白細胞介素-1β、白細胞介素-8及腫瘤壞死因子-α與房顫伴凝血功能異常的相關性

戴艷枝 王曉華 劉秋玲 張淑華 周云英 文麗丹 楊海玉

[摘要]目的 研究白細胞介素-1β（IL-1β）、白細胞介素8（IL-8）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）與心房顫動（房顫）伴凝血功能異常的關系。方法 選取2016年1月～2017年12月我院收治的42例房顫患者作為房顫組，其中陣發性房顫14例，持續性房顫28例，另選取同期門診體檢的20例健康者作為對照組。采用酶聯免疫法檢測各組的血漿IL-1β、IL-8、TNF-α水平，分析其與房顫類型、凝血功能參數及血常規參數的相關性。結果 房顫組與對照組的IL-1β水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;房顫組的IL-8、TNF-α水平均明顯高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。陣發性房顫組、持續性房顫組、對照組的IL-1β水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;陣發性房顫組、持續性房顫組的IL-8及TNF-α水平均明顯高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。不同凝血酶原時間、國際標準化比值情況下的IL-1β、IL-8、TNF-α水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;凝血酶時間>16 s患者的IL-1β、TNF-α水平均明顯高于凝血酶時間≤16 s（正常）患者，差異有統計學意義（P<0.05）。IL-1β、TNF-α水平與白細胞計數、紅細胞計數、血小板計數、中性粒細胞百分比、淋巴細胞百分比、單核細胞百分比均無相關性（P>0.05）;IL-8水平與淋巴細胞百分比成正相關（r=0.314，P<0.05）。結論 IL-8及TNF-α水平在房顫患者中增高，提示其可能與房顫發生相關;IL-1β、TNF-α水平增高與房顫伴凝血功能異常相關。

[關鍵詞]白細胞介素-1β;白細胞介素8;腫瘤壞死因子-α;心房顫動;凝血功能

[中圖分類號] R541.75? ? ? ? ? [文獻標識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1674-4721（2019）8（b）-0004-04

[Abstract] Objective To study the relationship between interleukin-1β （IL-1β）， interleukin-8 （IL-8）， tumor necrosis factor-α （TNF-α） and atrial fibrillation with abnormal coagulation function. Methods A total of 42 patients with atrial fibrillation admitted to our hospital from January 2016 to December 2017 were selected as the atrial fibrillation group， including 14 patients with paroxysmal atrial fibrillation， 28 patients with persistent atrial fibrillation， and 20 healthy subjects who underwent physical examination at the same time were selected as the control group. The levels of IL-1β， IL-8 and TNF-α in plasma were detected by enzyme linked immunosorbent assay， and their correlation with atrial fibrillation type， coagulation function parameters and blood routine parameters were analyzed. Results There was no significant difference in IL-1β level between the atrial fibrillation group and the control group （P>0.05）. The levels of IL-8 and TNF-α in the atrial fibrillation group were significantly higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. There was no significant difference in IL-1β level between paroxysmal atrial fibrillation group， persistent atrial fibrillation group and control group （P>0.05）. The levels of IL-8 and TNF-α in paroxysmal atrial fibrillation group and persistent atrial fibrillation group were significantly higher than those in the control group， and the differences were statistically significant （P<0.05）. There were no significant differences in the levels of IL-1β， IL-8 and TNF-α between different prothrombin time and international normalized ratio （P>0.05）. The levels of IL-1β and TNF-α in patients with thrombin time >16 s were significantly higher than those with thrombin time ≤16 s （normal）， and the differences were statistically significant （P<0.05）. There was no correlation between IL-1β， TNF-α levels and white blood cell count， red blood cell count， platelet count， neutrophil percentage， lymphocyte percentage， and monocyte percentage （P>0.05）. The IL-8 level was positively correlated with lymphocyte percentage （r=0.314， P<0.05）. Conclusion The elevated levels of IL-8 and TNF-α in patients with atrial fibrillation suggest that they may be related to the occurrence of atrial fibrillation， and the elevated levels of IL-1β and TNF-α are related to the abnormal coagulation function in patients with atrial fibrillation.

