祛黃褐斑丸質量標準的初步研究

朱彩燕　謝宜杰　廖華衛　黃曉明

摘? 要：目的 建立祛黃褐斑丸的質量標準。方法 顯微鑒別祛黃褐斑丸中當歸、黃芩、巴戟天三味藥材;采用薄層色譜法對祛黃褐斑丸中淫羊藿、黃芩兩味藥材進行定性鑒別。結果 方中當歸、黃芩、巴戟天三味藥材顯微特征明顯，圖像清晰;方中淫羊藿、黃芩兩味藥的薄層色譜具有鑒別特征，色譜斑點清晰，專屬性強，Rf值適中，陰性對照無干擾。結論 顯微鑒別與薄層色譜法簡便、可靠、準確，可用于該制劑的質量控制。

關鍵詞：祛黃褐斑丸? 質量標準? 薄層鑒別? 顯微鑒定

中圖分類號：R-332 ? ?文獻標識碼：A 文章編號：1672-3791（2019）07（b）-0198-04

Abstract： ObjectiveTo establish the quality standard for Cleaning Away chloasma Pill. Methods The Microscopic identification was used to identify Angelica? sinensis， Scutellaria baicalensis georgi and Morinda officinalis. The thin-layer chromatography（TLC） technique was used to identify epimedium and Scutellaria baicalensis. Results The microscopic features were obvious. The chromatographic spots were clear and specific，and the Rf values were moderate. The negative controls were without interference. Conclution The method of TLC and Microscopic identification and was convenient，effective and accurate for the quality control of Cleaning Away chloasma Pill.

Key Words： Cleaning Away chloasma pill; Quality Standard; Thin-layer chromatography; Microscopic identification

丸劑的制備方法主要有：泛制法、塑制法、滴制法。泛制法用于水丸、水蜜丸、糊丸、濃縮丸、微丸等的制備;丸劑具有以下優點：藥物的有效利用率較高;釋藥緩慢而持久，適宜于慢性病的調養治療，并能延緩毒劇藥物在體內的吸收，減少不良反應;生產設備及技術工藝簡單等。但丸劑也存在著嚴重的缺點：由于賦形劑的特殊性，生產過程中容易造成崩解度不合格，染菌嚴重，衛生學不符合要求，口味不佳，用藥周期長，服藥量大，不適合急癥用藥等。

水丸大生產只能用泛制法，但工藝繁瑣，周期長，占地面積大，崩解及衛生標準難控制等，而用機器塑制法制備則可克服上述缺點[1]。若處方中的藥物粘性較差，加熱水也不足以激發其粘性時，可適量加一些淀粉漿或糊精漿作為粘合劑，淀粉和糊精的用量以能改善藥料粘性但不影響藥丸溶散為宜，一般用10%的量，即可達到目的，藥料的硬度一般應以成坨而不松散為宜[2]。

蜜丸指將藥物細粉以煉制過的蜂蜜為黏合劑制成的丸劑。制備蜜丸可以通過調整用2蜜量或用水量、煉蜜的程度及和坨時的蜜溫和水溫調整藥材的粘性和硬度。制蜜丸時用蜜量一般是藥粉的0.8～0.9倍[3]。何群等[4]用正交試驗法探討了降脂丸制備工藝中蜜與藥粉比例、煉蜜程度、和坨溫度三因素對丸型成型質量的影響，結果表明，老蜜（d=1.42）在80℃左右和坨，藥粉與蜜為1∶1.56時，制出的小蜜丸最好。肖何用正交實驗法對六味地黃丸制劑的和坨工藝進行了改進研究，優選出最佳工藝條件，即每次加軟材16kg，軟材溫度30℃，輔料50mL，和坨時間15min，上述因素對和坨的影響程度依次為軟材量>和坨時間>輔料量>軟材溫度，結果表明，新工藝成品率提高6.5%，減輕了勞動強度，并首次選用混合機制軟材、煉膠機和坨的方法制備可泡服型小蜜丸[5]。

