杭曉潔
作為一名病理科技術員,每當身邊的親戚朋友們詢問我的職業時,他們往往對于我的職業感到非常陌生,甚至對于病理科這三個字也很少能有耳聞。但與此同時我又有一絲慶幸,因為接觸過醫院里的病理科并不是一件好事,往往一份癌癥病人的確診報告就是在那里誕生的。
根據國家癌癥中心公布的最新數字顯示,全國惡性腫瘤發病率為270.59/10萬,死亡率為163.83/10萬,面對這樣龐大的腫瘤人群,有好多人其實并不知道在各種腫瘤診斷技術中,病理診斷可以說是腫瘤診斷的“金標準”。簡單來說,病理診斷就是通過穿刺、切除或切取病變組織,將其制成病理切片通過顯微鏡觀察細胞形態做出診斷。
記得在病理科窗口工作時,每天都會有很多病人家屬都會來詢問,為什么報告還沒有好?抽血報告,B超報告等很快就能拿了,表示不能理解為什么這份報告需要至少4-5個工作日的時間,有些病人完全確診需要兩周及以上。一份病理報告的誕生并不是那么簡單,首先需要將一塊“肉”——病人手術中取下的懷疑病變組織通過很多環節制作成一張病理切片,整個過程需要經過固定、取材、脫水、包埋、染色、封片這些步驟。接下來一起跟著我去瞧一瞧吧。
1 固定標本
手術醫生將新鮮標本送至病理科巨檢室,雙人核對姓名、床號、住院號、標本部位以及標本數量這些信息,以最快的速度進行處理并將標本放置在10%中性福爾馬林固定液中,使組織得到充分的固定,而固定的作用就是為了防止組織自溶更重要的是保持組織或細胞的抗原性,這對于后期需要做免疫組化染色以及分子病理的病例相當重要。
固定前要根據標本的不同,進行相應的處理,以保證固定充分。比如像腸道標本就需要用剪刀沿著腸系膜對側剪開腸管,并將粘膜面向上平鋪釘于木板上。往往處理這些標本時場面也是比較血腥的,作為一個普通人可能無法想象,而對于病理科醫生來說這些都是家常便飯,在充斥著福爾馬林刺鼻氣味的巨檢室里,往往他們一站就是一個下午。
2 標本取材
待標本在固定液中浸泡8-24小時之后進入取材環節。取材醫生需要從組織中將病變的部位按照取材規范取成大約2*2*0.3厘米的組織塊。整個過程不僅要找到躲藏于標本中的那些小小的病灶,更要保證組織標本的完整,這些都要靠醫生的經驗以及觀察能力,需要注意力高度集中,隨時觀察病變部位與周圍組織的關系,才能一擊就中,挑中關鍵部位!不同的組織有不同的取材方法,對于第一次取材組織不能做出明確診斷時,必須再次甚至多次取材。
巨檢室的技術員會事先將取材時需要用到的包埋盒事先用打號機處理印上標本號碼,不同的專科部位則會體現在包埋盒的顏色上,這樣也便于取材醫生分專科取材,而事先處理好的標本也會分專科放置于專門的櫥柜中,這大大加快了處理標本的效率,使得相對繁瑣的工作變得更加井井有條起來。取完材后的組織將被放入包埋盒中送往制片室進行脫水處理。
3 標本脫水
接下來我們就要將這個包埋盒里的“肉”變成石蠟塊,首先我們就需要進行最重要的一個步驟就是脫水。 因為我們的標本經過固定和水洗后會含有大量的水分,而水和石蠟是不能混合的,因此在進行浸蠟和包埋前,必須進行脫水將組織內的水分通過某些溶液媒介置換出來,所以脫水后的組織會比脫水前的組織明顯“縮水”不少,這就得歸功于我們的溶液媒介了。而現在最常用的脫水劑是乙醇,因為其可以和水隨意混合,穿透速度很快,并且可以硬化組織。通過不同濃度的乙醇進行梯度脫水后,再利用二甲苯透明劑使石蠟能更好的浸入組織,最后進行三道石蠟的浸泡,整個脫水過程就完成了。現在病理科中使用的都是全自動脫水機,每臺脫水機大約一次可以脫水270個左右的組織,脫水時間為12個小時左右。