[Key words] Interleukin-1β; Interleukin-8; Tumor necrosis factor-α; Atrial fibrillation; Coagulation function

心房顫動（簡稱房顫）是臨床上常見的一種心律失常，由于心房不規則顫動易產生左心房血栓，導致體循環栓塞、腦卒中等并發癥，嚴重者甚至危及生命，具有高發病率、高致殘率、高致死率等特點。近年來，一些研究顯示炎癥過程與房顫的發生、發展有關，流行病學調查、病例-對照研究、組織學研究以及抗炎藥物治療都為證實炎癥與房顫的關系提供了充分證據[1-8]。目前，有研究者提出假說，認為房顫發生的血栓前狀態（即血液高凝狀態）與炎癥相關，同時也是腦卒中和血栓栓塞發生的風險因素[9]。已有研究證實房顫患者血漿炎性因子水平增高并伴有血液黏性增高，支持房顫過程中炎性狀態的存在，而且炎性指標的改變與血栓前狀態相關，并提示預后不佳[9-11]。本研究通過選擇符合入選標準的房顫患者及健康對照者，采集其外周血檢測血漿炎性標志物白細胞介素-1β（IL-1β）、白細胞介素8（IL-8）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的水平變化，并分析炎性因子水平變化與凝血功能參數及血常規參數的相關性，為進一步闡明炎癥與房顫的關系提供臨床依據，現報道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選取2016年1月～2017年12月我院收治的42例房顫患者作為房顫組，男20例，女22例;年齡43～79歲，平均（61.00±8.40）歲。另選取同期門診體檢的20例健康者作為對照組，男11例，女9例;年齡40～78歲，平均（57.00±10.60）歲。房顫組與對照組的一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。房顫組納入標準：符合中國心房顫動治療指南（2006年修訂版）診斷標準[12]。排除標準：急性冠脈綜合征、近期感染、嚴重肝腎功能不全、惡性腫瘤、3個月內外科手術及腦卒中患者。對照組納入標準：心功能正常的竇性心律健康者。參照美國心臟病學學會/美國心臟協會/歐洲心臟病學學會（ACC/AHA/ESC）指南，將房顫組患者分為陣發性房顫組（n=14）及持續性房顫組（n=28）。陣發性房顫是指有房顫發作，發作持續時間<7 d，且24～48 h內可自行轉復;持續性房顫是指房顫持續時間≥7 d，未經處理不能自行轉復。所有患者常規進行詳細的病史采集及體格檢查，檢測血、尿常規，常規血生化檢查、心電圖、胸部X線和心臟彩超等。本研究已通過醫院醫學倫理委員會批準，入選對象均簽署知情同意書。

1.2方法

1.2.1主要實驗試劑? 用于酶聯免疫吸附（ELISA）檢測的IL-1β試劑盒（KGEMC003-1）、IL-8試劑盒（KGEMC008-1）、TNF-α試劑盒（KGEMC103a-1）均購自南京凱基生物有限公司。

1.2.2 ELISA檢測血漿IL-1β、IL-8、TNF-α水平? 從肘靜脈抽取空腹靜脈血5 ml，置于EDTA抗凝管中，離心分離血漿-80℃保存。采用ELISA法檢測房顫組及對照組血漿炎性標志物IL-1β、IL-8、TNF-α的水平。具體操作方法參照試劑盒說明書，酶標儀450 nm測量吸光度（OD值）。

1.2.3凝血功能檢查? 患者入院時均接受凝血功能指標檢查，包括凝血酶原時間（正常范圍11～14 s）、凝血酶時間（正常范圍12～16 s）、國際標準化比值（正常范圍0.8～1.2）。

1.3觀察指標

比較房顫組與對照組及不同凝血功能參數（凝血酶原時間、凝血酶時間、國際標準化比值）的IL-1β、IL-8、TNF-α水平，并分析IL-1β、IL-8、TNF-α與房顫患者血常規參數（白細胞計數、紅細胞計數、血小板計數、中性粒細胞百分比、淋巴細胞百分比、單核細胞百分比）的相關性。

1.4統計學方法

采用SPSS 19.0統計學軟件進行數據分析，符合正態分布的計量資料用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗，多組間比較采用單因素方差分析;不符合正態分布者轉換為正態分布后行統計學分析;相關性檢驗采用Pearson相關性分析，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1房顫組與對照組IL-1β、IL-8、TNF-α水平的比較

房顫組與對照組的IL-1β水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;房顫組的IL-8、TNF-α水平均明顯高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）（表1）。

2.2陣發性房顫組、持續性房顫組與對照組IL-1β、IL-8、TNF-α水平的比較

陣發性房顫組、持續性房顫組、對照組的IL-1β水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;陣發性房顫組、持續性房顫組的IL-8及TNF-α水平均明顯高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）;陣發性房顫組與持續性房顫組的IL-1β、IL-8、TNF-α水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）（表2）。

