D-二聚體聯合CA19-9、SCC對食管癌的診斷價值

趙樂，楊國棟，常永超

(河南科技大學第一附屬醫院檢驗科，河南 洛陽471003)

食管癌(EC)是一種常見消化道腫瘤，以進行性咽下困難為主要臨床表現[1]。流行病學調查顯示[2]其病死率位于全世界范圍內惡性腫瘤的第6位，而我國是EC高發國家之一。目前，臨床上常用的手術與放療相結合的綜合性療法對無明顯遠處轉移征象的患者療效較好[3]，但EC在臨床上缺乏有效的早期診斷手段，EC檢出時往往已處于中晚期，因此尋找有效的EC診斷方法對提升患者預后有重要意義。有研究顯示[4]，癌胚抗原類、相關血清蛋白、肽類等血清腫瘤標志物能有效反映腫瘤增殖情況，可用于輔助判斷腫瘤發生、病情變化及預后評價。然而，目前尚未發現理想可靠的特異性腫瘤標志物可作為臨床指標應用于食管癌的診斷。為此，本文檢測食管癌患者血清中D-二聚體 (DD)、糖類抗原19-9(CA19-9)、鱗狀細胞癌抗原(SCC)水平，探討D-D聯合CA19-9、SCC對EC的診斷價值，旨在尋找可靠的特異性腫瘤標志物應用于EC的診斷，現報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2015年12月-2018年12月我院收治并確診的135例EC患者為EC組，同期在院健康體檢者72例為對照組。納入標準：①EC經影像學或病理細胞學檢查確診；②未患肝臟疾?。虎廴虢M前未 使用肝素等影響凝血系統、纖溶系統的藥物；④無心臟病史；⑤入組前未接受放化療、生物治療等抗癌治療。排除標準：①合并其他凝血系統、纖溶系統疾??；②合并心、腦血管疾?。虎鄄±Y料不完整；④合并其他惡性腫瘤；⑤依從性不好者；⑥肝功能、腎功能異常。EC組：男69例，女 66例，年齡 35～80歲，平均年齡(55.16±16.80)歲；TNM臨床分期：Ⅰ期12例，Ⅱ期21例，Ⅲ期46例，Ⅳ期56例。對照組：男34例，女38例，年齡33～78 歲，平均年齡(55.97 ±16.11)歲。 兩組年齡、性別比較差異無統計學意義(P＞0.05)。本研究經我院醫學倫理委員會批準，所有患者及家屬對本研究知情了解，且簽署知情同意書。

1.2 研究方法 采集EC組(術前、術后2周及隨訪中發生復發轉移后)和對照組清晨空腹靜脈血，3000r／min離心10min，分離血清后于-80℃冰箱保存備測。采用采用膠體金雙抗體夾心法檢測血清D-D水平，采用電化學發光免疫分析法(ECLIA)檢測血清中CA19-9水平，采用化學發光法(CL)檢測血清中SCC水平。D-D試劑盒購于北京威泰科生物技術有限公司，CA19-9定量測定試劑盒購于北京科美生物技術有限公司，SCC測定試劑盒購于上海戶實醫藥科技有限公司。

1.3 統計學方法 采用spss22.0軟件進行統計分析，計量資料比較采用Kruskal-Wallis H秩和檢驗，計數資料比較采用卡方檢驗。P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 術前EC組與對照組血清D-D、CA19-9、SCC水平 與對照組比較，術前EC組血清D-D、CA19-9、SCC水平顯著升高，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

表1 術前EC組與對照組血清D－D、CA19－9、SCC水平()

表1 術前EC組與對照組血清D－D、CA19－9、SCC水平()

組別 D-D（μg／ml） CA19-9（U ／ml） SCC（μg／l）對照組（n=72）EC 組（n=135）ZP 0.95±0.39 1.69±0.91-3.043 0.002 29.85±8.20 155.80±41.40-6.487＜0.001 0.46±0.17 1.94±1.41-5.304＜0.001

2.2 不同臨床分期的EC患者血清D-D、CA19-9、SCC水平 與Ⅰ～Ⅱ期比較，Ⅲ期、Ⅳ期EC患者血清D-D、CA19-9、SCC水平明顯上升，差異有統計學意義(P＜0.05)；與 Ⅲ期比較，Ⅳ期EC患者血清D-D、CA19-9、SCC水平明顯升高，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表 2。

表2 不同臨床分期的EC患者血清D－D、CA19－9、SCC 水平()

表2 不同臨床分期的EC患者血清D－D、CA19－9、SCC 水平()

注：與Ⅰ～Ⅱ期比較，aP＜0.05；與Ⅲ期比較，bP＜0.05

臨床分期 D-D（μg／ml） CA19-9（U／ml） SCC（μg／l）Ⅰ～Ⅱ期（n=33）Ⅲ期（n=46）Ⅳ期（n=56）HP 1.31±0.52 1.81±0.94a 2.37±0.95ab 11.538 0.003 51.65±11.19 135.67±36.30a 237.79±51.39ab 26.791＜0.001 0.59±0.15 1.97±1.59a 2.20±1.68ab 9.463 0.009

2.3 EC組手術前后和隨訪中發生復發轉移后血清D-D、CA19-9、SCC水平 與術前比較，術后EC患者血清D-D、CA19-9、SCC水平明顯下降，差異有統計學意義(P＜0.05)；與術后比較，復發轉移后EC患者血清D-D、CA19-9、SCC水平明顯上升，差異有統計學意義(P＜0.05)；復發轉移后EC患者血清D-D、CA19-9、SCC水平顯著高于術前，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表 3。

