度發(fā)病，沒(méi)有對(duì)炭疽病完全免疫的材料。在接種初期葉面上的病斑呈淺黑色，后期顏色逐漸加深，病斑直徑也逐漸擴(kuò)大。葉柄上密布針眼大小的紅褐色病斑，后逐漸擴(kuò)展合并成大病斑（圖1）。對(duì)不同供試材料的葉柄病斑長(zhǎng)度、葉面病斑直徑、葉面病斑數(shù)量進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示感染炭疽病后草莓葉柄病斑長(zhǎng)度和葉面病斑直徑及葉面病斑數(shù)量均呈極顯著正相關(guān)（＜0.01）（圖2）。

以葉柄病斑長(zhǎng)度為病情指數(shù)的計(jì)算依據(jù)，對(duì)71份供試材料的炭疽病抗性進(jìn)行評(píng)價(jià)，其中高抗、抗病、中抗、中感、感病、高感材料分別為17、20、21、3、6、4份。在野生草莓中，東北草莓HBYCM023接種果生炭疽菌后的病情指數(shù)最低，對(duì)炭疽病的抗性最強(qiáng)；房傘草莓HBYCM017的病情指數(shù)最高，炭疽病抗性最弱。草莓栽培種中‘3公主’‘森加森加拉’‘達(dá)賽萊克特’‘全明星’‘香野’‘威斯塔爾’和‘京藏香’7個(gè)品種高抗炭疽病，其中‘3公主’對(duì)炭疽病的抗性最強(qiáng)。而‘晶瑤’‘甜寶’‘小白’均高感炭疽病，供試的6個(gè)種間雜交品種‘桃薰’（高抗）、‘白草莓1號(hào)’（抗病）、‘粉紅佳人’（抗?。ⅰ奂讶恕ㄖ锌梗ⅰ酃鳌ㄖ锌梗?、‘俏佳人’（中抗）對(duì)炭疽病的抗性均較強(qiáng)（表1）。

HR：高抗High resistance；R：抗病Resistance；MR：中抗Medium resistance；MS：中感Medium susceptibility；S：感病Susceptibility；HS：高感High susceptibility

表1 草莓種質(zhì)資源對(duì)炭疽病的抗性水平鑒定

續(xù)表1 Continued Table 1

圖2 病害嚴(yán)重度指標(biāo)的相關(guān)性分析

2.2 不同種類草莓屬植物對(duì)炭疽病的抗性比較

東北草莓、綠色草莓和東方草莓對(duì)炭疽病的整體抗性很強(qiáng)，所有這3個(gè)種的供試材料均高抗炭疽病，其中東北草莓的平均葉柄病情指數(shù)最低。森林草莓、麝香草莓、西南草莓、弗州草莓、智利草莓、種間雜交種對(duì)炭疽病具有一定的抗性，對(duì)炭疽病的平均抗性水平均為抗??；栽培草莓、黃毛草莓、西藏草莓、五葉草莓對(duì)炭疽病的抗性水平均為中抗；傘房草莓的病情指數(shù)最高，高感炭疽?。ū?）。在供試的14個(gè)草莓種中，栽培草莓、東北草莓、綠色草莓、黃毛草莓、種間雜交種的供試材料≥3份，采用一般線性模型程序進(jìn)行的種間抗性差異分析結(jié)果顯示，東北草莓和綠色草莓的病情指數(shù)顯著低于鳳梨草莓，對(duì)炭疽病的抗性顯著高于鳳梨草莓。由于供試的森林草莓、西藏草莓、五葉草莓、東方草莓、傘房草莓、西南草莓、麝香草莓、弗州草莓、智利草莓材料低于3份，不能用于差異顯著性分析，這些種與其他種在炭疽病抗性水平上的差異尚不明確。

表2 不同種類草莓資源接種果生炭疽菌后的病情指數(shù)