4 包埋、切片、染色
接下來的工作就是病理科技術人員大展身手的時刻了。完成浸蠟后的組織用鑷子夾取置于包埋框中,注入融化的石蠟,放在凍臺上等待冷卻,完全凝固后脫模,蠟塊就誕生了,這個過程就叫做包埋。這個步驟看上去相當簡單其實也蘊藏著專業技巧,包埋面必須平整,不能混入雜物,對于有特殊包埋需求的組織需要進行判斷,如有管腔的組織就需要將管腔豎立起來包埋,不清楚時需要與醫師及時溝通。特別是一些穿刺、胃鏡、腸鏡等標本,本身標本就比較小,包埋時更要平整,如果沒有包埋在同一個平面上,對于后面的切片步驟也會帶來不便。
組織經過蠟塊包埋后制成的蠟塊,需要通過技術人員使用切片機制成切片。這也是我們病理技術員的日常“一筆一鑷走天涯”。先將蠟塊固定在切片機上,修整蠟塊,使組織面完整暴露,再連續切片制成蠟帶,用鑷子將蠟帶置于水中,將微皺的組織撐開展平,用鑷子挑選最好的蠟片用載玻片撈起放置于50度左右的水中數秒,待完全平整后再用載玻片撈起平鋪在玻片的中央位置,這樣一張切片就完成了。
切片完成后依舊不能馬上進行顯微鏡的觀察,未經染色的切片在顯微鏡下只能看到細胞和組織的輪廓,遠遠不能滿足觀察及診斷的需要,所以還需要進行染色處理使不同的組織和細胞成分被染上不同的顏色,產生不同的折射率,便于在顯微鏡下進行觀察。染色前將組織玻片放入染色架中放置到60-70度的烤箱中,半個小時后待石蠟融化后就可以使用全自動染色機進行染色,過程約為45分鐘左右。使用的染色方法為蘇木素-伊紅染色法(簡稱HE染色法),將組織中的嗜堿性組織(如細胞質等)染成藍色,嗜酸性組織(胞質,核仁等)染成紅色,病理醫生就是通過捕捉這些紅藍相間的病理切片中的“異類”來進行診斷的。
5 疑問解答
5.1 去別的醫院會診的時候為什么要我們帶蠟塊啊?蠟塊不借怎么辦?
答:通常去其他醫院就診時,病理科醫生會根據個人情況的不同,要求在本醫院再做一次免疫組化的檢測,這個時候就會需要回原單位醫院借取蠟塊,若原單位蠟塊不能借出,則可以借白片,白片是從蠟塊上切下的未染色切片,作用與蠟塊相同。
5.2 為什么去取報告時還要再交錢做進一步檢測?加做檢測還需要做手術取組織嗎?
答:常規染色切片針對一些病例是不能滿足診斷要求的,需要通過加做免疫組化及分子檢測進一步診斷。這些診斷也是通過從病人已取組織蠟塊上的切片進行制作檢測的,病人只需等待結果即可。
5.3 為什么我的報告一直說要討論?為什么醫生的效率那么慢?
答:病理科醫生每一張切片都要去反復推敲,每一個異常的細胞都是診斷重要證據,遇到疑難病例時需要進行專科討論才能下最后的診斷,因為這一份報告決定了病人日后的治療方案和走向,絕不能輕易地下判斷。
經過了這些介紹是不是對于病理科有了更深一步的了解呢?從肉體上的組織再到最后一張張診斷報告,這當中承載著病理醫生與技術員的辛勞與汗水。也希望大家能夠對于這些“幕后英雄”抱以更多地理解與體諒。讓我們一起共同跨越“腫瘤”這道關卡,攜手面對健康美好的明天!
參考文獻
[1]姜元慶,馬越.病理檢驗技術. 北京:人民衛生出版社,2002
[2]全國衛生專業技術資格考試用書編寫專家委員會.病理學技術. 北京:人民衛生出版社,2016
作者簡介:
杭曉潔(1994-)女,專科,江蘇 ,漢族,病理技士,研究方向:病理技術。