反流吸入對哮喘患者誘導痰促炎性IL水平的影響研究

何勝東，楊樹棟，何新兵，張以昆，羅錦偉，黃志健

(廣西中醫藥大學第一附屬醫院仙葫院區心肺病科，南寧 530023)

支氣管哮喘是兒童和成人最常見的慢性非傳染性呼吸道疾病之一，全世界約有3.34億哮喘患者[1]。在發展中國家，哮喘患病率仍呈上升趨勢。2010-2012年我國8個省市支氣管哮喘流行病學調查結果顯示14歲以上人群哮喘患病率約為1.24%[2]。促炎性白細胞介素(interleukin,IL)參與哮喘氣道炎癥的發生。胃食管反流病(gastroesophageal reflux disease,GERD)是導致哮喘的一種非常重要的原因或誘發因素[3]。胃蛋白酶是胃內容物的重要成分，被視為胃內容物檢測的重要標志物。而痰液胃蛋白酶檢測是一項客觀診斷GERD氣道微吸入的方法[4]。本研究旨在通過檢測哮喘患者誘導痰胃蛋白酶和促炎性IL水平，明確GERD吸入是否通過增加氣道促炎性IL水平影響哮喘氣道炎癥，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1-6月本院心肺科門診的52例哮喘患者，其中男31例，女21例。哮喘診斷符合我國支氣管哮喘防治指南哮喘的診斷標準[5]。

1.2方法

1.2.1肺功能測定 應用德國JAEGER公司Master Screen型肺功能儀測定哮喘患者肺功能。

1.2.2痰的采集、處理和質量控制 參照中華醫學會呼吸病學分會哮喘學組咳嗽的診斷與治療指南(2015)中高滲鹽水霧化誘導痰炎性細胞檢測方法[6]進行，留取誘導痰上清液，于-80 ℃冰箱凍存待測。

1.2.3ELISA法檢測誘導痰胃蛋白酶水平 采用ELISA檢測誘導痰上清液中胃蛋白酶，ELISA試劑盒購自武漢華美生物公司，嚴格按照相關試劑說明書操作。參照李湘平等[7]鼻腔分泌物檢測標準，胃蛋白酶濃度大于0.108 1 ng/mL為陽性，反之為陰性。以胃蛋白酶陽性診斷胃食管反流吸入。

1.2.4ELISA法檢測誘導痰IL-6、IL-8和IL-13水平 采用ELISA檢測誘導痰上清液中IL-6、IL-8和IL-13的水平，ELISA試劑盒均購自武漢華美生物公司，嚴格按照相關試劑說明書操作。

2 結果

2.1男女哮喘患者反流吸入率比較 52例哮喘患者中15例哮喘患者誘導痰胃蛋白酶檢測陽性，其中男8例，女7例。哮喘患者伴反流吸入的比例為28.85%(15/52)，其中男女反流吸入比率分別為25.81%(8/31)和33.33%(7/21)，二者比較差異無統計學意義(χ2=0.35，P=0.56)。

2.2男女伴反流吸入哮喘患者誘導痰胃蛋白酶水平比較 男性伴反流吸入的哮喘患者誘導痰胃蛋白酶水平為(67.61±13.68)ng/mL，女性為(71.89±10.81)ng/mL，二者比較差異無統計學意義(P=0.52)。

表1 哮喘患者臨床特征比較

2.3有無反流吸入的哮喘患者臨床特征比較 有反流吸入與無反流吸入哮喘患者年齡、BMI、FEV1和FEV1/FVC比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，見表1。

2.4有無反流吸入的哮喘患者誘導痰IL-6、IL-8和IL-13水平比較 有反流吸入哮喘患者誘導痰IL-13、IL-6和IL-8水平顯著高于無反流吸入哮喘患者，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 誘導痰IL-13、IL-6和IL-8水平比較

3 討論

GERD是西方國家一種常見的慢性疾病，患病率高達10%～20%。我國GERD患病率低于西方國家，有研究統計為1.7%～7.3%[8-9]。因為臨床研究受樣本量和GERD診斷方法的影響，所以目前哮喘患者GERD的患病率的預計值差異很大，為30%～90%，其中隱匿性反流的患病率為9.6%～62.0%[3]。同時本研究還發現部分哮喘患者存在不同程度的反流微吸入。

性別可能是GERD的獨立危險因素。FAKHRE[10]報道了伊朗女性GERD患病率明顯高于男性。而本研究中男性和女性哮喘患者反流吸入率比較，差異無統計學意義(P>0.05)。有Meta分析顯示年齡和肥胖是GERD發病的危險因素[11]。而本研究中有反流吸入的哮喘患者與無反流吸入的哮喘患者年齡和BMI比較，差異均無統計學意義(P<0.05)。此外，與SACCO等[12]研究結果相似，本研究中有反流吸入的哮喘患者與無反流吸入的哮喘患者肺功能FEV1和 FEV1/FVC比較，差異也無統計學意義(P>0.05)。

哮喘和GERD相互影響。GERD可以誘發支氣管痙攣，加重或促發哮喘，其機制涉及反流物微吸入、食道-迷走神經反射和食道神經源性炎癥的形成。同時哮喘也可能引起GERD。一方面，哮喘患者因為胸腹腔壓力差增加，更易出現反流癥狀；另一方面，哮喘藥物(如β受體激動劑和茶堿)可以降低食管下段括約肌壓力，促進反流[3]。

哮喘是一類異質性疾病，具有不同的表型，其發病機制涉及環境和機體的多重因素。根據氣道潛在的炎癥類型，哮喘可以分為高輔助性T細胞(Th)2型和低Th2型[13]。本研究發現，與無反流吸入的哮喘患者相比，有反流吸入的哮喘患者誘導痰中Th2型炎性因子IL-13及非Th2炎性因子IL-6和IL-8均明顯升高。IL-6和IL-8可以誘導氣道中性粒細胞募集，而IL-13則參與嗜酸性氣道炎癥的發生[13]。無論是中性粒細胞炎癥，還是嗜酸性粒細胞炎癥都可以增加氣道高反應性和促進氣道重塑[14]。胃、十二指腸內容物反流吸入氣道后，胃酸、胃蛋白酶和膽汁酸鹽等成分可以誘發炎癥級聯瀑布效應，促進氣道炎癥發生，損傷氣道上皮[15]。在有類似哮喘癥狀的患兒中，有反流的患兒支氣管肺泡灌洗液中IL-8和中性粒細胞水平明顯高于無反流的患兒[12]。動物實驗也證實GERD增加哮喘大鼠支氣管肺泡灌洗液中IL-13和嗜酸性粒細胞水平[16]。

目前GERD的治療方式主要包括生活方式的改變和以質子泵抑制劑為代表的抗反流藥物治療[17]。就哮喘癥狀控制而言，僅是部分患者在抗反流藥物治療中獲益，部分患者抗反流藥物治療無效，甚至還有部分患者在抗反流藥物治療后出現哮喘癥狀加劇[18]。目前認為不伴有反流癥狀的未控制哮喘患者不應該抗反流治療[19]，抗反流治療對哮喘患者氣道炎癥和促炎性IL水平的影響亟待進一步研究。

綜上所述,反流吸入可誘發氣道炎癥級聯瀑布效應,導致IL-6、IL-8和IL-13等促炎性IL 水平上升,進而加重哮喘患者氣道炎癥。