辛酰羥肟酸含量測定方法

周嘉欣 陳玉娥 黃亮 張利萍

（廣州立白企業(yè)集團(tuán)有限公司，廣東廣州， 510170）

辛酰羥肟酸是一種收錄于《已使用化妝品原料名稱目錄》(2015年版)[1]，具有防腐性能的原料。但因?yàn)樗辉凇痘瘖y品安全技術(shù)規(guī)范》(2015年版)[2]防腐劑范圍內(nèi)，所以,它在配方中的用量并無嚴(yán)格限制。專利號(hào)CN102920612A[3]報(bào)道，當(dāng)它與苯氧乙醇等傳統(tǒng)防腐劑復(fù)配時(shí)，可達(dá)廣譜抗菌效果。

近十幾年，隨著對(duì)羥基苯甲酸酯類物質(zhì)的雌性激素潛在影響研究越來越深入，歐美等國對(duì)該類物質(zhì)在個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品中的應(yīng)用有了嚴(yán)格的含量限制[4-6]。辛酰羥肟酸除了具有一定的抗菌性能外，也具有一定的保濕、潤膚功能，所以,它很快地替代了對(duì)羥基苯甲酸酯類物質(zhì)，作為防腐劑及保濕劑用于膏霜、化妝水、面膜等個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品中。但是近期，有文獻(xiàn)[7]報(bào)道稱，辛酰羥肟酸會(huì)導(dǎo)致受損性皮膚或敏感性肌膚發(fā)生接觸性皮炎，它在個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品中的用量及濃度需要慎重選擇。

對(duì)辛酰羥肟酸進(jìn)行準(zhǔn)確的定量分析是辛酰羥肟酸應(yīng)用的基礎(chǔ)。鄭曉等[8]用紫外分光光度法測定水中的辛酰羥肟酸含量。該方法雖然原理簡單、儀器易得，但精密度較差、樣品pH值也需要嚴(yán)格控制。基于此，筆者建立了采用高效液相色譜-二極管陣列檢測器測定辛酰羥肟酸含量的方法，為后續(xù)個(gè)人護(hù)理產(chǎn)品中使用辛酰羥肟酸提供了一定的技術(shù)支持。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1主要儀器與試劑

Agilent1260高效液相色譜儀，配有G1315D二極管陣列檢測器，美國Agilent公司；ZORBAX SBC18色譜柱(4.6mm×250mm, 5μm)，美國Agilent公司；Sartorious電子天平，北京賽多利斯天平有限公司；Milli-Q去離子水發(fā)生器，美國Milli-Q公司；0.45μm微孔濾膜，天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司。乙腈、甲醇、無水乙醇，色譜純，德國默克公司；辛酰羥肟酸(辛基異羥肟酸)，標(biāo)準(zhǔn)品，阿拉丁(試劑)上海有限公司；辛酰羥肟酸原料，市售。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液：稱取標(biāo)準(zhǔn)品辛酰羥肟酸0.05g(精確至0.0001g)于25mL容量瓶，先加入1mL無水乙醇將標(biāo)準(zhǔn)品溶解，再加入去離子水定容至刻度，充分混勻，即得到標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液，備用。

標(biāo)準(zhǔn)工作液：分別移取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液3、4、6、8、10mL于10mL容量瓶中，用去離子水定容至刻度，搖勻，作為系列標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。

1.2.2 樣品溶液的配制

準(zhǔn)確稱取辛酰羥肟酸原料0.02g(精確至0.0001g)于25mL容量瓶，先加入1mL無水乙醇將樣品溶解，再加入去離子水定容至刻度，搖勻、超聲后用0.45μm的濾膜過濾后進(jìn)樣。

1.3色譜條件

ZORBAX SB-C18色譜柱(4.6×250mm, 5μm)；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；進(jìn)樣量：5μL；流動(dòng)相：乙腈-水=55:45(體積比)；檢測波長：218nm，參比波長：360nm。

2 結(jié)果與討論

2.1色譜分離條件的優(yōu)化

研究比較了2種相同規(guī)格(4.6mm×250mm, 5μm)的C18色譜柱(ZORBAX SB-C18、Agilent TC-C18)的分離效果及色譜峰形，結(jié)果表明，在上述色譜條件下，2種色譜柱都能達(dá)到較好的分離效果和良好的色譜峰形。考慮到方法的普及性，首先選用了高效液相色譜中最常用的C18柱(ZORBAX SB-C18)。

辛酰羥肟酸的結(jié)構(gòu)中含有羥基酰胺基團(tuán)，具有一定的極性。筆者考察了甲醇-水(75:25)(體積比)、乙腈-水(60:40)(體積比)、乙腈-水(55:45)(體積比)為流動(dòng)相。根據(jù)峰形和響應(yīng)等，最終選用乙腈-水(55:45)(體積比)為流動(dòng)相進(jìn)行分析，得到了較好的峰型。辛酰羥肟酸色譜圖見圖1-圖3。

2.2線性考察

取1.2.1所配制的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在1.3所確定的實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)辛酰羥肟酸進(jìn)行測定，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程及相關(guān)系數(shù)。辛酰羥肟酸的回歸方程為y=1.3334x- 18.536，相關(guān)系數(shù)R2=0.9992。從上述結(jié)果可看出：辛酰羥肟酸在112.0～1574.0mg/L的范圍內(nèi)具有良好的線性。具體標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖4。

2.3回收率與精密度

圖1 辛酰羥肟酸液相色譜圖(甲醇-水(75:25))

圖2 辛酰羥肟酸液相色譜圖(乙腈-水(60:40))

向辛酰羥肟酸原料樣品中添加3個(gè)濃度水平(約10mg、20mg、30mg)的辛酰羥肟酸標(biāo)準(zhǔn)工作液進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，每一水平設(shè)6個(gè)平行，按1.2.2樣品前處理方法制備待測樣品，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量，計(jì)算回收率，結(jié)果如表1所示。由表1可知：方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)＜5%；方法的加標(biāo)回收率為96.73%～101.39%，表明方法具有較好的準(zhǔn)確度和精密度。

2.4實(shí)際樣品的測定

用所建立的方法測定3個(gè)不同廠家的辛酰羥肟酸原料樣品，每個(gè)樣品溶液平行測定6次，結(jié)果見表2。由表2可知，不同廠家的辛酰羥肟酸原料樣品測試RSD均在2%以內(nèi)，表明該方法重復(fù)性良好。

3 結(jié)論

圖3 辛酰羥肟酸液相色譜圖(乙腈-水(55:45))

圖4 辛酰羥肟酸標(biāo)準(zhǔn)曲線

表1 辛酰羥肟酸原料的回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(n=6)

表2 不同廠家的辛酰羥肟酸原料中辛酰羥肟酸的含量測定

通過高效液相色譜-二極管陣列檢測器法測定辛酰羥肟酸原料中辛酰羥肟酸的含量和考察不同色譜柱、不同流動(dòng)相對(duì)色譜出峰情況的影響，可以得出：當(dāng)使用乙腈-水=55:45(體積比)為流動(dòng)相、色譜柱為ZORBAX SB-C18(4.6mm×250mm, 5μm)時(shí)，樣品出峰峰形對(duì)稱，重復(fù)性良好。該液相色譜測定法準(zhǔn)確、簡便、靈敏、重復(fù)性好、精密度高，可為相關(guān)產(chǎn)品的日常檢測提供參考。