西洋參顆粒劑的制備工藝研究

關洪斌,袁震徽，王振波，侯會芳，姜麗萍，張 莉*,黃建軍*

（1.山東大學（威海）海洋學院，威海264209；2.威海博源園林管理有限公司，威海264211；3.參園莊生物科技股份有限公司，威海264211）

西洋參原產于美國、加拿大是五加科草本植物西洋參Panax quinguefoliumL.的根，中國在十八世紀開始引進并種植培養，我國中藥學專家將西洋參定為補益壯體涼性中藥,根據現代中醫藥理論及西藥應用理論我國專家將其應與臨床內熱陰虛壯陽并且起到了很好的療效和作用,之后花旗參逐漸成為一種名貴中藥并且受到國內保健行業的追捧。現在我國東北、華北、西北也有栽培。

人參皂苷為西洋參中主要的有效藥用成分，西洋參與人參所含有的皂苷元種類大體相同，兩者所含有的揮發油及黃酮類物質也基本相似，基本為人參三醇以及人參二醇和齊墩果酸。但是因為人參所含有的人參三醇單體皂苷Fb1遠不及西洋參中的含量，所以人參以及西洋參在應用以及主要療效上各有優劣，兩者不可代替各有特點。另外，西洋參含有假人參皂苷F11。

西洋參的療效及臨床應用與同為名貴中藥的人參有相似之處，但仔細推究卻各有不同。人參因為還有大量多糖及皂苷類成分因而可以助火提氣，西洋參中多糖含量不及人參因此主要功效為降火滋陰。因此對癥狀為喉干口渴的津傷胃燥以及咳嗽貪多的肺陰不足有特別好的療效。西洋參對失音喉干、煙酒過度、煩悶燥熱及食欲消退有很好的療效，此外對于夏季治理小孩煩躁熱虛、食欲不振的癥狀，西洋參也非常適用。

西洋參是抵抗疲勞和增強記憶并對抗體內氧化的滋補良品，也可抑制中樞神經系統的興奮性，可作為平心靜氣的保健產品；此外可以增加心臟肌肉以及血管的活動性，對于預防心腦血管疾病，預防高血壓引起的腦溢血有一定療效，此外還可以增加分泌腎上腺激素增強人體免疫調節能力；對于止血也有一定療效，可以滋補養腎抗利尿。

1 儀器與材料

1.1 實驗儀器

RE52-4旋轉蒸發儀 （上海滬西分析儀器廠）；TDL-5臺式離心機 (上海科興儀器有限公司）；XW-80A漩渦混合器（上海精密科學儀器有限公司）；NDJ-1電熱恒溫水浴鍋（北京醫療電子儀器廠）；722型紫外可見分光光度計 （上海光譜儀器有限公司）；AL204電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）。

1.2 實驗材料

西洋參、山楂、大棗、牛磺酸提取物（由扇貝中分離獲得），葡萄糖適量。

1.3 實驗試劑

乙醇、亞硝酸鈉、硝酸鋁、氫氧化鈉（分析純）、蘆丁對照品98%、75%乙醇（杭州永星五交化有限公司）。

2 實驗方法

2.1 中藥有效組分提取工藝的篩選（L9(33)正交實驗）

以重要成分的提取率為考察指標，以溶劑量及煎煮次數和煎煮時間三因素為考察因素，用來確定制劑組方中有效藥用成分最佳提取工藝。實驗因素如表1所示，正交實驗設計如表2所示。

表1 正交實驗因素水平

表2 正交實驗設計方案

按照制劑組方配比，稱取西洋參3.0g，山楂9.0g，大棗3.0g，為1劑,共9劑，按表1,2進行正交實驗，制得干膏稱重，計算提取率。

2.2 藥材單獨煎煮與混合煎煮有效組分提取率的比較

稱取西洋參3.0g，山楂9.0g，大棗3.0g為1劑，共稱取2劑，其中1劑各味藥材分別煎煮，另外1劑各味藥材混合煎煮，煎煮方法按照正交實驗結果提供的最佳提取工藝流程，最后稱定兩份干膏重量，計算提取率。重復三次，取平均值。

2.3 顆粒劑的制備[1]

2.3.1 處方

西洋參3.0g，山楂9.0g，大棗3.0g，牛磺酸提取物0.1g。

2.3.2 制備

將中藥材提取液濃縮至流浸膏（相對密度1.1～1.2,50℃），加入牛磺酸提取物0.1g和適量葡萄糖粉制成軟材，制粒，干燥，整粒，分劑量裝袋，即得。

2.4 質量標準的制定

2.4.1 性狀

2.4.2 檢查：粒度、水分、溶化性、裝量差異。

2.5 含量測定

2.5.1 總黃酮含量測定

蘆丁標準液的制備：將蘆丁對照品于烘箱中105℃恒重6h，精密稱取30.0000mg，75%乙醇50mL溶解后定容至100mL容量瓶中，搖勻，備用。

2.5.2 標準曲線的繪制

取16支試管，出去空白實驗不做平行實驗外其余5組每組做三次平行實驗，試添加量按表1添加，于500nm處測定吸光度，記錄數據見表3。

表3 制備標準曲線試液(單位:ml)

以Y-吸光度值（A）對X-取樣量（mL）進行線性回歸，其回歸方程為 Y=0.1263X-0.1347（R2=0.9995），實驗數據表明蘆丁的檢測質量在0.17～1.50 mg范圍內線性關系良好。

2.5.3 供試品溶液的制備

精密稱取中濃度的西洋參顆粒制劑樣品(過40目篩)1.0000g，置50mL具塞錐形瓶中，分別加入75%乙醇30mL，密塞超聲30min，重復提取三次后，將各提取液合并，搖勻并抽濾后轉移到100mL容量瓶中定容，作為供試品溶液備。

