奶牛子宮炎性腔液外泌體小RNA分布和組成分析

田 鳳，常震宇，丁 進(jìn)，李成忠，馮 妍，封紫嫣，倪和民，盛熙暉，齊曉龍，邢 凱，郭 勇，王相國(guó)*

(1. 北京農(nóng)學(xué)院 動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，北京 102206；2. 北京雄特牧業(yè)有限公司，北京 100101；3.昌平區(qū)動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督管理局十三陵防疫站，北京 102200)

子宮內(nèi)膜炎是奶牛圍產(chǎn)期后由于多種細(xì)菌感染子宮內(nèi)膜引發(fā)的一種嚴(yán)重影響奶牛業(yè)發(fā)展的疾病[1-2]。炎癥的嚴(yán)重程度、子宮內(nèi)膜損傷后恢復(fù)時(shí)間、子宮內(nèi)膜腺體的損傷及輸卵管環(huán)境改變嚴(yán)重影響了奶牛的繁殖活動(dòng)[3]，其導(dǎo)致的奶牛屢配不孕，對(duì)養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失[4-5]。根據(jù)奶牛子宮內(nèi)膜炎的癥狀分為卡他性、黏液性、纖維蛋白性、膿性子宮內(nèi)膜炎和隱性子宮內(nèi)膜炎[1-2]。目前，根據(jù)臨床癥狀和分泌物的分析來判斷子宮內(nèi)膜炎的方法，不僅發(fā)現(xiàn)早期病變的速度慢，而且影響奶牛子宮內(nèi)膜炎的早期治療。因此，對(duì)子宮內(nèi)膜炎疾病的早期診斷就顯得尤為重要。

外泌體及其內(nèi)含的小RNA，在不同疾病的進(jìn)展中扮演者重要的角色。Taylor等[6]通過外泌體中小RNA的表達(dá)譜研究證實(shí)其差異表達(dá)可為卵巢癌疾病的預(yù)測(cè)提供依據(jù)。Cazzoli等[7]發(fā)現(xiàn)肺腺癌、肺肉芽腫患者外泌體內(nèi)miR-378可以作為肺癌的生物標(biāo)志物。Skog等[8]發(fā)現(xiàn)神經(jīng)膠質(zhì)外泌體內(nèi)小RNA同樣有差異表達(dá)。另有研究表明，外泌體及其小RNA還可作為疾病的一種治療方法[9]。然而，外泌體及其小RNA在奶牛子宮內(nèi)膜炎診斷中的診斷與應(yīng)用尚鮮見報(bào)道。

本試驗(yàn)采用透射電鏡、蛋白免疫等分子手段對(duì)健康和患病奶牛子宮腔液中外泌體進(jìn)行驗(yàn)證，并通過基因組測(cè)序?qū)ν饷隗w中的小RNA的長(zhǎng)度、分布比例及組成進(jìn)行分析?！?br>