2.5 D-D、CA19-9、SCC及三者聯合對EC診斷效能比較 D-D、CA19-9、SCC三者聯合檢測對 EC診斷效能明顯優于單獨檢測D-D、CA19-9、SCC(P＜0.05)，見表 4。

表3 EC組手術前后和隨訪中發生復發轉移后血清DD、CA19－9、SCC水平()

表3 EC組手術前后和隨訪中發生復發轉移后血清DD、CA19－9、SCC水平()

注：與手術前比較，aP＜0.05；與手術后比較，bP＜0.05

組別 D-D(μg／ml) CA19-9(U ／ml) SCC(μg／l)手術前(n=135)手術后(n=135)復發轉移后(n=34)HP 1.69±0.91 1.28±0.67a 2.23±0.86ab 10.001 0.007 155.80±41.40 32.19±13.39a 217.69±54.39ab 39.451＜0.001 1.94±1.41 0.50±0.34a 3.95±1.33ab 12.386 0.002

3 討論

EC是一種常見的難治療的消化道疾病，亞硝胺、真菌、微量元素(鉬、鐵、鋅、氟、硒等)缺乏、不良飲食習慣(食物過硬、熱食、熱飲、進食過快等)等因素均可引發EC[5]。EC發生后，患者咽下困難，逐漸脫水、無力、消瘦，后期表現為持續胸痛或背痛，此時癌已侵犯食管外組織[6]。當癌侵入支氣管，可形成支氣管瘺，發生呼吸系統感染[7]；當癌侵犯喉返神經，可出現聲音嘶啞；當癌腫壓迫頸交感神經節，可產生頸交感神經麻痹綜合征(cervical sympathetic paralysis syndrome，CSPS)；當發生肝轉移，可出現腹腔積液、黃疸(jaundice)等；當發生腦轉移，可出現昏迷、意識障礙等狀態[8]。臨床上，針對EC常采用手術與放療相結合的綜合性療法，對無淋巴結、肝臟、腦部等臟器轉移的早期EC患者有一定療效，其5年生存率有所改善，但多數EC患者確診時已處于中晚期，往往錯過最佳治療時間。因此，進一步尋找和鑒定與EC相關的特異性血清腫瘤標志物對EC早期診斷十分必要。

D-D是交聯纖維蛋白(Crosslinked fibrin)在纖溶酶(plasmin)作用下裂解產生的一種代謝產物，其水平升高可提示反映凝血和纖維系統的激活，是體內血栓 (thrombus)形成的特異性分子標志物之一。有文獻報道[9]，腫瘤細胞浸潤、血液高凝狀態、thrombus形成之間存在一定關系。Sijie Y等[10]發現，當腫瘤細胞出現黏附、聚集時，可促使正常細胞壞死而釋放促凝血物質。Bartoszynski R等[11]報道，非小細胞肺癌 (nonsmall-cell lung cancer，NSCLC)患者的血清中D-D含量明顯高于正常人，這在本文中也得到了證實。本文結果顯示，術前EC組血清D-D水平顯著高于對照組，術后兩周開始接近正常水平，且D-D水平隨TNM分期的升高而上升，提示惡性腫瘤發生時常伴凝血及纖溶異常，表明D-D檢測可為EC病情程度及手術效果的判斷提供一定幫助。分析其原因，可能是EC細胞細胞外基質(extracellular matrix，ECM)中的Fibrin對此起決定性作用。有研究顯示[12]，交聯纖維蛋白在EC細胞ECM中可構成穩定的骨架結構，從而用于內皮細胞(Endothelial cell)遷徙及EC細胞浸潤、擴散。CA19-9是細胞膜上的一種糖脂質，屬1型糖類抗原，主要分布于正常成年人胰腺、膽管上皮等處及正常胎兒膽囊、胰腺、腸中，在血清中以唾液黏蛋白(sialomucin)形式存在。Wada N等[13]研究結果顯示，CA19-9水平在胰腺癌患者血清中明顯上升，且其血清學水平影響患者預后。本結果顯示，術前EC組血清CA19-9水平顯著高于對照組，術后2周時較術前明顯下降，且術后跟蹤隨訪，經診斷證實發生復發及轉移的患者血清CA19-9水平又升高，由此提示可通過動態觀察CA19-9水平判斷手術效果，且其對術后檢測腫瘤復發轉移有一定的參考價值。SCC是一種分布于頭頸、肺、子宮等鱗狀細胞癌(squamous cell carcinoma)細胞胞質中的糖蛋白，與腫瘤細胞活躍程度密切相關。研究表明[14，15]，SCC是一種檢測腫瘤手術療效特異性很好的鱗癌腫標志物，且是重要的預后指標。本文中，術前EC組血清SCC水平顯著高于對照組及術后、復發轉移后水平，且SCC水平隨TNM分期的升高而上升，提示SCC水平與EC患者TNM分期呈正相關，該指標可反映腫瘤惡性程度，表明SCC水平變化對EC發生、病情進展有一定提示意義。隨后，我們比較D-D、CA19-9、SCC及三者聯合對EC診斷效能，發現D-D、CA19-9、SCC有一定診斷價值，但敏感性不強，將三個指標聯合后發現其對EC診斷效能明顯優于單獨檢測D-D、CA19-9、SCC，由此提示多種腫瘤標志物聯合診斷EC較單一腫瘤標志物檢測更具有臨床價值。

表4 D－D、CA19－9、SCC及三者聯合對EC診斷效能比較

綜上，D-二聚體聯合CA19-9、SCC檢測可彌補單項指標對EC敏感性弱的缺點，為EC診斷提供重要的參考價值。