2.3不同凝血功能參數情況下房顫患者IL-1β、IL-8、TNF-α水平的比較不同凝血酶原時間、國際標準化比值情況下的IL-1β、IL-8、TNF-α水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;凝血酶時間>16 s患者的IL-1β、TNF-α水平均明顯高于凝血酶時間≤16 s（正常）患者，差異有統計學意義（P<0.05），但兩者的IL-8水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）（表3）。

3討論

研究表明炎癥在房顫的發生、發展中發揮了重要作用，多種炎性標志物與房顫的發生相關，并且抗炎治療有利于抑制房顫發生及減少房顫持續狀態[13-16]。本研究檢測了42例房顫患者血漿IL-1β、IL-8及TNF-α水平，以期分析上述炎性因子水平變化與房顫發生的關系。IL-1包括IL-1α和IL-1β兩種類型，由活化的巨噬細胞產生，在免疫應答和組織修復中發揮作用。本研究結果提示，房顫組與對照組的IL-1β水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）;陣發性房顫組與持續性房顫組的IL-1β水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）。IL-8又稱為趨化因子CXCL8，是趨化因子家族成員之一，主要由單核-巨噬細胞產生，通過結合IL-8受體α和β對中性粒細胞發揮細胞趨化作用，從而實現對炎癥反應的調節。本研究結果顯示，房顫組的血漿IL-8水平明顯高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），但不同類型房顫組的IL-8水平比較，差異無統計學意義（P>0.05），提示IL-8水平變化可能與房顫發生的誘因相關。TNF-α是一種主要由單核-巨噬細胞產生的促炎細胞因子，參與調節炎癥反應和免疫反應過程。本研究結果顯示，房顫組的TNF-α水平明顯高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），但不同類型房顫組的TNF-α水平比較，差異無統計學意義（P>0.05）。提示炎性因子IL-8、TNF-α的水平變化可能與房顫發生相關，但其具體機制仍需進一步研究闡明。

腦卒中是房顫患者的嚴重并發癥之一，研究證實房顫血栓前期（血液高凝狀態）發生血栓栓塞的風險增高，并且炎癥與血栓形成和內皮活化相關[9]。有研究者檢測了106例房顫患者和41例健康對照者的血液學指標，結果顯示，與健康對照者相比，房顫患者的血漿炎性因子水平、C反應蛋白及血液黏性均明顯增高，支持炎癥參與房顫發病過程的假說，同時也提示炎性指標改變與血液高凝狀態相關[10]。在此基礎上，筆者分析了不同凝血功能指標（凝血酶原時間、凝血酶時間、國際標準化比值）情況下房顫患者的血漿炎性因子水平變化，結果顯示，凝血酶時間>16 s患者的IL-1β、TNF-α水平均明顯高于凝血酶時間≤16 s（正常）患者，差異有統計學意義（P<0.05），提示凝血功能異常與炎癥相關。然而，關于炎性因子與房顫并發癥如腦卒中、血栓栓塞之間的關系仍需進一步研究闡明。

另外，本研究分析了炎性因子與房顫患者血常規參數的相關性，結果提示，IL-8水平與淋巴細胞百分比成正相關（P<0.05）。IL-8的生物學活性主要是趨化和激活中性粒細胞，對嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞和淋巴細胞也有一定作用。中性粒細胞與IL-8接觸后發生形態變化，定向游走到反應部位并釋放一系列活性產物，這些作用可導致機體局部的炎癥反應并達到殺菌和細胞損傷的目的[17]。有研究在整合臨床生物標志應用基礎上，建立了一套全身炎癥評分標準，具體指標包括白蛋白、中性粒細胞與淋巴細胞比例、血小板與淋巴細胞比例、淋巴細胞與單核細胞比例，結果顯示，淋巴細胞與單核細胞比例升高與房顫的發病風險降低相關[18]。提示淋巴細胞百分比可能是用于評估房顫患者全身炎癥狀態的有效指標。

綜上所述，IL-8及TNF-α在房顫患者中水平增高，提示其可能與房顫發生相關;IL-1β、TNF-α水平增高與房顫伴凝血功能異常相關。本研究對重要的炎性因子如IL-1β、IL-8、TNF-α與房顫的關系進行了探討，然而在這一領域仍然存在許多未知的問題需要進一步研究探索，如如何尋找新的有臨床意義的炎性標志物、如何進一步驗證炎性標志物對房顫發生的預測作用等。今后研究進一步闡明炎性因子在房顫發病機制中的作用，可為房顫的發病風險評估提供新的生物標志物。

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（收稿日期：2019-02-12? 本文編輯：任秀蘭）