傳統蜜丸制備所用的黏合劑為煉制過的蜂蜜，有報道改用蜂蜜：糖：水（1∶1∶0.3）及適量酒石酸混合一起煉制，改進后的黏合劑粘性強，與藥粉混合后可塑性好，且節約蜂蜜用量，降低成本[6]。以中醫藥理論為指導，開展復方研究，大力進行劑改。中醫方劑多為復方，而且每個方劑都有其特定的配伍法度。完善丸劑質量標準，提高藥物質量。丸劑的質量關系到它的生存與發展，關系到人們的健康。目前不少中成藥缺乏可靠的質量標準，療效不夠穩定。今后應在現有基礎上采用一些新的分析方法對中藥丸劑進行定性鑒別和含量測定，提出藥效成分的標示量范圍和毒劇藥成分的限量，確保丸劑的有效性和安全性。

該方中以巴戟天、菟絲子、淫羊藿為君，滋腎補肝;再以熟地黃、玉竹、枸杞子、白芍養陰潤肺、益胃生津;歸身和養血脈，黃芪、苡米、蒼術健脾益氣，輔助主藥共使肝腎肺脾胃、精氣血陰陽俱能得養，做到補而不燥，滋而不膩，共為臣藥。更佐川芎、丹皮、茺蔚子活血化瘀，柴胡疏肝解郁，調理氣血，黃芩清熱燥濕解毒，白蘚皮祛風止癢，防風散風，引藥到達病所，利皮毛而潤膚除斑。

此次研究對去黃褐斑丸的性狀、鑒別、檢查進行了研究和制訂，其中著重通過薄層色譜法和顯微鑒別法對去黃褐斑丸的君臣佐使等重要藥味進行定性鑒別，確定方中各種中藥主要的有效成分，研究改變后對有效成分的穩定性和差異性，從而初步確定以祛黃褐斑丸中主要有效成分來判斷本品的質量是否合格，使制劑質量具有可控性與穩定性，保證臨床療效的穩定與安全。

1? 儀器與試劑

1.1 實驗儀器

HH-S數顯恒溫水浴鍋，江蘇金壇市金城國勝實驗儀器廠;ZF-20D暗箱式紫外分析儀，上海寶山顧村電光儀器廠;CS-800A型高速多功能粉碎機;辰和盛豐工貿有限公司;KQ3200型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司;BCD-257SL電冰箱，青島海爾股份有限公司;GB/T6003.1-1997標準檢驗篩，浙江省上虞市滬江儀器紗篩廠;數顯鼓風干燥器，上海福瑪實驗設備有限公司。

1.2 實驗材料

祛黃褐斑丸（自制，批號：140101、140402、140403）;淫羊藿對照藥材（120831-201308）、黃芩對照藥材（121073-201011）、當歸對照藥材（121023-201308）、白芍對照藥材（121165-201204）均購自廣東天泰藥業有限公司;硅膠G（140909）由青島海洋化工有限公司提供;水合氯醛、甲醇、三氯化鐵、甲酸、三氯甲烷、乙醇、乙醚、乙酸乙酯、石油醚、石油醚、濃氨試液、濃硫酸、甘油均為分析純。

2? 方法與結果

2.1 祛黃褐斑丸顯微鑒定方法

2.1.1 黃芪的顯微鑒定

取祛黃褐斑丸（批號：140401）粉碎過100目篩，取少量粉末，加水合氯醛透化2次，稀甘油裝片，置顯微鏡下觀察：纖維成束或散離，壁厚，表面有縱裂紋，兩端斷裂成帚形或較平截（黃芪）（見圖1）。

2.1.2 巴戟天的顯微鑒定

取祛黃褐斑丸（批號：140401）粉碎過100目篩，取少量粉末，加水合氯醛透化2次，稀甘油裝片，置顯微鏡下觀察：石細胞類圓形、類方形、類長方形、長條形或不規則形，有的一端尖，層紋、紋孔和孔溝明顯，有的石細胞形大，壁稍厚（巴戟天）（見圖2）。

2.1.3 當歸的顯微鑒定

取祛黃褐斑丸（批號：140401）粉碎過100目篩，取少量粉末，加水合氯醛透化2次，稀甘油裝片，置顯微鏡下觀察：薄壁細胞紡錘形，壁稍厚，有極微細的斜向交錯紋理（當歸）（見圖3、圖4）。

