肺腺癌患者EGFR基因突變與血清VEGF和腫瘤標(biāo)志物的關(guān)系研究

胡雨薇

肺癌的死亡率居眾多腫瘤死亡率之首，而肺癌患者中有近80%的患者所患肺癌種類為非小細(xì)胞肺癌，而作為非小細(xì)胞肺癌重要類型之一的肺腺癌的發(fā)病率逐年上升，成為非小細(xì)胞肺癌中的主要類型[1，2]。近年由于診斷技術(shù)以及治療方式逐漸改進，肺腺癌患者的預(yù)后有一定改善，但尚未達到預(yù)期效果，探究新型有效的治療方式是腫瘤研究者們一直努力的方向[3]。靶向治療可以特異性作用于腫瘤病灶，改善治療效果，靶向治療中使用酪氨酸激酶抑制劑可以對表皮生長因子受體（EGFR）基因突變癌細(xì)胞予以特異性抑制，改善患者預(yù)后[4]。肺腺癌患者血清中癌胚抗原（CEA）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）、細(xì)胞角蛋白19（CYFRA21-1）等的表達水平可用于評價肺腺癌的療效[5]，但研究者們對這些血清腫瘤指標(biāo)與EGFR 基因突變的關(guān)系意見不一。本研究深入探究肺腺癌患者血清CEA、VEGF、CYFRA21-1 的表達水平及與EGFR 基因突變之間的關(guān)系，為后期此類患者靶向治療方案的制訂提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 一般資料 回顧性分析2017年9月～2018年9月在我院接受治療的132 例肺腺癌患者的相關(guān)資料。其中男71 例，女61 例，年齡30～86 歲，平均（60.26±5.16）歲；腫瘤分期：Ⅰa～Ⅲa 和Ⅲb～Ⅳ分別為53 例和79 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①病理檢測證實為肺腺癌患者；②首次治療前均接受血清標(biāo)志物檢查，且接受EGFR 基因突變檢查；③患者資料均無遺失。排除標(biāo)準(zhǔn)：①鱗癌患者；②未被確診者；③僅接受血清腫瘤標(biāo)志物與EGFR 基因突變中一項檢查者。

1.2 方法

1.2.1 血清腫瘤標(biāo)志物測定 治療前抽取靜脈血后離心得到血清，使用酶聯(lián)免疫吸附法測定CEA、VEGF、CYFRA21-1 水平，其指標(biāo)處于下列范圍顯示為陰性，CEA：0～5.0μg/L，VEGF：0～50μg/L，CYFRA21-1：0～3.3ng/ml，超出上述范圍顯示為陽性。

1.2.2 EGFR 基因突變測定 使用ARMS 法對EGFR基因突變類型中各個外顯子突變進行檢測，所有檢測均使用試劑盒進行，測試過程依據(jù)試劑盒說明書操作，質(zhì)量控制采用陰性、陽性以及空白對照，其中Ct＜26 為 陽 性，而Ct≥29 與26≤Ct＜29 分 別 為EGFR 突變陰性以及可疑陽性。

1.3 觀察指標(biāo) 分析患者EGFR 基因突變情況、EGFR 基因突變與患者一般資料與血清腫瘤標(biāo)志物之間的關(guān)系，EGFR 基因突變幾率與患者血清CEA、VEGF、CYFRA21-1 水平的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 20.0 軟件進行數(shù)據(jù)分析與處理，各組計數(shù)資料均使用χ2檢驗，計量資料如血清腫瘤標(biāo)志物水平均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，使用t檢驗進行差異比較，相關(guān)性分析使用Pearson 相關(guān)性分析法，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 EGFR 基因突變情況 所有患者進行基因突變測定發(fā)現(xiàn)，EGFR 基因突變陰性與陽性分別81 例（61.36%）和51 例（38.64%），EGFR 基因突變陽性中21 號外顯子錯義突變以及19 號外顯子缺失突變分別30 例（22.73%）和17 例（12.88%），并含兩種突變4 例（3.03%）。

2.2 EGFR 基因突變與一般資料之間的關(guān)系 EGFR基因突變陽性中男性顯著多于女性（P＜0.05），EGFR基因突變較常發(fā)生于無吸煙史患者中，而患者年齡與腫瘤分期與EGFR 基因突變之間關(guān)系不大（P＞0.05），見表1。

表1 EGFR 基因突變與患者一般資料之間的關(guān)系[n（%）]

2.3 EGFR 基因突變與血清腫瘤標(biāo)志物之間的關(guān)系EGFR 基因突變陽性患者血清CEA、VEGF 水平顯著高于EGFR 基因突變陰性患者（P＜0.05），而血清CYFRA21-1 在EGFR 基因突變陰性與陽性患者中差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），見表2。

