森林草莓FvWRKY22基因的克隆及表達分析

韓遠芳，趙帥琪，李伊然，谷 思，邢 宇

(北京農學院 植物科學技術學院，農業應用新技術北京市重點實驗室，北京林果業生態功能提升協同創新中心，北京 102206)

存在于高等植物中的WRKY 轉錄因子是植物中最大的轉錄因子家族之一，因其氨基酸序列中含有高度保守的WRKY結構域而得名。WRKY蛋白根據序列中WRKY域的數量以及鋅指結構的類型，將WRKY轉錄因子分為三組(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ)。WRKY蛋白另一個典型的特征是通過與其靶基因啟動子中的W-box [TGACC(A / T)]結合來調控下游基因的表達[1]。

植物生長在外界壞境中會受到各種各樣的侵害，當植物機體受到機械損傷、病原物侵害、生物脅迫以及非生物脅迫時，WRKY基因都可以快速而大量的表達[2]。目前，越來越多的WRKY基因都被證明與植物抗病有關，例如，OsWRKY22不僅能夠正向調控稻瘟病，還能與ART1互作共同調控增強水稻的耐鋁性[3]；將辣椒中的CaWRKY27在煙草中過表達后發現增強了其對青枯病的抗性[4]。

草莓(Fragaria×ananassa)薔薇科草莓屬的多年生草本植物[5]，因其香甜可口顏色艷麗又富含多種營養物質，而深受人們喜愛，到目前為止，我國草莓的種植面積和產量都處于世界領先地位，但是在草莓生產中，長年連續栽種使草莓重茬病害頻發，導致產量下降品質降低。

草莓的倍性豐富，栽培草莓多以八倍體為主供人們食用，而二倍體草莓多為野生草莓，具有遺傳背景簡單，基因組小，生命周期短等特點，進而成為研究草莓基因功能的理想模式植物。本文以森林草莓‘Hawaii 4’作為試驗材料，通過基因克隆、生物信息學分析及實時熒光定量分析等手段，以期闡明FvWRKY22在草莓抗重茬中的作用，對草莓抗重茬病的改良具有十分重要意義。……