2.2 祛黃褐斑丸的薄層色譜鑒別方法

2.2.1 淫羊藿的薄層鑒別

（1）樣品制備。

取本品粉末5g，加乙醇20mL，超聲處理15min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1mL使溶解，作為供試品溶液。取淫羊藿對照藥材粉末1g，同法制成對照藥材溶液。同供試品溶液制成陰性對照溶液。

（2）色譜條件。

①層析材料以0.5%羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板。

②點樣量供試品溶液、陰性對照溶液各2μL及對照藥材溶液各2μL。

③展開劑以石油醚-乙酸乙酯（4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干。

④展開方式向上展開。

⑤顯色置于水平桌面，365nm紫外光燈觀察至斑點顏色清晰。

（3）實驗結果。

按擬定的方法進行試驗，結果：淫羊藿陰性對照色譜中，在與供試品色譜和淫羊藿對照藥材色譜相應的位置上，不顯相同顏色的熒光斑點，表明淫羊藿陰性樣品無干擾（見圖5）。

2.2.2 黃芩的薄層鑒別

（1）樣品制備。

供試品溶液的制備：取本品粉末5g，加乙醇100mL，超聲處理30min，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇1mL使溶解，作為供試品溶液。取黃芩對照藥材粉末1g，加乙醇20mL，超聲處理30min，濾過，同法制成對照藥材溶液。同對照藥材法制成陰性對照溶液。

（2）色譜條件。

①層析材料：含4%乙酸鈉的羧甲基纖維素鈉為粘合劑的硅膠G薄層板。

②點樣量：供試品溶液2μL、對照藥材溶液與陰性對照溶液各5μL。

③展開劑：以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶3∶1∶1）為展開劑。

④展開方式：向上展開。

⑤顯色：分別置日光下檢視。

（3）實驗結果。

按擬定的方法進行試驗，結果：黃芩對照藥材色譜在與供試品色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，陰性樣品無干擾，表明方法可行（見圖6）。

3? 結論

該實驗證明祛黃褐斑丸中黃芪、巴戟天、當歸具有顯微鑒別特征，可用于該品的顯微鑒定。對該品中淫羊藿、黃芩二味藥的薄層鑒別，其斑點清晰，展開效果好。可作為祛黃褐斑丸質量控制方法之一，為祛黃褐斑丸的質量控制和開發提供參考依據。

4? 討論

該實驗采用TLC法對祛黃褐斑丸中淫羊藿、黃芩、川芎等藥材進行了鑒別。在鑒別過程會出現薄層色譜實驗常出現的問題，如：（1）邊緣效應;（2）斑點不清晰或斑點顏色顏色較淺;（3）拖尾現象;（4）與其他干擾斑點分離不開，斑點Rf值過大或過小等。所以解決的方法有：（1）點樣量適宜，原點直徑應不大于3mm，若點條狀帶，則其“高度”應控制在1mm左右，或在原有展開劑比例的基礎上加適量酸或堿。（2）噴顯色劑使斑點清晰或濃縮供試品溶液，使其濃度增加。如白芍的主要有效成分為芍藥苷，可選5%香草醛硫酸溶液作為其顯色劑。（3）適當調整展開劑的極性，以將目標斑點與干擾斑點分離得更完全和使斑點的 Rf值控制在0.2～0.8范圍內。（4）展開劑應現配現用，應當在配好后，強烈振搖，靜置，以使展開劑的各組分充分混勻。預飽和時間應為20min以上，部分藥物需要長時間預飽和，如淫羊藿，其預飽和時間應為30min左右。展開缸的密閉性應良好。此次實驗也對川芎藥材進行了薄層色譜鑒別，但由于有陰性干擾，故不列入此次研究內容。

該實驗顯微鑒別特征明顯，可用于方中藥材的鑒定。TLC中各種成分的陰性對照均無干擾，方法專屬性強，簡單操作，準確度高，建議可作為該制劑的質量標準控制的內容之一。

參考文獻

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[6] 劉明樂，陸世鐘.蜜丸黏合劑的改進探討[J].中藥材，1995，18（2）：64.