表2 EGFR 基因突變與患者血清腫瘤標(biāo)志物的關(guān)系（±s）

表2 EGFR 基因突變與患者血清腫瘤標(biāo)志物的關(guān)系（±s）

類型 例數(shù) CEA（μg/L） VEGF（μg/L） CYFRA21-1（ng/ml）陰性 81 35.52±10.18 89.35±10.76 6.81±1.09陽性 51 168.33±32.67 117.33±25.34 7.13±1.35 t 34.12 8.77 1.50 P＜0.05 ＜0.05 ＞0.05

2.4 EGFR 基因突變幾率與血清CEA、VEGF、CYF RA21-1 水平的相關(guān)性分析 相關(guān)性分析顯示患者血清CEA、VEGF 水平與EGFR 基因突變幾率呈正相關(guān)（P＜0.05），而CYFRA21-1 水平與患者EGFR 基因突變幾率無相關(guān)性（P＞0.05），見表3。

表3 EGFR 基因突變幾率與患者血清CEA、VEGF、CYFRA21-1 水平的相關(guān)性分析

3 討論

多項腫瘤治療指南中提出非小細(xì)胞肺癌患者在進行EGFR 受體酪氨酸酶抑制劑靶向治療前需要接受EGFR 基因突變測試以篩選出陽性患者，確保靶向治療效果[6，7]。研究顯示EGFR 基因突變情況與豐度是進行EGFR 受體酪氨酸酶抑制劑靶向治療預(yù)測有價值的指標(biāo)[8]。臨床常通過患者一般資料來篩選EGFR 基因突變陽性的患者，蒲桂梅等[9]研究顯示非吸煙肺腺癌患者出現(xiàn)EGFR 基因突變概率較大，與本研究中相關(guān)結(jié)果一致，但是其研究認(rèn)為女性肺腺癌患者可能是EGFR 基因突變高發(fā)人群，這點與本研究結(jié)果不一致，兩項研究差異可能是由于蒲桂梅研究中納入研究對象中男性比例偏高，這在一定程度上會影響其研究結(jié)果。本研究中EGFR 基因突變陽性患者51 例，陽性率為38.64%，與另一項類似研究中結(jié)果一致[10]。EGFR基因突變多為21 號與19 號外顯子發(fā)生基因突變，20 號與18 號發(fā)生突變情況較為少見，所以本研究中只測定了21 號與19 號基因突變，其中21 號外顯子錯義突變以及19 號外顯子缺失突變發(fā)生率分別為22.73%和12.88%，并含兩種突變的發(fā)生率為3.03%。

血清腫瘤標(biāo)志物由腫瘤細(xì)胞釋放，CEA 與CYFRA21-1 均為重要的腫瘤標(biāo)志物，可由此判斷患者的預(yù)后。已有研究證實CEA 濃度與肺癌患者EGFR 基因突變存在一定的關(guān)系[11]。李磊等[12]認(rèn)為EGFR 基因突變導(dǎo)致患者下游信號通路被激活，從而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化加快，致使CEA 蛋白合成增多。本研究中EGFR 基因突變陽性患者血清CEA 水平顯著高于EGFR 基因突變陰性患者，而患者CEA 水平越高EGFR 基因突變概率越大。本研究中血清CYFRA21-1 在EGFR 基因突變陰性與陽性患者中差異不顯著，這可能是由于CYFRA21-1多見于肺鱗癌，是診斷肺鱗癌特異性指標(biāo)，而EGFR基因突變常見于肺腺癌[13，14]。由于VEGF 不是腫瘤標(biāo)志物，其在腫瘤發(fā)生中的作用常被人們忽略，但是腫瘤整個發(fā)展階段均需要血液提供氧氣與營養(yǎng)物質(zhì)，而VEGF 在整個血管發(fā)生過程中作用重大。有研究顯示VEGF 可將EGFR 所致刺激送入細(xì)胞中，致使細(xì)胞大量增殖，從而發(fā)生腫瘤。韓影等[15]研究顯示VEGF 與EGFR 在低分化非小細(xì)胞肺癌患者體內(nèi)高表達，而在中高分化患者體內(nèi)表達則較少，提示兩者在肺癌患者體內(nèi)呈正相關(guān)，兩者共同作用誘導(dǎo)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。本研究中EGFR基因突變陽性患者血清VEGF 水平顯著高于EGFR基因突變陰性患者，且VEGF 水平越高患者EGFR基因突變概率越大，同樣提示VEGF 水平與患者EGFR 基因變化關(guān)系密切。這可能因EGFR 在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)期間介導(dǎo)腫瘤血管生成，其突變可以使患者體內(nèi)VEGF 水平上調(diào)，致使細(xì)胞凋亡，EGFR 激活致使癌癥細(xì)胞過增殖，細(xì)胞大量增殖對血氧大量需求導(dǎo)致血管增生[16]。

綜上所述，肺腺癌患者血清CEA 與VEGF 水平與患者EGFR 基因突變關(guān)系密切，其可以結(jié)合患者臨床資料篩選出EGFR 受體酪氨酸酶抑制劑靶向治療優(yōu)勢人群，臨床應(yīng)用價值較高。