3 討論

炭疽病是國(guó)內(nèi)外草莓生產(chǎn)中的重要病害[26]，炭疽菌對(duì)殺菌劑的抗藥性嚴(yán)重且普遍[6]，單純的化學(xué)防治方法很難達(dá)到良好的防治效果。以種植抗病品種為基礎(chǔ)的綜合防治技術(shù)是防治草莓炭疽病的重要研究方向，現(xiàn)有栽培草莓種質(zhì)資源對(duì)炭疽病的田間抗性水平存在明顯差異。供試的41份鳳梨草莓品種中高抗品種7個(gè)，抗病品種8個(gè)，中抗品種14個(gè)，中感品種3個(gè)，感病品種6個(gè)，高感品種3個(gè)（表1）。供試栽培草莓材料中對(duì)炭疽病的抗性水平為中抗及以上的材料共29份，占全部材料的70.7%。由此可見(jiàn)炭疽病抗性作為草莓品種的一個(gè)重要性狀，已引起國(guó)內(nèi)外草莓育種家的普遍重視。靳寶川等[9]對(duì)11個(gè)草莓品種的田間炭疽病自然發(fā)生情況進(jìn)行了調(diào)查，認(rèn)為‘森加森加拉’對(duì)炭疽病表現(xiàn)免疫。本研究中所有供試材料在接種炭疽菌后均有不同程度發(fā)病，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)對(duì)炭疽病免疫的材料?！由永臃N4 d后的病情指數(shù)為6.17，炭疽病抗性水平評(píng)價(jià)為高抗。人工接種與田間表現(xiàn)存在差異的原因可能是人工接種時(shí)病原菌分生孢子濃度更高，條件更適合發(fā)病，以致發(fā)病較田間更為嚴(yán)重。供試草莓栽培品種中‘晶瑤’‘甜寶’‘小白’對(duì)炭疽病的抗性水平為高感，‘紅顏’對(duì)炭疽病的抗性水平為感病，在生產(chǎn)中這些品種炭疽病發(fā)生也非常嚴(yán)重[5,27]?！G麗’‘晶玉’‘豐香’的抗性水平為中抗，與前人研究結(jié)果以及這些品種在生產(chǎn)上的表現(xiàn)一致[27-29]。‘甜查理’是1986年美國(guó)佛羅里達(dá)大學(xué)用‘FL80-456’ב派扎羅’雜交育成，國(guó)家果樹(shù)種質(zhì)北京草莓圃于2000年將該品種引入我國(guó)[30]。本研究中‘甜查理’對(duì)炭疽病的抗性水平為抗病，該品種在生產(chǎn)上也表現(xiàn)出很強(qiáng)的炭疽病抗性，已成為我國(guó)主栽草莓品種。

草莓野生種中蘊(yùn)藏著豐富的風(fēng)味、抗病和抗逆資源，它們是栽培種鳳梨草莓改良的寶貴基因資源[31-32]。通過(guò)野生草莓種質(zhì)資源對(duì)炭疽病抗性的鑒定，可篩選出抗炭疽病的草莓種質(zhì)，為栽培草莓品種改良提供抗性資源。本研究共對(duì)分屬于12個(gè)野生種的24份材料的炭疽病抗性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，其中高抗炭疽病材料9份，分別屬于東北草莓（3份）、綠色草莓（4份）、東方草莓（2份）（表1）。接種后病情指數(shù)的種間差異分析結(jié)果顯示，東北草莓、綠色草莓對(duì)炭疽病的抗性顯著高于鳳梨草莓（表2）。由于本研究中東北草莓和綠色草莓的材料均只有3—4份，尚不足以完全代表整個(gè)種的炭疽病抗性水平，但這兩個(gè)種中存在高抗炭疽病的材料，在開(kāi)展種間雜交育種時(shí)可以把東北草莓和綠色草莓作為炭疽病抗原的重要來(lái)源。二倍體的東北草莓與四倍體的東方草莓的親緣關(guān)系很近，在植株高度、絨毛數(shù)量及其著生方式、葉片形狀、分布區(qū)域等方面接近，東北草莓可能為東方草莓的原始種[33]，在本研究中東方草莓對(duì)炭疽病的抗性水平與東北草莓相當(dāng)。

草莓屬植物均開(kāi)白花，第一個(gè)紅花草莓品種‘粉紅熊貓’是草莓栽培品種（×）與近緣的歐洲紅花委陵菜（）進(jìn)行屬間遠(yuǎn)緣雜交得到的新類型，其花為粉紅色[34]。本研究中供試紅花草莓品種‘粉公主’‘粉紅佳人’‘粉佳人’‘俏佳人’對(duì)炭疽病的抗性分別為中抗、抗病、中抗和中抗（表1）。這4個(gè)品種是由栽培草莓品種與‘粉紅熊貓’雜交選育而成[35]，均帶有紅花委陵菜的遺傳物質(zhì)。本研究中用于接種的果生炭疽菌菌株分離自鳳梨草莓，由于病原菌對(duì)寄主的侵染具有特異性，同一病原菌對(duì)不同屬植物的致病力差異較大。這4個(gè)紅花草莓品種均帶有紅花委陵菜的遺傳物質(zhì)，可能是這些品種較為抗病的原因，但也可能是‘粉紅熊貓’的栽培草莓親本具有較強(qiáng)的炭疽病抗性?！肄埂怯稍耘嗖葺贩N‘豐香’和黃毛草莓種間雜交而來(lái)，其對(duì)炭疽病的抗性水平為高抗（表1）。本研究中測(cè)試的3份黃毛草莓材料對(duì)炭疽病的整體抗性較強(qiáng)，其抗性水平分別為抗病、抗病和中抗，‘豐香’對(duì)炭疽病的抗性水平為中抗，由此可見(jiàn)具有一定炭疽病抗性的草莓栽培品種與野生種雜交能得到抗性增強(qiáng)的種間雜交后代。