2.5.4 樣品的測定

分別吸取供試品液1.0mL于25mL容量瓶中，用體積分數75%乙醇動容至5.0mL，加入質量分數為5%的亞硝酸鈉溶液15.0mL，不停搖動直至均勻后靜置5min；加入質量分數為10%的硝酸鋁溶液1.0mL不聽搖動直至均勻后靜置5min；加入質量分數為4%的氫氧化鈉溶液10mL，再加體積分數為75%的乙醇定容至25mL，充分搖動直至均勻后靜置20min。以75%乙醇為空白對照液，分別于500nm波長處測定吸光度。每組做三次平行實驗，計算總黃酮的含量。

2.6 方法學考察

2.6.1 線性關系考察

精密量取蘆丁標準品溶液 0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，移入25mL容量瓶中，分別加入體積分數為75%乙醇至5.0mL，再加入質量分數為5%的亞硝酸鈉溶液1.0mL，充分搖動直至均與后靜置5min；加入質量分數為10%的硝酸鋁溶液1.0mL，充分搖勻靜置5min；加入質量分數為4%的氫氧化鈉溶液10.0mL，再加體積分數為75%的乙醇定容至25mL充分搖勻后靜置20min，平行3次。以75%乙醇為空白對照液，于500nm波長處測定吸光度。并以Y-吸光度值（A）對X-取樣量（mL）進行線性回歸。

2.6.2 回收率實驗

精密稱取西洋參顆粒制劑樣品1.0000g 5份，分別加入0.30mol/mL的蘆丁對照品溶液2.0mL，制備樣品并測定。

2.6.3 精密度實驗

精密稱取西洋參顆粒制劑樣品1.0000 g，按樣品測定操作制備黃酮待測溶液，連續測5次，測得吸光度并計算含量。

2.6.4 穩定性實驗

精密稱取中濃度的西洋參顆粒制劑樣品1.0000g，按樣品測定操作制備黃酮待測溶液，每隔10min測一次吸光度，記錄在60min內的吸光度值。

2.6.5 重復性實驗

精密稱取中濃度的西洋參顆粒制劑樣品1.0000g，按樣品測定操作制備黃酮待測溶液，重復5次，進行測定，測得吸光度并計算含量。

3 結果與分析

3.1 正交實驗結果

根據正交實驗可以判斷三個因素對提取率的影響依次為A＞B＞C，最優組合為A3B3C3，即8倍量的溶劑煎煮3次，每次2h。

3.2 藥材單獨煎煮與混合煎煮有效成分提取率的比較

單獨煎煮提取率：22.98%；混合煎煮提取率：22.89%。從結果來看，單獨煎煮的提取率稍高，但兩者相差并不大。可采用混合煎煮以節省資源和時間。

3.3 質量標準的制定

3.3.1 性狀

本品為棕色至棕褐色顆粒，味甜。

3.3.2 檢查

3.3.2.1 粒度

無法通過一號篩孔以及可以通過五號篩孔的顆粒及粉末占成品顆粒的9.13%，符合藥典規定的15%，故對該顆粒粒度規定為：無法通過一號篩和能通過五號曬的粉末和顆粒共占成品顆粒的10%。

3.3.2.2 水分

顆粒水分含量為4.7%，小于藥典規定的6.0%。故對該顆粒的水分規定為其含水量不得超過5.0%。

3.3.2.3 溶化性

顆粒在5min內全部溶化，溶化性好。

3.3.2.4 裝量差異

10袋樣品中，有1袋少于標示量3.94%，有1袋少于表示量4.20%，其它均合格，裝量差異符合藥典標準。

3.3.3 含量測定

總黃酮含量測定，結果見表4。

表4 西洋參顆粒制劑總黃酮含量分析結果

3.4 方法學考察

3.4.1 線性關系考察

其回歸方程為Y=0.1263X-0.1347（R2=0.9995），實驗數據表明蘆丁檢測質量在0.17～1.50 mg范圍內線性關系良好。

3.4.2 回收率實驗平均回收率為101.18%，RSD=0.99%(n=5)。

3.4.3 精密度實驗：RSD=1.32%(n=5)。

3.4.4 穩定性實驗：RSD值分別為1.62%（n=7）。

3.4.5 重復性實驗：RSD=1.59%(n=5)。

4 討論

4.1 正交實驗設計篩選制備工藝。在制備西洋參顆粒劑的整個過程中，首要的也是最重要的一個步驟就是如何能將中藥中的有效組分提取出來，傳統的煎煮方法給了我們一些啟示，盡管不一定是最好的，但幾百年甚至幾千年的經驗證明它們是有效的。不同的藥材對煎煮條件有不同的選擇，因此在常用的條件組合中，采用正交實驗設計篩選出其中最好的一種。針對該處方的四味藥材而言，加8倍量的溶劑煎煮3次，每次2h是最佳提取工藝。

4.2 藥材單獨煎煮和混合煎煮后有效組分的提取率以及成分本身的變化。從提取率方面來考察，兩者相差并不大。至于功效方面，有待進一步探索。

4.3 制定質量標準。以有效成分總黃酮含量指標對制劑進行質量控制。

4.4 本產品具有可以保持人體正常血壓以及預防動脈粥樣硬化，防止心腦血管疾病的獨特療效，制作工藝簡單，產品易于保存，增加了西洋參深加工產品品種，利于工業化生產。將中藥組方制成顆粒劑是中藥現代化的一種嘗試，它克服了傳統服用方法上的缺陷，將現代劑型與古老的中藥組方相結合，有利于推動中藥的現代化、國際化。