4 結(jié)論

對(duì)草莓屬種質(zhì)資源71份材料的炭疽病抗性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，從栽培草莓中篩選出‘3公主’‘森加森加拉’‘達(dá)賽萊克特’‘全明星’‘香野’‘威斯塔爾’‘京藏香’7個(gè)高抗品種。東北草莓和綠色草莓中存在高抗炭疽病的資源，其對(duì)炭疽病的整體抗性水平顯著高于鳳梨草莓，在種間雜交育種過(guò)程中可以作為炭疽病抗原來(lái)源。

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Evaluation of Strawberry Germplasm Resources for Resistance to Anthracnose

Han YongChao, Zeng XiangGuo, Xiang FaYun, Guo Cong, Zhang QingHua, Chen FengYing, Guan Wei

(Institute of Industrial Crops, Hubei Academy of Agricultural Sciences/Hubei Key Laboratory of Vegetable Germplasm Enhancement and Genetic Improvement, Wuhan 430064)

【】The objective of this study is to evaluate the anthracnose resistance level of 71 strawberry accessions including 24 accessions from 12species, 41 cultivars fromand 6 interspecific hybrids, and to provide a basis for the utilization of strawberry germplasm resources in resistance breeding.【】isolate Gwha-1, which was isolated from strawberry petiole, was used as inoculation pathogen. The suspension of(1×106conidia/mL) was evenly inoculated on the leaf surface and petiole of strawberry leaves byinoculation method. Inoculated leaves were moisturized at 28℃ for 4 days, and then the incidence of each leaf was investigated. The lesion number on leaf surface, the largest lesion diameter on leaf surface, and the maximum lesion length on petiole were counted. Correlation analysis was performed on the lesion length on petiole, the lesion number and the lesion diameter on leaf surface of different materials using IBM SPSS 15.0 software. The disease severity of each leaf was ranked according to the lesion length on petiole. The disease index of each material was calculated, and the anthracnose resistance of the tested materials was evaluated based on the disease index of petiole after inoculation withisolate Gwha-1. The general linear model procedure (PROC GLM) in SAS was used to analyze the differential significance (＜0.05) among five strawberry species, including×(41 accessions),(3 accessions),(4 accessions),(3 accessions), and interspecific hybrids (6 accessions). Species were used as fixed factors and tested materials as random factors.【】There was no completely immune material to anthracnose caused byin the tested materials, and all materials had different degrees of disease incidence after 4 days of inoculation withisolate Gwha-1. The comparison of different materials showed that the lesion length on leaf petiole was positively correlated with the lesion number on leaf and the lesion diameter on leaf surface after inoculation. According to the lesion length on petiole after inoculation with C., the anthracnose resistance of the tested materials could be distinguished. The numbers of materials with anthracnose resistance level of high resistance, resistance, medium resistance, medium susceptibility, susceptibility and high susceptibility were 17, 20, 21, 3, 6 and 4, respectively, 81.7% of the tested materials had medium resistance, resistance or higher resistance level to anthracnose caused by. ‘3 Gongzhu’ ‘Senga Sengana’ ‘Darselect’ ‘Allstars’ ‘Kaorino’ ‘Veestar’ and ‘Jingzangxiang’ in the, and ‘Tokun’ in interspecific hybrids had high resistance to anthracnose. In the wild species of strawberry, the resistance level of all the,andtested materials was high resistance, and the disease index ofandwas significantly lower than that of. 【】The anthracnose resistance of 71 strawberry resources was evaluated. Seven cultivars of high resistance to anthracnose were selected from the cultivated strawberries, including ‘3 Gongzhu’ ‘Senga Sengana’ ‘Darselect’ ‘Allstar’ ‘Kaorino’ ‘Veestar’ and ‘Jingzangxiang’. There are high anthracnose resistant resources inand. Their resistance level to anthracnose is significantly higher than that of, which can be used as an antigen source of anthracnose in interspecific hybridization.

strawberry; germplasm resources;; anthracnose; resistance

10.3864/j.issn.0578-1752.2019.20.009

2019-05-13；

2019-05-29

國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金（31701882）、湖北省技術(shù)創(chuàng)新專項(xiàng)-重大項(xiàng)目（2018ABA071）、湖北省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新中心資助項(xiàng)目（2016- 620-000-001-014）

韓永超（通信作者），E-mail：hyc660@126.com

（責(zé)任編輯 岳梅）